检索结果-南通市图书馆

尖孢镰刀菌亚麻专化型Folcdc15基因参与调控分生孢子发生和菌丝生长

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

华北农学报 2023年第6期38卷 175-183页

作者：李春阳侯占铭内蒙古师范大学生命科学与技术学院内蒙古自治区高等学校生物多样性保护与可持续利用重点实验室内蒙古呼和浩特010022

通过对尖孢镰刀菌亚麻专化型Folcdc15基因敲除及敲除突变体互补试验,探究该基因在尖孢镰刀菌亚麻专化型中的功能。对Folcdc15基因进行DNA测序后,使用Split-Marker技术,构建含有潮霉素抗性基因(hph)缺失盒。通过PEG介导法转入野生型原生... 详细信息

通过对尖孢镰刀菌亚麻专化型Folcdc15基因敲除及敲除突变体互补试验,探究该基因在尖孢镰刀菌亚麻专化型中的功能。对Folcdc15基因进行DNA测序后,使用Split-Marker技术,构建含有潮霉素抗性基因(hph)缺失盒。通过PEG介导法转入野生型原生质体,在含有潮霉素的选择培养基上进行转化子筛选,通过PCR正负筛选确定敲除突变体。利用pZWH1载体构建含有Folcdc15的互补载体pZLY1,将其转入敲除突变体中进行互补测验。与野生型hm相比,敲除突变体ko1菌落生长速率下降了73%,菌丝形态发生了显著改变,菌丝变短且分叉变多,分生孢子隔膜数量增多长度增加,分生孢子数量显著减少。亚麻侵染试验表明,ko1的致病力显著降低。通过互补测验发现,回复突变株ca1恢复了Folcdc15基因缺失带来的分生孢子产量及形态、菌落生长和形态及致病力的缺陷。Folcdc15参与调控尖孢镰刀菌亚麻专化型的分生孢子发生及菌丝生长。

关键词：尖孢镰刀菌亚麻专化型亚麻枯萎病 Split-Marker Folcdc15 基因功能致病性

尖孢镰刀菌亚麻专化型Folprp4基因参与调控菌丝生长和分生孢子发生

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国生物工程杂志 2022年第3期42卷 13-26页

作者：董慧霞侯占铭内蒙古师范大学生命科学与技术学院内蒙古自治区高等学校生物多样性保护与可持续利用重点实验室呼和浩特010022

目的:通过对尖孢镰刀菌中Folprp4基因的鉴定,揭示其在尖孢镰刀菌中的功能及致病相关性。方法:基于同源重组原理,根据测定出的Folprp4基因序列,应用Split-Marker重组技术构建含有潮霉素抗性基因(hph)的基因缺失盒。将基因缺失盒经PEG介... 详细信息

目的:通过对尖孢镰刀菌中Folprp4基因的鉴定,揭示其在尖孢镰刀菌中的功能及致病相关性。方法:基于同源重组原理,根据测定出的Folprp4基因序列,应用Split-Marker重组技术构建含有潮霉素抗性基因(hph)的基因缺失盒。将基因缺失盒经PEG介导转化到野生型原生质体中,在含有潮霉素B的TCC培养基上筛选转化子,通过PCR正负筛查获得Folprp4基因缺失突变株(ΔFolprp4)。构建含有Folprp4基因的载体pZDH1,并将其转化到敲除突变体中进行互补测验。结果:与野生型(hm)和异位插入突变体(ecFolprp4)相比,敲除突变体菌丝生长受到严重阻碍,当野生型和异位插入突变体长满整个平板时,敲除突变体菌落呈小点状。敲除突变体的另一个显著变化是ΔFolprp4的分生孢子产量显著下降。侵染实验表明,ΔFolprp4对亚麻幼苗的毒力显著降低。互补实验表明,该互补载体的回复子(Folprp4-C)在菌落形态、生长速率、分生孢子产量和毒力方面均恢复到了野生型菌株。结论:Folprp4基因与尖孢镰刀菌的菌丝生长、分生孢子发生和致病性有关。

