免疫细胞糖酵解基因表达及相关免疫细胞在实验性自身免疫性神经炎小鼠中的变化

作     者：刘书平 马林卓 潘思嘉 龚俏宇 曹倩 肖哲曼 卢祖能 Liu Shuping;Ma Linzhuo;Pan Sijia;Gong Qiaoyu;Cao Qian;Xiao Zheman;Lu Zuneng

作者机构：武汉大学人民医院神经内科，武汉430061 

出 版 物：《中华医学杂志》 (National Medical Journal of China)

年 卷 期：2023年第103卷第17期

页      面：1334-1339页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100204[医学-神经病学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81971055) 中央高校自主科研项目(2042020kf0053) 湖北省重点实验室开放项目(2021KFY041) 

主　　题：糖酵解 急性炎性脱髓鞘性多发性神经根神经病 实验性自身免疫性神经炎 CD4+T细胞 巨噬细胞 

摘      要：目的探讨免疫细胞糖酵解基因表达及相关免疫细胞在实验性自身免疫性神经炎(EAN)小鼠的变化,深化EAN发病机制研究。方法将24只雄性C57BL/6小鼠(6~8周龄,18~20 g)按随机数字表法分为四组:对照组(造模过程中用PBS替换P0_(180-199)肽段,第16天处死)、EAN小鼠造模结束后第8天处死组(EAN 8 d)、EAN小鼠造模结束后第16天处死组(EAN 16 d)、EAN小鼠药物干预并予造模结束后第16天处死组[初次免疫当天开始每日腹腔注射2脱氧-D-葡萄糖(2-DG),550 mg/kg,EAN 16 d+2-DG],每组6只。对各组小鼠每日观察并记录临床症状,临床评分。观察结束时采用水合氯醛麻醉处死,收取各组小鼠血清、脾脏、坐骨神经等组织备用。坐骨神经HE染色及LFB染色观察炎性细胞浸润及脱髓鞘程度。流式细胞术检测M1型巨噬细胞比例,Th17细胞比例,Tregs细胞比例。RT-PCR检测糖酵解相关基因mTORC1、HIF1α、GLUT1、LDHA的mRNA表达水平。Western印迹检测巨噬细胞及坐骨神经组织的泛-赖氨酸乳酸化水平。结果与对照组、EAN 8 d组及EAN 16 d+2-DG组相比,EAN 16 d组M1型巨噬细胞及坐骨神经糖酵解相关基因(mTORC1、HIF1α、GLUT1、LDHA)表达明显上调(均P0.05)。对照组、EAN 8 d组、EAN 16 d组及EAN 16 d+2-DG组脾脏M1型巨噬细胞比例分别为4.28±0.13、7.54±0.25、13.16±0.33、4.13±0.38,EAN 16 d组明显高于其他组(均P0.05)。四组小鼠脾脏Th17细胞比例分别为3.78±0.03、8.24±0.55、12.30±1.34、4.83±0.01,EAN 16 d组明显高于其他组(均P0.05)。四组小鼠脾脏Tregs细胞比例分别为:10.01±1.05、7.54±0.70、3.82±0.47、8.22±1.21,EAN 16 d组明显低于其他组(均P0.05)。结论EAN小鼠发病过程中脾脏巨噬细胞糖酵解基因表达明显增强,CD4+T细胞糖酵解基因表达未见明显增强。脾脏M1型巨噬细胞、Th17细胞比例逐渐增加,Tregs细胞比例逐渐降低。