诱生型一氧化氮合酶FAD结合区的克隆、表达和活性鉴定

作     者：李爱萍 徐洪 朱敏生 朱东亚 吴如金 智刚 Kim S Lau. James.T.Stull 

作者机构：南京军区军事医学研究所南京210002 中国药科大学南京210009 Southwestern medicalcente rat Dallas.UT.USA Southwestern medicalcenter at Dallas.UT.USA 

出 版 物：《药物生物技术》 (Pharmaceutical Biotechnology)

年 卷 期：2001年第8卷第4期

页      面：181-184页

学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家自然科学基金 (No .396 70 85 6 )资助 

主　　题：一氧化氮合酶 FAD结合区 重组表达 金属鳌合层析 诱生型 克隆 活性鉴定 

摘      要：诱生型的一氧化氮合酶 (iNOS)的表达可以被多种细胞因子、IPS、多种试剂及创伤等诱导 ,很多疾病的产生发展都与iNOS的过度表达有关。为进一步研究iNOSFAD结合区的功能和特异性抑制肽的筛选 ,用PCR方法克隆出iNOSFAD结合区编码基因片段 (iNOS2 0 31 2 6 6 0bp) ,并在大肠杆菌中得到高效表达 ,得到表达率 30 %的包涵体 ;经过Ni金属螯合亲和柱层析和电泳纯化 ,得到纯度 95 %的重组蛋白 ,相对分子质量为2 3 0 0 0。运用波长扫描 ,证实纯化蛋白具有与FAD的结合活性 。