干细胞来源DC与CIK共培养抗K562／A02干细胞的体外研究

作     者：梁芳芳 庞华 司玉玲 孙雯雯 窦金霞 LIANG Fangfang;PANG Hua;SI Yuling;SUN Wenwen;DOU Jinxia

作者机构：天津医科大学研究生院300070 天津市第四中心医院肿瘤血液科 天津医科大学研究生院中心实验室 

出 版 物：《天津医药》 (Tianjin Medical Journal)

年 卷 期：2013年第41卷第4期

页      面：289-292,I0001页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：天津市自然科学基金资助项目(项目编号:12JCYBJC16500) 天津市卫生局科技基金资助项目(项目编号:11KG114) 

主　　题：白血病 髓系 慢性 BCR—ABL阳性 干细胞 树突细胞 杀伤细胞 P糖蛋白 细胞凋亡 K562细胞 

摘      要：目的研究慢性粒细胞白血病(CML)源干细胞体外诱导生成树突细胞(DC)与同来源的细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)共培养,对白血病耐药株K562/A02干细胞(LSC)的杀伤作用。方法提取BCR/ABL阳性CML患者骨髓单个核细胞(BMMC),流式分选技术分离纯化CD34+CD38-干细胞,体外扩增诱导生成DC。取同来源的CML患者BMMC诱导出CIK。DC与CIK共培养,流式细胞术(FCM)检测其对K562/A02干细胞的凋亡及杀伤情况。光镜下观察细胞形态,FCM分析DC和CIK免疫表型、K562/A02及DC的P-糖蛋白(P-gp)表达情况,荧光原位杂交(FISH)检测BCR/ABL融合基因在LSC及DC中的表达。结果 LSC能成功诱导为成熟DC,且LSC来源DC的P-gp阳性表达率约为51.8%。DC免疫表型CD40、CD80、CD83、CD86以及HLA-DR的表达率均高于共培养前;共培养后CIK免疫表型CD3、CD8、CD56的表达率高于单独培养的CIK,差异均有统计学意义(P0.01)。DC与CIK共培养后对CD34+CD38-干细胞的杀伤效应明显高于单独培养的CIK。CIK、DC-CIK均可诱导K562/A02细胞凋亡,凋亡率分别为(32.56±3.20)%、(40.21±3.09)%,且2组比较差异有统计学意义(P0.01),但对CD34+CD38-干细胞无明显的诱导凋亡作用。结论来源LSC的DC功能正常,同时该来源DC联合CIK能杀伤K562/A02干细胞,但对其无明显凋亡作用。