马立克氏病病毒gB部分基因的原核表达

作     者：邱亚峰 葛菲菲 陈溥言 QIU Ya-feng;GE Fei-fei;CHEN Pu-yan

作者机构：南京农业大学动物疫病诊断与免疫重点实验室南京210095 

出 版 物：《中国生物工程杂志》 (China Biotechnology)

年 卷 期：2006年第26卷第2期

页      面：62-65,98页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家"863"计划资助项目(2002AA245051) 

主　　题：马立克氏病病毒 原核表达 囊膜糖蛋白 表位 

摘      要：利用PCR技术扩增获得马立克氏病病毒(MDV)囊膜糖蛋白B(gB)基因部分片段,将其克隆入pET-28a载体中,获得表达载体pET-gB,将该载体转化宿主菌BL21,经1.0mmol/LIPTG诱导,外源基因以包涵体的形式获得高效表达。将包涵体溶解于8mol/L的尿素中,利用His·Bind试剂盒获得纯化的蛋白,将纯化的蛋白免疫小鼠,制备多克隆抗体,间接ELISA法测得抗体的效价为1×10-5。此外,通过Western blot实验表明,该抗体具有较高的特异性,为进一步探讨MDVgB所引起的特异的免疫反应奠定基础。