糖氧剥夺/再灌注损伤对人正常肝L02细胞自噬水平的影响

作     者：马秀雅 李元海 Ma Xiuya;Li Yuanhai

作者机构：安徽医科大学第一附属医院麻醉科合肥230022 

出 版 物：《安徽医科大学学报》 (Acta Universitatis Medicinalis Anhui)

年 卷 期：2017年第52卷第4期

页      面：475-479页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100217[医学-麻醉学] 10[医学] 

基　　金：高等学校博士学科点专项科研基金(编号:20133420110009) 

主　　题：自噬 糖氧剥夺 再灌注 L02细胞 

摘      要：目的探讨糖氧剥夺/再灌注损伤(OGD/R)对人正常肝L02细胞自噬水平的影响。方法体外培养人正常肝L02细胞,制备OGD/R模型,模拟临床的肝脏缺血再灌注损伤。分为5组:正常对照组、OGD 6 h/R 1、3、6、12 h组。随后在倒置显微镜下观察L02细胞形态;采用MTT比色法检测L02细胞的相对增殖情况;Western blot法检测自噬相关蛋白LC3、Beclin-1和p62的表达变化。结果与正常对照组相比,随着再灌注时间的延长,OGD/R组处理L02细胞的形态损伤逐渐加剧,增殖活性逐渐降低,呈时间依赖性。自噬相关蛋白LC3和Beclin-1在OGD 6 h/R 1 h即有所增高,随着再灌注时间的延长,LC3的表达量逐渐增高并于再灌注6 h时大量增加,于再灌注12 h时达到最大值(P0.01);Beclin-1蛋白的表达量随再灌注时间的延长逐渐增加于6 h和12 h急剧增加(P0.01);p62蛋白于OGD 6 h/R 1 h时和3 h无明显变化,而在再灌注6 h时开始急剧增加,于12 h达到最大值(P0.01)。结论 OGD/R可诱导人正常肝L02细胞自噬水平上调,并且导致细胞的自噬性死亡。