关键词： Folprp4基因尖孢镰刀菌亚麻专化型 Split-Marker 基因敲除致病性

MDT1基因参与禾谷镰刀菌分生孢子发生和营养生长

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国生物工程杂志 2020年第8期40卷 10-18页

作者：彭海丽侯占铭内蒙古师范大学生命科学与技术学院呼和浩特010020

背景:禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)是小麦及其它粮食作物小麦赤霉病(Fusarium head blight)的主要病原菌。目前,分子分析在研究病原菌的致病机理中已有广泛应用。MGV1菌株是禾谷镰刀菌MAPK信号通路基因MGV1缺失后的突变体,MGV1敲... 详细信息

背景:禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)是小麦及其它粮食作物小麦赤霉病(Fusarium head blight)的主要病原菌。目前,分子分析在研究病原菌的致病机理中已有广泛应用。MGV1菌株是禾谷镰刀菌MAPK信号通路基因MGV1缺失后的突变体,MGV1敲除突变体的差异基因表达(DGE)分析显示,MGV1基因缺失后,MDT1基因表达量显著下调。GO注释预测是参与ATP结合蛋白二聚作用的活性因子。推测该基因涉及MGV1通路。目的:探讨MDT1基因(MGV1dependent transcripts)的生物学功能。方法:应用Split-Marker技术构建基因敲除盒,并通过常规方法检测缺失突变体的表型和致病性。结果:与禾谷镰刀菌PH-1相比,MDT1基因缺失突变体的分生孢子量和子囊壳量显著下降,表明该基因对于无性繁殖和有性生殖能力至关重要。同时发现,在固体培养基上,缺失突变体的营养生长能力大大下降。该缺失突变体对细胞壁降解酶也很敏感,液体培养基中32℃下,菌丝顶端膨大,并有菌丝断裂,表明该基因与禾谷镰刀菌的细胞壁整合有关。互补实验证实了敲除突变体表型改变确实是由于MDT1基因缺失所致。结论:MDT1基因与禾谷镰刀菌的分生孢子和营养生长能力有关。

关键词：禾谷镰刀菌 MDT1 Split-Marker 基因敲除致病力

禾谷镰刀菌中FgPDE1基因的敲除及其功能的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国生物工程杂志 2015年第8期35卷 59-67页

作者：常玉梅侯占铭内蒙古师范大学生命科学与技术学院呼和浩特010020

目的:旨在敲除禾谷镰刀菌Fusarium graminearum Fg PDE1基因,确定其缺失突变体表型,从而分析该基因的生物学功能。方法:应用Split-Marker技术构建含有潮霉素基因敲除盒,通过PEG介导原生质体转化,PCR筛查抗潮霉素转化子以获得缺失突变体... 详细信息

目的:旨在敲除禾谷镰刀菌Fusarium graminearum Fg PDE1基因,确定其缺失突变体表型,从而分析该基因的生物学功能。方法:应用Split-Marker技术构建含有潮霉素基因敲除盒,通过PEG介导原生质体转化,PCR筛查抗潮霉素转化子以获得缺失突变体ΔFg PDE1,根据突变体表型变化及致病性的检测对Fg PDE1基因的功能进行分析。结果:采用Split-Marker技术,成功构建了Fg PDE1基因敲除盒;PEG介导转化禾谷镰刀菌原生质体后成功获得转化子。经PCR筛查,得到3个PCR确认的敲除突变体;表型观察发现,ΔFg PDE1菌落的外型及菌落生长速度与野生型没有明显差异。孢子侵染西红柿果实实验证明:以西红柿为侵染宿主,相对于野生型,突变体致病性没有明显减弱;但突变体分生孢子产量显著下降。结论:Fg PDE1基因可能与禾谷镰刀菌分生孢子的形成有关。

关键词：禾谷镰刀菌 FgPDE1 基因敲除 Split-Marker

Folpcs1基因对尖孢镰刀菌亚麻专化型的无性繁殖和营养生长的调控

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国生物工程杂志 2020年第3期40卷 48-64页

作者：郭晶侯占铭内蒙古师范大学生物科学与技术学院呼和浩特010022

背景:尖孢镰刀菌亚麻专化型[Fusarium oxysporum Schl. f. sp. Lini (Bolley) Snyder&Hansen]是一种引起亚麻枯萎病的土传真菌,对亚麻的产量及质量有严重的危害。研究表明,在小麦赤霉菌中C2H2型锌指转录因子Pcs1调控中间瓶梗(intercalar... 详细信息

