烟实夜蛾触角普通气味结合蛋白ⅡcDNA的克隆、序列分析及在大肠杆菌中的表达
Cloning and sequencing of cDNA encoding general odorant binding protein Ⅱ in the antenna of Helicoverpa assulta (Guenée)and its expression in Escherichia coli作者机构：河南农业大学植物保护学院郑州450002 浙江大学应用昆虫学研究所杭州310029
出 版 物：《昆虫学报》 (Acta Entomologica Sinica)
年 卷 期：2005年第48卷第1期
页 面：18-23页
核心收录：
学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 07[理学]
基 金：河南省自然科学基金资助项目 (0 3 110 3 170 0 )
主 题：烟实夜蛾 普通气味结合蛋白 触角 基因克隆 原核表达
摘 要：利用RT PCR技术扩增了编码烟实夜蛾Helicoverpaassulta雌、雄虫触角普通气味结合蛋白Ⅱ的cDNA片段 ,将其克隆至pGEM TEasy载体 ,获得了普通气味结合蛋白Ⅱ基因成熟蛋白阅读框序列。将该基因重组到表达型质粒pET 30a(+)中 ,并转化入原核细胞中表达。序列测定结果表明 ,烟实夜蛾触角普通气味结合蛋白基因的成熟蛋白阅读框全长 4 89bp ,编码 16 2个氨基酸残基 ,预测分子量和等电点分别为 18 2kD和 5 35。推导的氨基酸序列与已报道的 10种昆虫普通气味结合蛋白Ⅱ高度同源 (73%～ 98% ) ,并具有气味结合蛋白的典型特征。SDS PAGE和Western印迹分析表明 ,经IPTG诱导 ,普通气味结合蛋白Ⅱ基因能在大肠杆菌BL2 1(DE3)中表达 ,电泳检测到一条约 2 3kD大小的外源蛋白 ,与预测的融合蛋白分子量大小相应。
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