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月见草中一个新的核苷类化合物

药学学报 2022年第6期57卷 1840-1844页

作者：刘娟娟张靖柯张钦钦李孟朱登辉魏俊俊郑晓珂冯卫生河南中医药大学药学院河南郑州450046 河南省中药开发工程技术研究中心河南郑州450046

运用大孔吸附树脂、硅胶、凝胶Sephadex LH-20、MCI等柱色谱并结合半制备高效液相等分离纯化技术,从月见草中分离得到7个核苷类化合物,根据化合物的理化性质和波谱特征对其结构进行鉴定,分别为9-(3′-carbonyl methyl)hydroxypurine (1)... 详细信息

运用大孔吸附树脂、硅胶、凝胶Sephadex LH-20、MCI等柱色谱并结合半制备高效液相等分离纯化技术,从月见草中分离得到7个核苷类化合物,根据化合物的理化性质和波谱特征对其结构进行鉴定,分别为9-(3′-carbonyl methyl)hydroxypurine (1)、1-(3′-carbonyl methyl)purine-6,8-dione (2)、N-methyl-2-pyridone-5-carboxamide (3)、尿嘧啶(4)、尿嘧啶核苷(5)、胸腺嘧啶脱氧核苷(6)和2′-O-甲氧基尿嘧啶核苷(7)。其中化合物1为新化合物,化合物2~7为首次从月见草中分离得到。化合物1、2可显著提高TGF-β1诱导BEAS-2B细胞的活力,说明其具有潜在的抗肺纤维化活性。

关键词：月见草化学成分核苷类 BEAS-2B细胞 MTT

An appropriate level of autophagy reduces emulsified isoflurane-induced apoptosis in fetal neural stem cells

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Neural Regeneration Research 2020年第12期15卷 2278-2285页

作者： Ze-Yong Yang Lei Zhou Qiong Meng Hong Shi Yuan-Hai Li Department of Anesthesiology International Peace Maternity and Child Health HospitalShanghai Jiao Tong University School of MedicineShanghai Key Laboratory of Embryo Original DiseaseShanghai Municipal Key Clinical SpecialtyShanghaiChina Department of Anesthesiology First Affiliated Hospital of Anhui Medical UniversityHefeiAnhui ProvinceChina Department of Anesthesiology Shanghai Pulmonary HospitalTongji UniversityShanghaiChina

Autophagy plays essential roles in cell survival.However,the functions and regulation of the autophagy-related proteins Atg5,LC3B,and Beclin 1 during anesthetic-induced developmental neurotoxicity remain unclear.This study aimed to understand the autophagy pathways and mechanisms that affect neurotoxicity,induced by the anesthetic emulsified isoflurane,in rat fetal neural stem cells.Fetal neural stem cells were cultured,in vitro,and neurotoxicity was induced by emulsified isoflurane treatment.The effects of pretreatment with the autophagy inhibitors 3-methyladenine and bafilomycin and the effects of transfection with small interfering RNA against ATG5(siRNA-Atg5)were observed.Cell viability was determined using the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide assay,and apoptosis was assessed using flow cytometry.Ultrastructural changes were analyzed through transmission electron microscopy.The levels of the autophagy-related proteins LC3B,Beclin 1,Atg5,and P62 and the pro-apoptosis-related protein caspase-3 were analyzed using western blot assay.The inhibition of cell proliferation and that of apoptosis rate increased after treatment with emulsified isoflurane.Autophagolysosomes,monolayer membrane formation due to lysosomal degradation,were observed.The autophagy-related proteins LC3B,Beclin 1,Atg5,and P62 and caspase-3 were upregulated.These results confirm that emulsified isoflurane can induce toxicity and autophagy in fetal neural stem cells.Pre-treatment with 3-methyladenine and bafilomycin increased the apoptosis rate in emulsified isoflurane-treated fetal neural stem cells,which indicated that the complete inhibition of autophagy does not alleviate emulsified isoflurane-induced fetal neural stem cell toxicity.Atg5 expression was decreased significantly by siRNA-Atg5 transfection,and cell proliferation was inhibited.These results verify that the Atg5 autophagy pathway can be regulated to maintain appropriate levels of autophagy,which can inhibit the neurotoxicity induced by emulsified isoflur

关键词： apoptosis Atg5 autophagy emulsified isoflurane fetal neural stem cells LC3B MTT neurodegenerative neurotoxicity

Mg-P/c-SWCNT Bone Cement: The Effect of Filler on Setting Behavior,Compressive Strength and Biocompatibility

