β-1,4-葡聚糖内切酶egl3基因在乳酸乳球菌中分泌表达的研究

作     者：刘秦华 邵涛 董志浩 李湘玉 LIU Qinhua;SHAO Tao;DONG Zhihao;LI Xiangyu

作者机构：南京农业大学饲草调制加工与贮藏研究所南京210095 

出 版 物：《中国科技论文》 (China Sciencepaper)

年 卷 期：2017年第12卷第6期

页      面：633-638页

学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：高等学校博士学科点专项科研基金资助项目(20130097120053) 

主　　题：草学 β-1,4-葡聚糖内切酶 egl3基因 乳酸乳球菌 分泌表达 

摘      要：研究采用重叠延伸PCR合成技术将乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)分泌蛋白基因序列usp45(81bp)和瑞氏木霉(Trichoderma reesei)β-1,4-葡聚糖内切酶成熟蛋白序列egl3(657bp)连接成融合基因usp45-egl3,构建了分泌型重组质粒pMG36eusp45-egl3及重组乳酸乳球菌*** *** MG1363/pMG36e-usp45-egl3,分析了重组乳酸乳球菌表达β-1,4-葡聚糖内切酶的效果及其降解滤纸和小麦秸秆的能力。结果表明,重组乳酸乳球菌*** *** MG1363/pMG36e-usp45-egl3经28h培养能胞外分泌酶活为1 016U/L的β-1,4-葡聚糖内切酶,有效地降解了羧甲基纤维素钠。在30℃恒温培养10d时,重组乳酸乳球菌*** *** MG1363/pMG36e-usp45-egl3降解滤纸和小麦秸秆为其提供发酵底物,分别产生乳酸2.55g/L和6.95g/L,pH分别降至5.10和4.84,干物质降解率分别为4.22%和29.36%。