MicroRNA-1调控人结肠癌细胞周期及其机制的研究

作     者：陈通克 陈林华 王教 王丽花 Chen Tongke;Chen Linhua;Wang Jiao;Wang Lihua

作者机构：温州医科大学实验动物中心温州325000 温州医科大学眼视光学院温州325027 

出 版 物：《中国细胞生物学学报》 (Chinese Journal of Cell Biology)

年 卷 期：2017年第39卷第3期

页      面：271-279页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：浙江省自然科学基金(批准号:LQ17H120009) 温州市科技计划项目(批准号:Y20130164 Y20130254)资助的课题~~ 

主　　题：microRNA-1 人结肠癌 增殖 细胞周期 

摘      要：该研究通过阳离子脂质体介导的方法将microRNA-1(miR-1)转染入人结肠癌细胞HT-29和HCT 116,使其过表达。应用MTS法、克隆形成实验、流式细胞术检测转染后细胞增殖及细胞周期的变化情况,结果发现,miR-1能使HT-29和HCT 116细胞周期滞留在G1期,显著抑制细胞的增殖;通过靶基因预测及荧光素酶分析法预测并确定CCND1(cyclin D1)和CDK6(cyclin dependent kinases 6)是miR-1作用的靶基因。采用Western blot法检测细胞内相关蛋白质表达水平,结果发现,miR-1能下调HT-29和HCT 116中细胞周期相关蛋白CDK2、CDK4、p-Rb(retinoblastoma gene)、E2F1(E2F transcription factor 1)、p-Cdc2(cell division cycle 2)等蛋白质水平。通过人结肠癌裸鼠动物模型检测miR-1对结肠癌细胞体内成瘤能力的改变情况,研究发现,miR-1能在体显著抑制人结肠癌细胞增殖能力。该研究表明,miR-1通过下调靶基因cyclin D1、CDK6的表达,并影响细胞周期相关蛋白CDK2、CDK4的水平,下调了决定细胞周期进程的关键蛋白Rb及Cdc2的磷酸化水平,同时也降低了E2F1蛋白质水平,使细胞周期滞留在G1期,从而抑制了细胞增殖。