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Journal of Bionic Engineering 2020年第1期17卷 100-112页

作者： Mohammad Hossein Esnaashary Alireza Khavandi Hamid Reza Rezaie Jafar Javadpour School of Metallurgical and Materials Engineering Iran University of Science and TechnologyNarmakTehran 16844Iran

Improving the strength of bone cement is one of the critical goals in cement designing to maintain their integrity and stabilize connection between the cement and their surrounding tissue during the time that the cement has been replaced by matured bone tissue.To this aim,the authors decided to evaluate setting behavior and compressive strength of Magnesium Phosphate Cement(MPC)by adding carboxylated Single-Walled Carbon Nanotubes(c-SWCNTs)and assess the biocompatibility of the composite cement.MPC containing 0 wt%to 0.5 wt% of c-SWCNTs at the Powder to Liquid Ratio(PLR)of 1 g·mL^-1 to 2 g·mL^-1 were produced.Adding c-SWCNTs to MPC postponed the setting time of the cement at the beginning of the cementation process and preserved the reaction with a high rate for a longer time.In addition,the compressive strength of MPC was enhanced to 28 MPa by adding 0.2 wt%c-SWCNTs because of producing cement with compact and uniform microstructure.In addition,cell behavior on MPC with/without c-SWCNTs indicated no cytotoxic effect alongside a suitable adhesion and proliferation of them.

关键词： magnesium phosphate cement carbon nanotube compressive strength MTT bone cement biocompatibility

注射用红花黄色素基于细胞脱颗粒和急性类过敏模型的研究

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中国中药杂志 2019年第17期44卷 3792-3797页

作者：陈勇灵蔡犇张巍解卓奇黄维潘丽卢敏浙江永宁药业股份有限公司

建立RBL-2H3细胞脱颗粒模型及小鼠急性类过敏反应模型的注射用红花黄色素类过敏反应筛查方法,评价不同批次注射用红花黄色素的致类过敏性。采用体外细胞模型,以各批次注射用红花黄色素为药物组,无血清MEM培养基为阴性对照,30 mg·L^-1C4... 详细信息

建立RBL-2H3细胞脱颗粒模型及小鼠急性类过敏反应模型的注射用红花黄色素类过敏反应筛查方法,评价不同批次注射用红花黄色素的致类过敏性。采用体外细胞模型,以各批次注射用红花黄色素为药物组,无血清MEM培养基为阴性对照,30 mg·L^-1C48/80为阳性对照分别刺激细胞1 h,吸取上清液,以中性红染色法,以发生脱颗粒的阳性细胞率为指标检测注射用红花黄色素对RBL-2H3细胞脱颗粒的影响;建立体内模型以验证细胞实验结果,采用小鼠急性类过敏反应模型,ELISA法检测血浆组胺含量,以血浆组胺含量为检测指标筛查注射用红花黄色素在动物水平的致类过敏性。结果表明,中性红染色实验结果显示阳性对照C48/80能明显引起细胞脱颗粒,大部分细胞深染,而不同批次注射用红花黄色素阳性细胞率与阳性对照有显著性差异;小鼠急性类过敏反应模型中,通过血浆组胺含量的检测,阳性对照C48/80可显著增加小鼠血浆中组胺的含量,而各批次注射用红花黄色素均未引起血浆组胺明显升高(P<0.0001)。类过敏反应机制较为复杂,该研究主要基于肥大细胞脱颗粒释放组胺等活性物质,从体内体外2个方面,未检测到注射用红花黄色素引起RBL-2H3细胞发生明显的脱颗粒反应,也未使小鼠血浆组胺水平显著上升。

关键词：红花黄色素脱颗粒 MTT 组胺类过敏

新型查尔酮衍生物的合成及抗肿瘤活性评价（英文）

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有机化学 2019年第3期39卷 703-708页

作者：盛琦威赵婉秋曾明谢中袍夏雅平崔冬梅浙江工业大学药学院

主要通过 Claisen-Schmidt 缩合反应设计合成了一系列含有哌啶、吗啡啉、N-甲基哌嗪取代的查尔酮衍生物,并通过噻唑蓝(MTT)法对 MCF-7(人乳腺癌细胞系)、A549(人肺癌细胞系)、HL-60(人白血病细胞系)、Hela(人宫颈癌细胞系)和 Bewo(人绒... 详细信息

主要通过 Claisen-Schmidt 缩合反应设计合成了一系列含有哌啶、吗啡啉、N-甲基哌嗪取代的查尔酮衍生物,并通过噻唑蓝(MTT)法对 MCF-7(人乳腺癌细胞系)、A549(人肺癌细胞系)、HL-60(人白血病细胞系)、Hela(人宫颈癌细胞系)和 Bewo(人绒毛肿瘤细胞系)等五种癌细胞系进行了体外抗癌活性研究.研究表明,化合物 4a, 4e, 4f, 4j, 4m, 4o 对MCF-7, A549, HL-60 三种癌细胞系抗癌活性最佳, IC50 值均在 10 μmol/L 以下.

