脱氢表雄酮调节HepG2/GFP-HBx细胞p16基因甲基化及其与细胞周期和凋亡的相关性

作     者：吕元 邓春平 黄冰 郭中敏 钟翎 LV Yuan;DENG Chun-ping;HUANG Bin;GUO Zhong-min;ZHONG Ling

作者机构：中山大学药学院广东广州510006 中山大学眼科中心广东广州510060 

出 版 物：《中国实验动物学报》 (Acta Laboratorium Animalis Scientia Sinica)

年 卷 期：2009年第17卷第3期

页      面：180-185页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 1002[医学-临床医学] 07[理学] 071009[理学-细胞生物学] 09[农学] 100214[医学-肿瘤学] 0901[农学-作物学] 090102[农学-作物遗传育种] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(编号:30873457) 广东省科技计划项目(编号:2008A060202010)资助 

主　　题：p16基因 甲基化 脱氢表雄酮 HBx 细胞周期 细胞凋亡 

摘      要：目的探讨HBx与p16基因甲基化的关系,研究脱氢表雄酮(DHEA)对p16基因甲基化以及细胞周期和细胞凋亡的调节作用。方法以HepG2、HepG2/GFP和HepG2/GFP-HBx三种细胞为材料,采用MTT法检测细胞生长;流式细胞术检测细胞周期和凋亡率;MSP-PCR检测p16基因甲基化水平。比较分析HBx与p16基因启动子甲基化、DHEA与各检测指标的关系。结果HepG2/GFP-HBx细胞与HepG2细胞和HepG2/GFP细胞相比,细胞的增殖速度提高(P0.05),G0/G1期细胞减少,S期细胞增多(P0.05),凋亡率降低(P0.05);HepG2/GFP-HBx细胞的p16基因启动子呈现高水平甲基化,HepG2和HepG2/GFP细胞呈现高水平非甲基化。100μmol/L的DHEA使三种细胞的增殖速度降低(P0.05),G0/G1期细胞增加,S期细胞减少(P0.05),凋亡率提高(P0.05)。DHEA可下调HepG2/GFP-HBx细胞的p16基因启动子甲基化水平,但对HepG2和HepG2/GFP细胞的p16基因启动子甲基化水平不产生影响。结论HBx引起肝癌细胞p16基因甲基化,并缩短细胞周期抑制细胞凋亡;DHEA可明显下调HBx引起的p16基因甲基化水平,延长细胞周期促进细胞凋亡,在无HBx基因整合的情况下,DHEA对肝癌细胞生长、细胞周期和凋亡的影响不通过p16基因甲基化的途径实现。