芽胞杆菌CQBS03抑菌蛋白TasA基因的克隆及原核表达

作     者：龙贤梨 王中康 陈玉龙 殷幼平 

作者机构：重庆大学生物工程学院重庆市杀虫真菌生物农药工程技术中心重庆市基因功能与调控重点实验室重庆400030 

出 版 物：《植物保护学报》 (Journal of Plant Protection)

年 卷 期：2012年第39卷第5期

页      面：438-442页

核心收录：

学科分类：09[农学] 0904[农学-植物保护] 

基　　金：公益性行业(农业)科研专项(201003067-02-5) 农业部专项(农财发【2009】137号) 

主　　题：芽胞杆菌CQBS03 柑桔溃疡病菌 TasA基因 抑菌蛋白 基因克隆 

摘      要：为了探讨柑桔溃疡病生防菌芽胞杆菌Bacillus CQBS03菌株TasA基因的功能,采用PCR方法从CQBS03基因组DNA中扩增出编码TasA基因的全长DNA序列,并构建pEASY-E1/TasA原核表达载体,经大肠杆菌Escherichia coli表达获得TasA基因的融合表达蛋白,纸碟法检验融合蛋白对柑桔溃疡病菌Xanthomonas citri citri的抑制作用。结果显示,CQBS03菌株的TasA基因包含1个786 bp的完整开放阅读框(GenBank登录号为JQ309841),编码261个氨基酸残基;该序列与来源于解淀粉芽胞杆菌***的1个已知同源TasA基因序列FJ713580的相似性达99.75%。原核表达产物经SDS-PAGE分析,检测到约31 kD的融合蛋白;纯化后的融合蛋白对柑桔溃疡病菌有明显的抑制作用,72 h后抑菌圈直径达11.5 mm。研究表明TasA基因是生防菌芽胞杆菌CQBS03抑制柑桔溃疡病菌的功能基因之一,并且该基因对原核表达宿主没有抑制作用,具有较好的开发利用前景。