超氧化物歧化酶吸附分离-化学修饰的耦合过程
Coupled procedure of SOD purification and modification作者机构:浙江工业大学药学院浙江杭州310032 杭州九源基因工程有限公司浙江杭州310018
出 版 物:《化工进展》 (Chemical Industry and Engineering Progress)
年 卷 期:2009年第28卷第1期
页 面:135-140页
核心收录:
学科分类:0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术]
主 题:超氧化物歧化酶 化学修饰 离子交换层析 金属鳌合层析 耦合过程
摘 要:以超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)为模板蛋白,将其分离纯化过程和修饰过程耦合起来,从而获得比活更高、稳定性更好的修饰SOD。将SOD选择性地吸附在DEAE-52层析柱和铜离子螯合葡聚糖凝胶柱上,先不经洗脱分离,直接用活化的聚乙二醇(PEG)5000对吸附在柱上的SOD进行化学修饰,再通过特异性洗脱分离获得PEG-SOD,使SOD分离纯化和修饰过程同步完成。SOD通过离子交换吸附层析-PEG修饰耦合过程和金属螯合层析-PEG修饰耦合过程,所得的PEG-SOD比活力分别为9638.0U/mg和9067.8U/mg,纯化倍数分别为1.87倍和1.755倍,氨基修饰率分别为35.3%和40.9%。结果表明SOD的分离纯化-化学修饰耦合过程是可行的,且金属螯合层析-修饰耦合过程的效果要优于离子交换吸附层析-修饰耦合过程。