人类肝素酶B细胞表位的预测和免疫原性鉴定

作     者：杜玲 王惠菊 杨建民 方勇 赵仲生 高寒 叶再元 YANG Jian-min

作者机构：浙江省人民医院消化内科杭州310014 浙江省胃肠病学重点实验室 浙江大学医学院附属邵逸夫医院肿瘤内科 

出 版 物：《中华微生物学和免疫学杂志》 (Chinese Journal of Microbiology and Immunology)

年 卷 期：2009年第29卷第3期

页      面：193-197页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目（30570816） 

主　　题：肝素酶 B细胞表位 表位预测 免疫原性 

摘      要：目的预测并鉴定肝素酶（heparanase）蛋白B细胞表位免疫原性。方法以肝素酶蛋白的氨基酸序列为基础，采用DNAStar分析软件以及Bcepred在线二级结构分析工具分析其蛋白二级结构并预测B细胞表位。根据预测结果，采用8分支多抗原肽结构合成针对该表位的抗原肽，将后者与通用型T辅助表位人IL-1β线性短肽（VQGEESNDK，氨基酸163～171）联合免疫日本白毛黑眼兔，检测免疫血清效价，鉴定其特异性和免疫原性。结果软件预测显示，肝素酶蛋白大亚基的第1～15位（MAP1）、第279～293位（MAP2）及175～189位（MAP3）氨基酸序列最可能为其优势B细胞表位。间接酶联免疫吸附试验、免疫印迹及免疫组化分析，证实MAP1、MAP2及MAP3均能诱导机体产生高滴度抗体，但仅MAP1、MAP2抗体具有高特异性，MAP2抗体与肝癌组织的结合力最强。结论肝素酶大亚基的第1～15位、第279～293位氨基酸为其优势B细胞表位，其中第279—293位氨基酸的免疫原性最强，这为肝素酶多肽抗体及B细胞优势短肽疫苗研制提供了理论依据。