ATP5J促进猪繁殖与呼吸综合征病毒复制研究

作     者：王飞飞 刘珂 郇贝丽 欧安妮 魏建超 李蓓蓓 邵东华 邱亚峰 钱莺娟 JUNG Yong-Sam 马志永 WANG Feifei;LIU Ke;HUAN Beili;OU Anni;WEI Jianchao;LI Beibei;SHAO Donghua;QIU Yafeng;QIAN Yingjuan;JUNG Yong-Sam;MA Zhiyong

作者机构：南京农业大学动物医学院/教育部动物健康与食品安全国际合作联合实验室江苏南京210095 中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 

出 版 物：《畜牧与兽医》 (Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2018年第50卷第8期

页      面：54-58页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：973计划(2014CB542702) 

主　　题：猪繁殖与呼吸综合征病毒 ATP5J 基因调节 病毒复制 

摘      要：为了研究猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）复制与细胞调控酶ATP5J的关系,本研究首先对猪源ATP5J基因进行了抗原表位分析,选取并合成了3段抗原小肽,制备ATP5J的多克隆的抗体。用制备的多抗检测了ATP5J质粒在293T细胞中过表达的情况。然后,用PRRSV感染猪肺泡巨噬细胞（PAMs）,利用qPCR和Western blot检测PRRSV感染对PAM细胞中ATP5J表达的影响。最后,我们通过小RNA干扰以及过表达ATP5J,使用qPCR和Western blot技术,在PAM和Marc-145细胞上检测ATP5J变化对PRRSV复制增殖的影响。结果显示：PRRSV感染能够导致宿主细胞ATP5J蛋白表达下调;ATP5J下调时,PRRSV复制减弱;ATP5J过表达时,PRRSV复制增强,说明ATP5J能够促进PRRSV复制增殖。进一步分析证明：ATP5J促进PRRSV复制功能没有剂量依赖性。综上,PRRSV感染能够导致宿主细胞ATP5J蛋白表达下调,而ATP5J具有促进PRRSV复制的作用。该研究为阐明PRRSV与宿主相互作用提供了新思路,为解析PRRSV免疫抑制和免疫逃逸机制奠定了基础。