人IL-18cDNA克隆及原核表达
Gene cloning and prokaryotic expression of recombinant human interleukin-18作者机构:西安交通大学免疫病理研究室西安710061
出 版 物:《西安医科大学学报》 (Journal of Xi'an Medical University(Chinese))
年 卷 期:2001年第22卷第4期
页 面:301-303页
学科分类:0710[理学-生物学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 07[理学] 08[工学] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 10[医学]
主 题:人白细胞介素18 基因克隆 原核表达 IL-18cDNA 细胞因子 克隆人
摘 要:目的 从外周血单核细胞中克隆人IL 1 8成熟编码序列cDNA ,对其进行测序并构建原核表达载体 ,进行原核表达。方法 从人外周血单核细胞中分离总RNA ,进行RT PCR获得人IL 1 8cDNA。测序证实其结果正确后 ,构建原核表达载体。E .coli的表达产物通过SDS PAGE、WesternBlot证实。结果 所克隆的人IL 1 8cDNA编码序列经测序证实与GenBank所报道的序列完全一致 ,细菌表达产物经SDS PAGE证实其大小约为 1 8.3KDa,WesternBlot进一步证实了所表达产物的正确性。结论 本研究结果为进一步探讨IL 1 8的生物学活性和特性奠定了基础 ,同时亦为利用人IL 1 8进行免疫基因治疗的研究打下了良好的基础。