超氧化物歧化酶吸附分离-化学修饰的耦合过程

作     者：李东华 王鸿 孙汉栋 易喻 应国清 Li Donghua;WANG Hong;SUN Handong;YI Yu;YING Guoqing

作者机构：浙江工业大学药学院浙江杭州310032 杭州九源基因工程有限公司浙江杭州310018 

出 版 物：《化工进展》 (Chemical Industry and Engineering Progress)

年 卷 期：2009年第28卷第1期

页      面：135-140页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 

基　　金：浙江省重大科技攻关项目(2005C13025) 

主　　题：超氧化物歧化酶 化学修饰 离子交换层析 金属鳌合层析 耦合过程 

摘      要：以超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)为模板蛋白,将其分离纯化过程和修饰过程耦合起来,从而获得比活更高、稳定性更好的修饰SOD。将SOD选择性地吸附在DEAE-52层析柱和铜离子螯合葡聚糖凝胶柱上,先不经洗脱分离,直接用活化的聚乙二醇(PEG)5000对吸附在柱上的SOD进行化学修饰,再通过特异性洗脱分离获得PEG-SOD,使SOD分离纯化和修饰过程同步完成。SOD通过离子交换吸附层析-PEG修饰耦合过程和金属螯合层析-PEG修饰耦合过程,所得的PEG-SOD比活力分别为9638.0U/mg和9067.8U/mg,纯化倍数分别为1.87倍和1.755倍,氨基修饰率分别为35.3%和40.9%。结果表明SOD的分离纯化-化学修饰耦合过程是可行的,且金属螯合层析-修饰耦合过程的效果要优于离子交换吸附层析-修饰耦合过程。