N-己烷壳聚糖的制备、细胞毒性与凝血性能

作     者：刘梦媛 荆妙蕾 关静 黄姝杰 杨健 李志宏 Liu Meng-yuan;Jing Miao-lei;Guan Jing;Huang Shu-jie;Yang Jian;Li Zhi-hong

作者机构：天津工业大学纺织学院天津市300387 军事医学科学院卫生装备研究所天津市300161 

出 版 物：《中国组织工程研究》 (Chinese Journal of Tissue Engineering Research)

年 卷 期：2018年第22卷第22期

页      面：3520-3526页

学科分类：0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 08[工学] 0836[工学-生物工程] 

基　　金：国家自然科学基金(31570956)~~ 

主　　题：壳聚糖 细胞毒性试验 免疫 血液流变学 止血 烷基化 FTIR测试 MTT 荧光染色 全血凝固 静态流变 动态流变 生物材料 血浆凝固 国家自然科学基金 

摘      要：背景:尽管壳聚糖是一种天然止血材料,但其对严重大出血创面的止血效果尚不明显,需要进一步的改性研究。且在壳聚糖中引入较短碳链的烷基(己烷)对凝血效果的影响也不明确。目的:合成N-己烷壳聚糖,研究其细胞毒性与凝血效果。方法:还原氨化法制备N-己烷壳聚糖,傅氏转换红外线光谱分析仪、元素分析法完成结构表征;MTT比色法和荧光标记法测试其细胞毒性;全血凝固时间、流变性能和血浆凝固实验评价其凝血性能。结果与结论:(1)傅氏转换红外线光谱分析仪、元素分析法均证实合成的产物是N-烷基化壳聚糖,取代度分别为8.67%,18.06%,32.88%;(2)MTT结果显示N-己烷壳聚糖的毒性分级是0级和1级。荧光染色表明与各组材料作用后,L929细胞生长旺盛,几乎无死细胞,提示明材料毒性作用小;(3)与壳聚糖相比,N-己烷壳聚糖具有明显促凝作用,且取代度越大其促凝作用越强。血浆凝固时间结果发现各组间活化部分凝血活酶时间、凝血酶原时间、凝血酶时间相比均无显著性差异(P0.05),提示N-己烷壳聚糖不能促进凝血因子活化,其促凝机制有待于深入研究;(4)结果表明,通过还原胺化法合成了毒性较低、取代度介于8.67%-32.88%的N-己烷壳聚糖。与纯壳聚糖相比,N-己烷壳聚糖具有明显的促凝作用,且取代度越大,其促凝效果越好。