一测多评法结合特征图谱的新疆紫草质量控制研究

作     者：李静 李耀磊 于健东 金红宇 马双成 昝珂 姚令文 LI Jing;LI Yao-lei;YU Jian-dong;JIN Hong-yu;MA Shuang-cheng;ZAN Ke;YAO Ling-wen

作者机构：中国食品药品检定研究院北京10005 

出 版 物：《药物分析杂志》 (Chinese Journal of Pharmaceutical Analysis)

年 卷 期：2020年第40卷第7期

页      面：1209-1216页

核心收录：

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100704[医学-药物分析学] 10[医学] 

基　　金：科技部重大新药创制(2018ZX09303-024 2018ZX09735-006) 

主　　题：新疆紫草 羟基萘醌 乙酰紫草素 β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁 β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁 异戊酰紫草素 高效液相色谱法 特征图谱 一测多评法 

摘      要：目的:采用一测多评(QAMS)与特征图谱结合的方法测定紫草中8个羟基萘醌(紫草素、β-羟基异戊酰紫草素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、去氧紫草素、异丁酰紫草素、β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁、异戊酰紫草素)的含量,并验证方法的准确性。方法:采用HPLC特征图谱进行色谱峰定位,并以乙酰紫草素为参照物,建立其对紫草素、β-羟基异戊酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、去氧紫草素、异丁酰紫草素、β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁、异戊酰紫草素的相对校正因子,用该校正因子进行相应成分的含量计算,实现一测多评;同时采用外标法测定新疆紫草中8个羟基萘醌的含量,并比较计算值与实测值的差异,以验证一测多评法的准确性和可行性。色谱条件:采用Agilent ZOBAX XDB-Eclipse色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.05%甲酸水溶液(70∶30),流速1.0 mL·min^-1,柱温30℃,检测波长275 nm,进样量10μL。结果:建立新疆紫草的特征图谱,标定了8个特征峰;12批样品色谱图的相似度均大于0.90。紫草素、β-羟基异戊酰紫草素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、去氧紫草素、异丁酰紫草素、β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁、异戊酰紫草素进样量分别在1.032~412.8μg·mL^-1(r=0.9999)、1.002~400.8μg·mL^-1(r=0.9998)、1.032~412.8μg·mL^-1(r=0.9999)、1.053~421.2μg·mL^-1(r=0.9999)、1.016~406.4μg·mL^-1(r=0.9998)、1.045~418.0μg·mL^-1(r=0.9999)、1.030~412.0μg·mL^-1(r=0.9999)和1.007~402.8μg·mL^-1(r=0.9999)范围内呈现良好线性关系;平均加样回收率(n=6)分别为98.4%(RSD=1.8%)、97.9%(RSD=1.9%)、98.6%(RSD=1.2%)、99.3%(RSD=1.6%)、101.1%(RSD=1.9%)、98.6%(RSD=1.3%)、99.0%(RSD=1.2%)和100.4%(RSD=1.4%)。紫草素、β-羟基异戊酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、去氧紫草素、异丁酰紫草素、β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁、异戊酰紫草素相对于乙酰紫草素的相对校正因子分别为1.263、1.161、0.938、1.840、1.039、1.138和0.932;且在不同实验条件下重现性良好(RSD3.0%);一测多评法的计算结果与外标法实测值之间无显著差异。12批新疆紫草中紫草素、β-羟基异戊酰紫草素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、去氧紫草素、异丁酰紫草素、β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁、异戊酰紫草素的含量范围分别为0.063%~0.222%、0.011%~0.053%、0.571%~1.621%、0.105%~0.364%、0.011%~0.059%、0.349%~0.727%、0.578%~1.353%和0.720%~1.761%。结论:建立的一测多评法结合特征图谱可用于新疆紫草中8个羟基萘醌类化学成分的含量测定,有效控制新疆紫草质量。