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新型沃顿胶硫酸软骨素复合支架体外构建组织工程软骨的实验研究

Experimental study on the preparation of new compound scaffold Wharton chondroitin sulfate

作     者:吴琪 亓建洪 

作者机构:泰山医学院 

出 版 物:《泰山医学院学报》 (Journal of Taishan Medical College)

年 卷 期:2017年第38卷第9期

页      面:969-972页

学科分类:1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含:普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 08[工学] 080501[工学-材料物理与化学] 0805[工学-材料科学与工程(可授工学、理学学位)] 080502[工学-材料学] 10[医学] 

主  题:人脐带间充质干细胞 软骨组织工程 沃顿胶 支架 硫酸软骨素 

摘      要:目的以脐带中的沃顿胶为原料,复合硫酸软骨素制备新型复合支架,检测该支架的性能,并与分离的人脐带间充质干细胞共培养,构建组织工程软骨。方法分离脐带,去除被膜及血管,得到沃顿胶,采用Ⅱ型胶原酶消化法获得人脐带间充质干细胞,通过流式细胞仪鉴定;以沃顿胶为原料,通过机机械粉碎、差速离心法、反复冻融去细胞,真空冷冻干燥成型、物理及化学交联的方法制备出三维支架,通过电镜观察支架结构,检测物理性能,与获得的间充质干细胞共培养诱导为组织工程软骨,通过组织化学染色及免疫组织化学的方法进行检测成分。结果分离的人脐带间充质干细胞CD44、CD90表达阳性,CD34表达阴性。制备出的沃顿胶硫酸软骨素复合支架具有三维立体取向结构,孔隙率达到90%以上,符合软骨组织工程支架要求,且富含糖胺多糖及Ⅱ型胶原,将人脐带间充质干细胞复合到支架上,经诱导培养生成软骨样物质,甲苯胺蓝染色阳性。结论从脐带沃顿胶分离出人脐带间充质干细胞,制备的复合支架为三维多孔结构,物理性能符合软骨组织工程支架要求,具有良好的生物相容性,在支架上接种脐带间充质干细胞后,生长较好,并可促使其成软骨分化。为软骨组织工程支架材料的选择提供了新的思路。

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