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基于COI条形码的市售蝉蜕及其混淆品DNA分子鉴定研究

Molecular identification of commercial Cicadae Periostracum and its adulterants based on COI barcode sequence

作     者:张欢欢 徐金娣 周静 贾聪玲 吴啟南 郭梦斐 沈纪晨 伍城颖 李松林 毛茜 ZHANG Huanhuan;XU Jindi;ZHOU Jing;JIA Congling;WU Qinan;GUO Mengfei;SHEN Jichen;WU Chengying;LI Songlin;MAO Qian

作者机构:南京中医药大学附属中西医结合医院中药质量研究室江苏南京210028 江苏省中医药研究院/中国中医科院江苏分院中药代谢组研究室江苏南京210028 南京中医药大学药学院江苏南京210023 

出 版 物:《中草药》 (Chinese Traditional and Herbal Drugs)

年 卷 期:2024年第55卷第6期

页      面:2057-2065页

核心收录:

学科分类:1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基  金:江苏省中医药科技发展计划重点项目(ZD202103) 江苏省中医药科技发展计划面上项目(MS202341) 南京中医药大学自然科学基金(XZR2021031) 

主  题:蝉蜕 混淆品 DNA条形码 COI序列 分子鉴定 

摘      要:目的利用COI序列对中药材蝉蜕Cicadae Periostracum及其混淆品进行DNA条形码鉴定研究,为蝉蜕药材的快速准确鉴定提供新的技术手段。方法收集全国市售蝉蜕药材、基地自采蝉蜕及其混淆品总45份样本,同时采集江苏徐州黑蚱养殖基地不同树种中蝉卵样品5份作为对照。提取DNA,进行PCR扩增及双向测序,测序结果采用DNAMAN和SnapGene进行拼接校对,运用MEGA11.0进行比对分析,计算种内及种间Kimura 2-Parameter(K2P)遗传距离并构建邻接法(neighbor-joining,NJ)系统发育树。结果黑蚱种内遗传距离远小于种间最小遗传距离,NJ树结果显示,黑蚱蝉蜕样品全部聚集为独立的一支,支持率为99%。混淆品样品分别聚集为单独的一支,支持率均大于90%,表明基于COI序列的DNA条形码技术可以有效鉴别蝉蜕药材真伪。结论应用COI序列作为DNA条形码能够准确有效地鉴别蝉蜕及其混淆品。

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