日本血吸虫钙蛋白酶肽链文库的制备及其B细胞表位的筛选

作     者：段立华 张仁利 张力勇 吴少庭 高世同 林敏 

作者机构：深圳市疾病控制中心 深圳市第二人民医院 

出 版 物：《中华微生物学和免疫学杂志》 (Chinese Journal of Microbiology and Immunology)

年 卷 期：2002年第22卷第4期

页      面：411-414页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

主　　题：日本血吸虫 B细胞表位 钙蛋白酶 免疫原性 免疫应答 血吸虫疫苗 

摘      要：目的 筛选钙蛋白酶 (calpain)的B细胞表位 ,探讨其B细胞表位的免疫原性及其所诱导的免疫应答类型。方法 用Genetyx MAC9.0分析calpain肽连的亲水性 ,在亲水性区域以 9个氨基酸为肽链单位的固相重叠肽链库 (每相邻两个肽链之间仅有一个氨基酸不同 )被Auto spotRobot制备 ,用Dot ELISA在合成的肽链库上筛选B细胞表位 ,含有B细胞表位的肽链免疫BALB c小鼠 ,ELISA鉴别特异性IgG抗体亚类的产生。结果 由 75 8个氨基酸组成的日本血吸虫calpain蛋白含有 2个主要的亲水区 ,其存在区域分别在氨基酸 2 2 9～ 375和 5 5 5～ 6 13;当我们测定合成的肽链文库时 ,在亲水区内筛选出 4个B细胞的表位 ,分别是氨基酸 2 34～ 2 5 1(YAHLSGGT) ;2 90～ 2 97(CLMGCSIH) ;338～ 34 6(PWGDSHEW) ;35 8～ 36 4(AWCDGAPQ) ;与对照组鼠相比较免疫鼠血清中IgG1、IgG2a、IgG2b特异性抗体有显著性意义的上升。结论 日本血吸虫calpain是一个具有免疫原性的蛋白 ,能够激发宿主产生高水平的免疫球蛋白 ,提示calpain的B细胞表位可以成为日本血吸虫病的诊断抗原和日本血吸虫疫苗候选分子。