背景:尖孢镰刀菌亚麻专化型[Fusarium oxysporum Schl. f. sp. Lini (Bolley) Snyder&Hansen]是一种引起亚麻枯萎病的土传真菌,对亚麻的产量及质量有严重的危害。研究表明,在小麦赤霉菌中C2H2型锌指转录因子Pcs1调控中间瓶梗(intercalary phialides)产生分生孢子。目的:鉴定pcs1同源基因Folpcs1在镰刀菌中的作用。方法:对Folpcs1的基因组DNA及cDNA测序后,利用Split-Marker基因敲除技术破坏该基因。构建含有潮霉素抗性基因(hph)的基因缺失盒。通过聚乙二醇(PEG)转化野生型原生质体法,获得了Folpcs1基因缺失突变株(ΔFolpcs1),并利用PCR法进行正负筛选。为了对缺失突变体互补,将pcs1及其上下游侧翼序列构建到pZWH1中后,回复到ΔFolpcs1中。结果:测序结果表明,有一个654bp的内含子,cDNA序列长度为2 846bp。通过观察发现,敲除突变体的生长速率明显降低,培养基中几乎观察不到分生孢子。回复突变体回复了野生型菌株的生长速率及分生孢子产生过程。结论:说明Folpcs1负责菌丝的营养生长和分生孢子的产生。

关键词：尖孢镰刀菌亚麻专化型 Folpcs1 Split-Marker 基因敲除

尖孢镰刀菌亚麻专化型FolCPKR基因敲除及功能研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

分子植物育种 2020年第21期18卷 7067-7073页

作者：刘家敏侯占铭内蒙古师范大学生命科学与技术学院呼和浩特010022

为研究尖孢镰刀菌亚麻专化型FolCPKR基因的功能,利用split marker技术构建含有潮霉素(hph)抗性基因的基因敲除盒,PEG(polyethylene glycol)介导法转化到野生型原生质体中,挑取对潮霉素B有抗性的转化子于TCC固体培养基,通过PCR正负筛选... 详细信息

为研究尖孢镰刀菌亚麻专化型FolCPKR基因的功能,利用split marker技术构建含有潮霉素(hph)抗性基因的基因敲除盒,PEG(polyethylene glycol)介导法转化到野生型原生质体中,挑取对潮霉素B有抗性的转化子于TCC固体培养基,通过PCR正负筛选得到敲除突变体。形态学观察表明,与野生型hm相比,敲除突变体的生长速率和分生孢子数显著减小。突变体分生孢子侵染亚麻幼苗试验显示,敲除突变体与野生型hm之间存在显著差异,敲除突变体分生孢子对亚麻幼苗的致病力明显下降,植株枯萎现象显著减弱。结果表明,FolCPKR基因与病原菌菌丝生长,分生孢子发生和致病力有关。

关键词：尖孢镰刀菌 FolCPKR基因 Split-Marker 基因敲除致病力

小麦赤霉菌FGSG＿05656基因敲除及功能分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

分子植物育种 2019年第10期17卷 3125-3132页

作者：张艳君侯占铭内蒙古师范大学生命科学与技术学院

小麦赤霉菌FGSG05656基因在MGV1敲除突变体中显著下调,为了进一步研究其生物学功能,本研究采用Split-Marker基因敲除技术,构建了含有潮霉素抗性基因(hph)的基因缺失盒。通过聚乙二醇(PEG)法转化野生型原生质体。潮霉素(Hygromycin)选择... 详细信息

