lncRNA PVT1和微小RNA-106a-5p对骨肉瘤MG-63细胞的影响及机制研究

作     者：魏建仝 张晓云 邹永刚 王勇平 WEI Jian-tong;ZHANG Xiao-yun;ZOU Yong-gang;WANG Yong-ping

作者机构：河西学院附属张掖人民医院骨科甘肃张掖734000 河西学院附属张掖人民医院病理科甘肃张掖734000 兰州大学第一医院骨科甘肃兰州730000 

出 版 物：《哈尔滨医科大学学报》 (Journal of Harbin Medical University)

年 卷 期：2024年第58卷第3期

页      面：227-231页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：甘肃省自然科学基金资助项目(22JR5RG570) 河西学院校长基金青年项目(QN2022006) 兰州市人才创新创业项目(2021-RC-114) 兰州大学第一医院科研计划项目(LDYYYN2021-12) 

主　　题：骨肉瘤 lncRNA PVT1 miR-106a-5p 铁死亡 增殖 凋亡 

摘      要：目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)PVT1和miR-106a-5p对骨肉瘤细胞恶性行为的影响及分子机制。方法将骨肉瘤MG-63细胞分为NC组、PVT1-siRNA组、miRNA抑制剂组以及共转染组。以CCK-8实验检测细胞增殖能力,以流式细胞仪检测细胞凋亡情况,以DCFH-DA法检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,以实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测基因表达,以蛋白印迹法检测谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4),铁蛋白(ferritin heavy chain,FTH)、血红素氧合酶1(heme oxygenase-1,HO1)和MDM4(murine double minute 4,MDM4)的表达水平。结果CCK-8实验结果显示敲低lncRNA PVT1后MG-63细胞12 h、24 h、48 h、72 h增殖能力降低(P0.05),流式细胞仪检测结果显示敲低lncRNA PVT1后MG-63细胞凋亡水平以及ROS水平显著升高(P0.05),lncRNA PVT1敲低联合miR-106a-5p抑制剂相对于lncRNA PVT1敲低组结果逆转(P0.05)。RT-qPCR实验结果显示敲低lncRNA PVT1后miR-106a-5p基因表达水平升高并抑制MDM4基因表达(P0.05),Western blot结果显示敲低lncRNA PVT1后抑制MDM4、HO1、GPX4和FTH蛋白水平(P0.05)。结论在人骨肉瘤MG-63中,抑制lncRNA PVT1表达可促进miR-106a-5p表达,促进铁死亡和凋亡并抑制增殖。