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上海市某腹泻猪群猪流行性腹泻病毒检测及全基因序列分析

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中国动物传染病学报 2024年第1期32卷 175-181页

作者：康龙山于慧茹杨德全李鑫沈海潇杨显超王建徐丽娜葛菲菲河北工程大学生命科学与食品工程学院邯郸056009 上海市动物疫病预防控制中心上海201103

猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染引起的仔猪严重腹泻性疾病,传播快,发病急,死亡率高,给我国养猪业造成巨大损失。2021年10月上海某猪场产房仔猪发生腹泻,发病率为30%~50%,死亡率为20%~30%,猪群之前进行过疫苗免疫。粪... 详细信息

猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染引起的仔猪严重腹泻性疾病,传播快,发病急,死亡率高,给我国养猪业造成巨大损失。2021年10月上海某猪场产房仔猪发生腹泻,发病率为30%~50%,死亡率为20%~30%,猪群之前进行过疫苗免疫。粪便样本经猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪轮状病毒(RV)荧光RT-PCR检测,结果显示:PEDV检测为阳性,TGEV和RV检测均为阴性。经全基因测序后进行系统进化分析,结果显示:全基因序列属于GⅡ-c亚群,S基因序列属于GⅡ-b亚群,与目前的经典疫苗株CV777和变异株AJ1102相比,CV777的全基因和S基因都属于GⅠ-b群,AJ1102的全基因和S基因都属于GⅡ-b亚群,研究结果表明新基因型的PEDV已在上海地区流行,而传统疫苗株无法提供好的免疫效果,提示新的防控策略的制定和有针对性的疫苗的生产和使用,对于预防PEDV感染和流行有重要意义。

关键词：猪流行性腹泻病毒系统进化 S基因

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纳米孔测序技术在动物疫病中应用的研究进展

畜牧与兽医 2024年第9期56卷 119-124页

作者：李鑫沈海潇葛菲菲杨德全鞠厚斌王建白艺兰桂亚萍赵洪进上海市动物疫病预防控制中心上海201103

第三代纳米孔测序是一种便携、方便、相对快速且经济有效的技术,具有长读长、高通量、实时提供测序数据等特点,在现场检测、临床诊断、流行病学调查和微生物鉴别等方面都有巨大的发展潜力。本文主要比较了下一代测序技术和第三代测序技... 详细信息

第三代纳米孔测序是一种便携、方便、相对快速且经济有效的技术,具有长读长、高通量、实时提供测序数据等特点,在现场检测、临床诊断、流行病学调查和微生物鉴别等方面都有巨大的发展潜力。本文主要比较了下一代测序技术和第三代测序技术的优缺点,讨论了纳米孔测序数据的相关分析,以及该技术在动物疫病临床应用的例子,展望了纳米孔测序技术的发展以及在动物疫病诊断与防控领域的潜在前景。

关键词：纳米孔测序数据分析动物疫病检测

PRRSV非结构蛋白2合成肽多克隆抗体的制备及应用

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中国动物传染病学报 2024年

作者：张彦兵解艺璇李慧肖长广葛菲菲刘珂魏建超李宗杰邵东华李蓓蓓马志永孙延鸣邱亚峰石河子大学动物科技学院上海市动物疫病预防控制中心中国农业科学院上海兽医研究所

本研究旨在利用PRRSV Nsp2合成肽进行多克隆抗体的制备，并分析了该抗体的特性。应用生物信息学技术预测获得PRRSV非结构蛋白Nsp2的抗原肽序列，并通过化学合成的方法获得抗原肽，将其与KLH载体蛋白进行偶联；随后，将偶联好的抗原肽与... 详细信息

本研究旨在利用PRRSV Nsp2合成肽进行多克隆抗体的制备，并分析了该抗体的特性。应用生物信息学技术预测获得PRRSV非结构蛋白Nsp2的抗原肽序列，并通过化学合成的方法获得抗原肽，将其与KLH载体蛋白进行偶联；随后，将偶联好的抗原肽与弗氏佐剂混合，通过对新西兰大白兔进行免疫获得的血清即为针对Nsp2的多克隆抗体；最后，利用ELISA、Western blot及间接免疫荧光法(IFA)对多克隆抗体的特性进行分析。研究结果显示：ELISA检测该多克隆抗体的效价超过105；Western blot检测可以特异性的检测到细胞过表达和不同毒株病毒感染的Nsp2蛋白；IFA检测分析得出，该多克隆抗体可有效地区分病毒感染和未感染的样品。此外，PRRSV Nsp2合成肽多克隆抗体还可以应用于不同毒株PRRSV感染样品的检测，这为进一步研究PRRSV Nsp2的功能提供了一个有效的工具。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒合成肽多克隆抗体非结构蛋白2

PRRSV非结构蛋白Nsp1α合成肽多克隆抗体的制备及应用

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中国动物传染病学报 2024年第3期32卷 19-26页

