鳖甲煎丸对AngⅡ-ROS诱导下HSC-LX2细胞中PKC-Pyk2/SRC通路的影响

作     者：曹晓倩 董文珠 王璐 陈杭萍 姚立 CAO Xiaoqian;DONG Wenzhu;WANG Lu

作者机构：浙江中医药大学杭州310053 

出 版 物：《浙江中医药大学学报》 (Journal of Zhejiang Chinese Medical University)

年 卷 期：2019年第43卷第4期

页      面：297-304页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：浙江省自然科学基金项目(LY16H280009) 国家自然科学基金项目(81173640) 浙江中医药大学预研项目(2016ZG11)~~ 

主　　题：肝纤维化 HSC-LX2 AngⅡ ROS PKC Pyk2 SRC 鳖甲煎丸 

摘      要：[目的]探讨鳖甲煎丸含药血清对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱生的活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)作用下HSC-LX2细胞中蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)-富含脯氨酸的酪氨酸激酶2(proline-rich tyrosine kinase 2,Pyk2)/SRC通路的影响。[方法]以人源肝星状细胞HSC-LX2为研究对象,以AngⅡ诱导产生ROS,再以鳖甲煎丸含药血清进行干预,以MTT法检测HSC-LX2细胞的增殖情况,荧光探针DCFH-DA检测细胞内ROS含量,Western blot检测PKC、Pyk2、SRC蛋白表达情况。[结果] MTT结果显示,与AngⅡ组比较,5%鳖甲煎丸含药血清培养24h后,鳖甲煎丸高、中剂量组显著抑制HSC-LX2细胞增殖(P0.05)。荧光探针DCFH-DA结果显示,与空白对照组比较,AngⅡ组ROS产生明显增多,经鳖甲煎丸含药血清高、中剂量组干预后,ROS均不同程度减少。Western blot显示,鳖甲煎丸含药血清干预后,PKC(P0.001,P0.001,P0.001)、Pyk2(P0.05,P0.001,P0.001)、SRC(P0.001,P0.001,P0.01)蛋白表达均受到显著抑制。[结论] HSC-LX2细胞经AngⅡ刺激后可以产生ROS,且细胞增殖明显,此过程与PKC、Pyk2、SRC蛋白的激活有关。鳖甲煎丸可通过减少ROS的产生来阻止HSC-LX2细胞的增殖,其机制与抑制PKC、Pyk2、SRC蛋白的表达有关。