限制性内切酶酶切确证河豚鱼成分PCR检测结果

作     者：曲良苗 陈文炳 缪婷玉 邵碧英 彭娟 江树勋 QU Liang-miao;CHEN Wen-bing;MIAO Ting-yu;SHAO Bi-ying;PENG Juan;JIANG Shu-xun

作者机构：福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心福建福州350001 福建农林大学食品科学学院福建福州350003 福建省检验检疫技术研究重点实验室福建福州350001 

出 版 物：《食品科学》 (Food Science)

年 卷 期：2014年第35卷第8期

页      面：169-173页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 0908[农学-水产] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 

基　　金：国家质量监督境检验检疫总局科技计划项目(2008IK175 2013IK149) 

主　　题：河豚鱼 PCR检测 限制性内切酶 DNA测序 结果确证 

摘      要：动植物成分的聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测往往出现假阳性结果,为了有效排除河豚鱼成分检测中出现的假阳性现象,提高检测结果的准确性,应用河豚鱼PCR检测引物进行河豚鱼成分的PCR检测与限制性内切酶NmeAⅢ酶切确证实验。18个供试样品中3个样品无PCR扩增产物,判为阴性结果,15个样品初步判为疑似阳性。应用限制性内切酶NmeAⅢ对疑似阳性样品的PCR产物进行酶切与电泳分析,电泳图谱与河豚鱼阳性对照不同的2个样品,判定为假阳性结果,电泳图谱与阳性对照相同的4个未知学名的河豚鱼加工样品,确证为阳性结果,即检出河豚鱼成分,PCR产物序列经GenBank同源性序列查询比对(BLAST)予以验证,建立了简便的河豚鱼成分PCR检测结果确证方法。