作者：解艺璇张彦兵李慧朱琳葛菲菲刘珂魏建超李宗杰邵东华李蓓蓓马志永孙延鸣邱亚峰石河子大学动物科技学院石河子832003 中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 上海市动物疫病预防控制中心上海201103

本研究尝试利用PRRSV Nsp1α合成肽进行多克隆抗体的制备,并对抗体的特性进行了分析。首先,利用生物信息学技术预测获得PRRSV非结构蛋白Nsp1α的抗原肽序列;随后,按照此序列合成获得抗原肽,并将其与KLH载体蛋白进行偶联;接下来,将偶联... 详细信息

本研究尝试利用PRRSV Nsp1α合成肽进行多克隆抗体的制备,并对抗体的特性进行了分析。首先,利用生物信息学技术预测获得PRRSV非结构蛋白Nsp1α的抗原肽序列;随后,按照此序列合成获得抗原肽,并将其与KLH载体蛋白进行偶联;接下来,将偶联好的抗原肽与弗氏佐剂混合,通过免疫大白兔制备针对Nsp1α合成肽的多克隆抗体;最后,利用ELISA、Western blot及间接免疫荧光法对多克隆抗体的特性进行了分析。结果显示:该多克隆抗体ELISA的效价超过105;利用Western blot可以检测到特异的Nsp1α表达条带,包括瞬时转染的样品和不同毒株病毒感染的样品;利用间接免疫荧光法分析,该多克隆抗体可有效地区分病毒感染和未感染的样品。结果表明,PRRSV Nsp1α合成肽多克隆抗体可以有效地应用于PRRSV Nsp1α表达检测,为进一步研究PRRSV Nsp1α的功能提供了一个有效的工具。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒合成肽多克隆抗体非结构蛋白

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基于多目标优化和多属性决策的一维下料问题研究

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基于多目标优化和多属性决策的一维下料问题研究

作者：葛菲菲合肥工业大学

学位级别：硕士

如何提高原材料利用率，降低成本是每个制造型企业最为关注的问题。因此，下料问题在企业生产中有着广泛的应用。本文首先综述了下料问题的研究背景、研究意义，基本概念、分类以及研究的现状。然后，根据企业实际生产的研究，... 详细信息

如何提高原材料利用率，降低成本是每个制造型企业最为关注的问题。因此，下料问题在企业生产中有着广泛的应用。本文首先综述了下料问题的研究背景、研究意义，基本概念、分类以及研究的现状。然后，根据企业实际生产的研究，建立一个将目标定为最小化原料浪费、最小化下料方式数和最小化可用余料返回的一维下料模型。运用多目标优化和多属性决策相结合的方法设计下料决策方法，即先用非支配排序启发式进化算法求出问题的Pareto最优解集，再运用多属性决策方法选出一个满意解作为下料方案。通过实例运算验证，该方法能在可接受的时间复杂性前提下得到满意的下料方案。

关键词：一维下料非支配排序启发式进化算法多目标优化多属性决策

禽网状内皮组织增殖病病毒PCR及RT-PCR检测方法的研究和p30主要抗原域的原核表达

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禽网状内皮组织增殖病病毒PCR及RT-PCR检测方法的研究和p30主要抗...

作者：葛菲菲南京农业大学

学位级别：硕士

根据MONA ***发表的一对引物，5’-CATACTGGAGCCAATGGTGTAAA GGGCAGA-3’(上游引物)，5’-AATGTTGTAGCGAAGTACT-3’(下游引物)，上游引物位于REV-SNV毒株LTR序列上游237nt到267nt，下游引物在499nt到517nt之间，扩增产物总长为281bp。以REV-T株感染的鸡胚成纤维细胞DNA作为PCR扩增模板，进行PCR扩增，提取病毒RNA进行RT-PCR，这两种方法均获得了禽网状内皮增生症T株的部分LTR序列，将其克隆入pGEM-T Easy克隆载体中，经测序，证实为禽网状内皮增生症T株的部分LTR序列，初步建立了REV的PCR和RT-PCR检测方法。人工合成了REV的主要抗原域p30，用构建成功的表达禽网状内皮增生症主要原域的原核表达载体pET-p30，转化大肠杆菌BL，挑取阳性克隆培养，IPTG诱导后裂解菌体作SDS—PAGE分析，出现大小约30KD的表达产物即融合蛋白TrxA—p30，经Western—blot验证融合蛋白具有REV特异的反应原性。采用常规表达条件：LB培养基，37℃培养，待菌生长至OD为0.4-0.6时，用终浓度为0.2-0.8mmol／L的IPTG进行诱导，于37℃振荡培养4-5h，均能高效表达。为建立REV抗体的ELISA检测方法打下基础。

