斑石鲷irf3基因鉴定及其在虹彩病毒感染下的表达模式

作     者：李开敏 王磊 巩志宏 王清滨 李华 杨桂文 黄友华 陈松林 LI Kaimin;WANG Lei;GONG Zhihong;WANG Qingbin;LI Hua;YANG Guiwen;HUANG Youhua;CHEN Songlin

作者机构：中国水产科学研究院黄海水产研究所海水养殖生物育种与可持续产出全国重点实验室农业农村部海洋渔业与可持续发展重点实验室 崂山实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室 莱州明波水产有限公司 山东师范大学 华南农业大学海洋学院海洋生物资源保护与利用粤港澳高校联合实验室广东省水产免疫与健康养殖工程技术研究中心 

出 版 物：《水产学报》 (Journal of Fisheries of China)

年 卷 期：2024年第48卷第4期

页      面：202-213页

核心收录：

学科分类：0906[农学-兽医学] 09[农学] 

基　　金：国家重点研发计划(2022YFF1000303) 山东省重点研发计划(2021LZGC028,2023ZLYS02) 山东省良种工程项目(2022LZGC016) 中国水产科学研究院基本科研业务费专项(2023TD20) 山东省泰山学者攀登计划~~ 

主　　题：斑石鲷 irf3 基因表达 siRNA 

摘      要：干扰素调节因子(irf3)是干扰素调节因子(IRF)家族的一员，是I型干扰素依赖性免疫反应的主要转录调节因子，在针对DNA和RNA病毒的先天免疫反应中发挥重要作用。本研究中，斑石鲷irf3基因(Oplegnathus punctatus interferon regulatory factors 3,Opirf3)来自实验室斑石鲷基因组数据库，经分析鉴定Opirf3的CDS序列全长1 362 bp，可编码453个氨基酸，预测其蛋白分子量为50.0 ku，理论等电点为4.97，有一个IRF结构域和一个IRF-3结构域。荧光定量分析结果显示，Opirf3在斑石鲷肝脏、鳃、心脏、皮肤、脾脏、肠、脑、肾脏、胃和头肾组织均有表达；虹彩病毒感染7 d时，免疫组织肝脏、脾脏和肾脏中Opirf3的表达水平显著上调。斑石鲷肾细胞系体外刺激实验显示，不同浓度poly I:C刺激后，Opirf3的表达量较对照组均显著升高，poly I:C浓度为100μg/mL时，肾脏细胞中Opirf3的相对表达水平升高，为对照组的86.8倍。siRNA干扰后，斑石鲷肾细胞系中Opirf3表达水平显著下调30%，下游基因IFN-α、CD40、CD80和IL-1β显著下调，IL-6显著上调。以上结果可能表明Opirf3基因参与了I型IFN在斑石鲷抗虹彩病毒过程中的先天免疫反应。本研究可为斑石鲷抗病分子育种提供理论依据。