尖孢镰刀菌亚麻专化型 FolSwe1基因功能分析
作者机构:内蒙古师范大学生命科学与技术学院
出 版 物:《内蒙古大学学报(自然科学版)》 (Journal of Inner Mongolia University(Natural Science Edition))
年 卷 期:2024年
学科分类:0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0904[农学-植物保护] 071007[理学-遗传学] 090401[农学-植物病理学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种]
基 金:国家自然科学基金(31160280) 内蒙古自治区自然科学基金(2015MS0311)
主 题:尖孢镰刀菌亚麻专化型 FolSwe1基因 Split-Marker 基因敲除
摘 要:本研究旨在对尖孢镰刀菌亚麻专化型 FolSwe1基因进行功能分析。利用同源比对,通过PCR对FolSwe1基因及其侧翼序列进行扩增和测序,使用Split-Marker 技术构建该基因缺失突变盒,使用聚乙二醇(PEG)介导转化野生型原生质体,获得了FolSwe1基因缺失突变株,对突变体表型和致病力进行测定。构建荧光载体 pZESH1(pZWH1+EGFP+ FolSwe1)对FolSwe1蛋白进行亚细胞定位。结果显示,FolSwe1基因编码区为3219bp,含有一个内含子,长度为54bp,所测序列包括编码区上游1704bp,编码区下游为1694bp。表型观察发现,敲除突变体的菌丝比野生型短小且密实,菌落生长速度较慢,特别显著的变化是缺失突变体不再产生孢子,致病力也明显下降。亚细胞定位显示FolSwe1蛋白在培养时间较长菌丝的细胞膜中有荧光信号。综上所述,FolSwe1基因主要调控尖孢镰刀菌亚麻专化型的孢子发生、菌丝营养生长和对亚麻的致病性。