关键词：禽网状内皮增生症病毒聚合酶链式反应反转录聚合酶链式反应 p30蛋白主要抗原域原核表达系统融合蛋白 Western-blot

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网络化制造的自适应性周期演化研究

网络化制造的自适应性周期演化研究

作者：葛菲菲兰州大学

学位级别：硕士

网络化制造是一种先进制造形式,在国内外制造业普遍被使用,也是学术研究的热点问题。生命周期理论作为一种可以用于描述社会生态系统演化问题的经典模型在网络化制造演化问题的研究中也获得学者的广泛使用。通常生命周期理论将网络化制... 详细信息

网络化制造是一种先进制造形式,在国内外制造业普遍被使用,也是学术研究的热点问题。生命周期理论作为一种可以用于描述社会生态系统演化问题的经典模型在网络化制造演化问题的研究中也获得学者的广泛使用。通常生命周期理论将网络化制造演化简单分为四个阶段,然而网络化制造系统具有复杂性特征,这使得简单的生命周期理论的四阶段模型对于这一问题的描述存在很多局限性。本文首先对网络化制造演化的生命周期理论模型的两条分析视角进行分析,并在此基础上进一步分析推到出该理论模型在这一问题的研究中所具有的局限性,即简单的生命周期理论模型并不具有描述网络化制造演化的“本体性”。接下来笔者对网络化制造系统的复杂性特征进行了剖析,得出了网络化制造的七个基本复杂性特征。通过对复杂适应系统对于描述网络化制造演化问题的适用性分析和对几种复杂系统元模式与网络化制造演化的拟合度比较,得到了最贴近网络化制造复杂演化过程的模型特征。之后在此基础上提出了网络化制造演化的自适应性周期演化模型,并通过对网络化制造系统与其所处的外界市场环境之间的交互影响的分析,对模型进行了修正,使得模型更加符合复杂的现实情境。最后根据网络化制造演化的自适应性周期模型提出了未来对这一问题研究的理论创新贡献与现实生产经营建议。本文在对网络化制造复杂性特征和网络化制造演化的生命周期理论模型局限性分析的基础上,提出了网络化制造的自适应性周期演化模型,对网络化制造简单的生命周期演化模型进行了修正和补充,也为未来网络化制造演化问题的研究提供了新的研究视角与方法。

关键词：网络化制造演化生命周期复杂系统自适应性周期

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多目标一维下料决策方法研究

中国机械工程 2013年第7期24卷 951-955,963页

作者：刘林葛菲菲刘心报合肥工业大学过程优化与智能决策教育部重点实验室合肥230009

研究目标为最小化原料浪费、最小化下料方式数和最小化可用余料返回的多目标优化下料问题。运用多目标优化和多属性决策相结合的方法设计下料决策方法,即先用改进的非支配排序启发式进化算法求出问题的Pareto最优解集,再采用综合主客观... 详细信息

研究目标为最小化原料浪费、最小化下料方式数和最小化可用余料返回的多目标优化下料问题。运用多目标优化和多属性决策相结合的方法设计下料决策方法,即先用改进的非支配排序启发式进化算法求出问题的Pareto最优解集,再采用综合主客观赋权法计算各优化目标的权重,最后运用多属性决策方法选出一个满意解作为下料方案。实验结果证实所提方法对多目标下料决策是有效的。

关键词：下料问题多目标优化多属性决策综合赋权法

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习近平构建人类命运共同体重要论述研究

习近平构建人类命运共同体重要论述研究

作者：葛菲菲云南师范大学

学位级别：硕士

世界是一个相互联系的整体,现在正处于大发展大变革大调整的时期,经济全球化、社会信息化和文化多样化给全球发展带来了前所未有的机遇,也带来了更多的不确定性和不稳定性,比如霸权主义、金融危机、恐怖主义等。面对复杂多变的世界,以... 详细信息

世界是一个相互联系的整体,现在正处于大发展大变革大调整的时期,经济全球化、社会信息化和文化多样化给全球发展带来了前所未有的机遇,也带来了更多的不确定性和不稳定性,比如霸权主义、金融危机、恐怖主义等。面对复杂多变的世界,以习近平同志为核心的党中央把握时代潮流,提出“构建人类命运共同体”,寻求全球范围内人类共同发展,推动构建全方位、多层次的命运共同体。构建人类命运共同体重要论述是习近平新时代中国特色社会主义思想的重要组成部分,展现了新时代中国特色大国外交的特色,是中国作为负责任的大国为解决世界多重问题所提供的中国方案。由此,构建人类命运共同体的重要性就不言而喻了。本文以马克思主义理论和习近平新时代中国特色社会主义思想为基础,在明确人类命运共同体的背景和涵义下,探求推动构建人类命运共同所产生的意义。本文分为四个部分,其中在绪论中提出选题缘由、研究现状与研究方法、思路及创新之处;第一章主要梳理了构建人类命运共同体的提出背景,包括思想渊源与现实基础;第二章论述了构建人类命运共同体重要论述的丰富内容;第三章探讨了推动构建人类命运共同体的当代意义和价值。

关键词：习近平新时代中国特色社会主义人类命运共同体当代意义