关键词：查尔酮缩合抗癌 MTT 法

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月见草中一个新的莽草酸衍生物

天然产物研究与开发 2022年第12期34卷 2034-2039页

作者：刘娟娟张靖柯曾梦楠李孟朱登辉魏俊俊郑晓珂冯卫生河南中医药大学药学院河南省中药开发工程技术研究中心郑州450046

为了研究月见草Oenothera biennis L.的化学成分,采用硅胶、Sephadex LH-20凝胶、MCI gel CHP-20等柱色谱并结合半制备高效液相等分离技术,利用现代波谱学手段进行化合物结构鉴定。从月见草50%丙酮提取物中分离得到10个化合物,分别鉴定... 详细信息

为了研究月见草Oenothera biennis L.的化学成分,采用硅胶、Sephadex LH-20凝胶、MCI gel CHP-20等柱色谱并结合半制备高效液相等分离技术,利用现代波谱学手段进行化合物结构鉴定。从月见草50%丙酮提取物中分离得到10个化合物,分别鉴定为dimethyl 3-lactyl shikimate(1)、methyl shikimate(2)、3,3′,4-O-三甲基鞣花酸(3)、3,3′-二甲氧基-鞣花酸(4)、3,4,3′-三甲氧基鞣花酸(5)、alternariol 9-methyl ether(6)、2,3-二羟基-1-(4-羟基-3,5-二甲氧基苯基)-1-丙酮(7)、scirpyrone H(8)、dimethoxydimethylphthalide(9)、clearanol C(10)。其中化合物1为新化合物,化合物2~10均为首次从该植物中分离得到。化合物2和3可显著提高TGF-β1诱导BEAS-2B细胞的活力,推测其具有潜在的肺保护作用。

关键词：月见草莽草酸衍生物 dimethyl 3-lactyl shikimate MTT

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薄壳山核桃花粉活力测定方法比较

经济林研究 2023年第2期41卷 110-119页

作者：刘帅彭方仁南京林业大学南方现代林业协同创新中心江苏南京210037 南京林业大学林学院江苏南京210037

【目的】筛选并优化薄壳山核桃花粉活力的测定方法,为薄壳山核桃的杂交育种提供参考。【方法】以韦科、苏普锐尔、基奥瓦、奥多姆4个薄壳山核桃品种的花粉为试验材料,分别采用MTT染色法、TTC染色法、过氧化物酶染色法、醋酸洋红染色法、... 详细信息

【目的】筛选并优化薄壳山核桃花粉活力的测定方法,为薄壳山核桃的杂交育种提供参考。【方法】以韦科、苏普锐尔、基奥瓦、奥多姆4个薄壳山核桃品种的花粉为试验材料,分别采用MTT染色法、TTC染色法、过氧化物酶染色法、醋酸洋红染色法、I2-KI染色法和蓝墨水染色法对花粉进行染色,比较不同染色方法及不同染色溶液浓度处理间花粉活力的差异。采用正交试验对薄壳山核桃花粉萌发培养基配方进行优化,筛选适合薄壳山核桃花粉萌发的培养基。通过回归分析,探讨花粉染色率和离体萌发率之间的相关性,寻找最适合测定薄壳山核桃花粉活力的染色方法。【结果】除TTC染色法外,其余方法均能使薄壳山核桃花粉染色。适宜4个薄壳山核桃品种花粉萌发的培养基并不完全相同,适宜韦科、基奥瓦和奥多姆花粉萌发的培养基为5%蔗糖+0.01%硼酸+0.05%硝酸钙+25%PEG-4000,萌发率分别可达36.80%、46.32%、59.51%。适宜苏普锐尔花粉萌发的培养基为8%蔗糖+0.025%硼酸+0.025%硝酸钙+25%PEG-4000,萌发率为24.19%。采用MTT染色法所染深色花粉比例接近花粉萌发率,且所测花粉活力与花粉萌发率呈线性正相关(R2>0.686,PMTT法更适用于薄壳山核桃花粉活力的快速检测。