小麦赤霉菌FGSG05656基因在MGV1敲除突变体中显著下调,为了进一步研究其生物学功能,本研究采用Split-Marker基因敲除技术,构建了含有潮霉素抗性基因(hph)的基因缺失盒。通过聚乙二醇(PEG)法转化野生型原生质体。潮霉素(Hygromycin)选择培养基筛选转化子后,PCR正负筛选鉴定敲除突变体。基于缺失突变体的表型和感染能力的变化来分析FGSG05656基因的生物学功能。与野生型PH-1相比,敲除突变体的生长速率和分生孢子数显著减少,表明FGSG05656基因可能参与菌丝体的生长和分生孢子的发生。植物感染试验显示缺失突变体与野生型之间没有显著差异。分生孢子是病原菌感染寄主的主要器官,它的减少可以显著减弱病原菌的扩散,FGSG05656基因敲除突变体分生孢子显著减少,这一结果对于进一步研究分生孢子发生的分子机理具有重要意义,同时为小麦抗病分子育种提供依据。

关键词：小麦赤霉菌 FGSG_05656 Split-Marker 基因敲除

小麦赤霉菌FGSG__04871基因敲除及功能研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

内蒙古师范大学学报（自然科学汉文版） 2017年第3期46卷 394-400页

作者：彭海丽侯占铭内蒙古师范大学生命科学与技术学院内蒙古呼和浩特010022

应用Split-Marker基因敲除技术,构建含有潮霉素抗性基因hph的基因敲除盒,由PEG介导,进行原生质体转化,在含有潮霉素的培养基上筛选转化子,应用PCR正负筛查确定缺失突变体.根据缺失突变体致病性的检测及表型变化对FGSG_04871基因的生物... 详细信息

应用Split-Marker基因敲除技术,构建含有潮霉素抗性基因hph的基因敲除盒,由PEG介导,进行原生质体转化,在含有潮霉素的培养基上筛选转化子,应用PCR正负筛查确定缺失突变体.根据缺失突变体致病性的检测及表型变化对FGSG_04871基因的生物学功能进行分析.通过PCR正负筛选成功获得了3个敲除突变体,分别命名为△FGSG_04871 1-1、△FGSG_04871 1-3、△FGSG_04871 2-1.以野生型PH-1作为对照,敲除突变体的菌落形态没有明显变化,菌落生长速度略微滞后,致病力没有减弱.但是,突变体的产孢量低于野生型PH-1,因此,FGSG_04871基因可能与小麦赤霉菌分生孢子的生长能力有关.

关键词：小麦赤霉菌 FGSG__04871 Split-Marker 基因敲除致病力

禾谷镰孢菌FGSG＿09482基因功能初探

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

分子植物育种 2020年第1期18卷 118-124页

作者：李丹侯占铭内蒙古师范大学生命科学与技术学院

为研究禾谷镰孢菌FGSG09482基因的生物学功能,以禾谷镰孢菌为试材,采用Split-Marker基因敲除技术构建基因敲除盒,PEG (聚乙二醇)介导转化法转化禾谷镰孢菌原生质体,在含有潮霉素的培养基上培养筛选,获得FGSG09482基因敲除突变株。通过... 详细信息

为研究禾谷镰孢菌FGSG09482基因的生物学功能,以禾谷镰孢菌为试材,采用Split-Marker基因敲除技术构建基因敲除盒,PEG (聚乙二醇)介导转化法转化禾谷镰孢菌原生质体,在含有潮霉素的培养基上培养筛选,获得FGSG09482基因敲除突变株。通过观察比较其敲除突变体表型,从而分析鉴定该基因的生物学功能。结果表明:以野生型PH-1作为对照,敲除突变体的菌落形态没有明显变化,分生孢子形态没有明显差异,培养滤液颜色没有明显区别。分生孢子侵染番茄果实实验表明,以番茄果实为侵染宿主,对比野生型PH-1,突变体致病力没有减弱。但突变体菌落的生长速率滞后于野生型PH-1;敲除突变体的产孢量低于野生型PH-1;有性杂交实验表明,敲除突变体几乎不产生子囊壳,野生型PH-1可以。本研究初步表明,FGSG09482基因对禾谷镰孢菌菌落的生长速率有一定的调控作用;对禾谷镰孢菌的分生孢子的产量、子囊壳的产生也有影响,推测FGSG09482基因可能与禾谷镰孢菌有性生殖、无性生殖过程相关。

关键词：禾谷镰孢菌 FGSG09482 Split-Marker 基因敲除