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pcDNA3.1-mAFP真核表达载体的构建及其在293细胞中的表达

Construction of recombinant eukaryotic expression vector pcDNA3.1-mAFP and alpha fetoprotein expression in 293 cells

作     者:匡志鹏 谢裕安 梁安民 罗小玲 吴继宁 KUANG Zhi-peng;XIE Yu-an;LIANG An-min;LUO Xiao-ling;WU Ji-ning

作者机构:广西医科大学附属肿瘤医院生物医学研究中心广西南宁530021 

出 版 物:《中国现代医学杂志》 (China Journal of Modern Medicine)

年 卷 期:2007年第17卷第9期

页      面:1059-1061页

学科分类:1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基  金:国家自然科学基金(30360114) 

主  题:小鼠甲胎蛋白 重组真核表达载体 pcDNA3.1 原发性肝癌 

摘      要:目的构建真核表达载体pcDNA3.1-mAFP,观察其在293肿瘤细胞中的表达情况。方法从Hepa1-6小鼠肝癌细胞中提取总RNA,设计特异性引物,通过RT-PCR法扩增小鼠甲胎蛋白(mAFP)基因编码区全长序列,测序确认后,插入到pcDNA3.1真核表达载体中,双酶切鉴定。用Lipofectamine脂质体将构建的重组载体转染293肿瘤细胞,检测AFP蛋白在293细胞中的表达情况。结果成功克隆了mAFP基因编码区全长序列,构建出重组真核表达载体pcDNA3.1-mAFP,脂质体转染后可检测到mAFP基因在293细胞中的表达。结论该研究成功构建了重组pcDNA3.1-mAFP真核表达载体,为进一步开展原发性肝癌的靶向性基因治疗奠定了基础。

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