关键词：薄壳山核桃花粉活力萌发率 MTT

利用MTT建立一种快速检测青枯菌活菌的方法

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生物学杂志 2019年第1期36卷 103-106页

作者：周大祥熊书谢桂香重庆三峡学院生命科学与工程学院万州404120 重庆三峡医药高等专科学校基础医学部万州404120

利用四氮唑蓝(MTT),优化了检测波长、菌浓度、MTT用量、MTT反应时间、三联液的用量和溶解时间等,建立一种有效快速检测青枯菌活菌的方法。结果发现,MTT反应的最佳检测波长为512 nm,青枯菌浓度A_(600)为0. 3,MTT用量为30μL,MTT还原反应... 详细信息

利用四氮唑蓝(MTT),优化了检测波长、菌浓度、MTT用量、MTT反应时间、三联液的用量和溶解时间等,建立一种有效快速检测青枯菌活菌的方法。结果发现,MTT反应的最佳检测波长为512 nm,青枯菌浓度A_(600)为0. 3,MTT用量为30μL,MTT还原反应控制在20 min以内,三联液溶解甲臜晶体的用量为3 m L,溶解8 h,甲臜溶液在10～120μL以内与A512的数值线性关系良好,平板计数印证了这一结果。实验结果表明,MTT法可以用于快速检测青枯菌等植物病原菌活菌,对农产品进出口检验检疫具有一定的应用价值。

关键词：青枯菌 MTT 甲臜三联液活菌检测

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原卟啉和色胺衍生物的合成及抗肿瘤活性研究

原卟啉和色胺衍生物的合成及抗肿瘤活性研究

作者：赵琼丽云南师范大学

学位级别：硕士

卟啉是一类重要的大环共轭芳香杂环化合物,它不仅具有光敏性,还能在一定程度上控制不同癌细胞的增殖。所以,人们常将它运用于抗癌药物载体的构建和研究。原卟啉衍生物亲和性较高,同时对癌细胞具有抑制作用,所以备受合成化学家们的关注... 详细信息

卟啉是一类重要的大环共轭芳香杂环化合物,它不仅具有光敏性,还能在一定程度上控制不同癌细胞的增殖。所以,人们常将它运用于抗癌药物载体的构建和研究。原卟啉衍生物亲和性较高,同时对癌细胞具有抑制作用,所以备受合成化学家们的关注。本文主要是根据原卟啉中两个羧基官能团,对其经过酰胺反应引入活性基团,合成一系列原卟啉衍生物,并对所合成的化合物用NMR(核磁共振波谱)和MS(质谱)进行结构的表征,并使用MTT法检测合成的原卟啉衍生物的抗肿瘤活性。色胺是一种重要的天然物质,它可以促进多种天然生物碱合成,常被应用在生物学和医学等领域。近年来,色胺类小分子抗癌药物的研究备受关注。本文主要围绕着褪黑素中的活性基团,5-甲氧基色胺,通过选取功能性基团对其进行修饰,合成一系列色胺衍生物,并通过相应的检测对所合成的化合物进行结构鉴定,并使用MTT法检测所合成化合物的抗肿瘤活性。本文的结论如下:1、以血红素直接去金属制备原卟啉,后以原卟啉为原料,经过酰胺反应合成了5个原卟啉衍生物。对所合成的化合物进行人乳腺癌细胞(MCF-7)、人结肠癌细胞(HCT 116)、人脑胶质瘤(U251)、人肺癌细胞(A549)的细胞毒性测试。根据测试结果筛选出化合物A2与A4具有能成为抗肿瘤药物研究领域前体化合物的潜能。并且化合物A4对人体脑瘤的抑制效果(IC=0.58μM)已经很接近临床上使用的成药硼替佐米,这一数据为后续研究原卟啉药物打下了良好的基础。2、以5-甲氧基色胺为母体,选取肉桂酸衍生物和苯甲酸,苯乙酸衍生物为原料经酰胺反应合成22个色胺衍生物。对所合成的的化合物进行相应的细胞毒性活性测试。根据测试结果筛选出化合物B3、B4、B5、B7四个化合物,对MCF-7,U251,HCT 116,A375和A549细胞都具有较好的广谱抗癌活性。表明5-甲氧基色胺与肉桂酸衍生物合成的化合物对癌细胞的细胞毒性均较为理想。这些化合物都具有更深入研究的价值,为后续继续研究小分子的抗肿瘤药物提供了前体化合物。

关键词：原卟啉衍生物色胺衍生物抗癌活性 MTT