基于免疫-炎症-衰老探讨八子补肾胶囊对自然衰老小鼠老化过程的延缓作用

作     者：宋亚辉 马坤 张雅萍 王丹东 毛昕菁 张少兰 魏聪 SONG Yahui;MA Kun;ZHANG Yaping;WANG Dandong;MAO Xinjing;ZHANG Shaolan;WEI Cong

作者机构：河北中医学院石家庄050091 河北医科大学石家庄050017 南京中医药大学南京210046 络病研究与创新中药国家重点实验室石家庄050035 河北省络病重点实验室石家庄050035 国家中医药管理局中医络病学重点学科石家庄050035 

出 版 物：《中国实验方剂学杂志》 (Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae)

年 卷 期：2023年第29卷第9期

页      面：146-155页

核心收录：

学科分类：100504[医学-方剂学] 0710[理学-生物学] 1005[医学-中医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 07[理学] 071008[理学-发育生物学] 100501[医学-中医基础理论] 10[医学] 

基　　金：中国工程院战略咨询项目——中医药抗衰老战略研究项目(2022-XY-45) 河北省自然科学基金项目(H2022106065) 河北省络病实验室绩效后补助经费项目(20567627H) 河北省中医药管理局科研计划项目(2023172) 

主　　题：八子补肾胶囊 炎症 免疫 衰老 淋巴细胞亚群 衰老相关蛋白 

摘      要：目的:探讨八子补肾胶囊延缓自然衰老小鼠老化过程的功效作用及作用机制。方法:以13月龄自然衰老小鼠为实验研究对象,将其按体质量随机分为4组,即自然衰老组,八子补肾低、高剂量组(1、2 g·kg^(-1)),雷帕霉素组(0.002 g·kg^(-1))。通过行为学实验检测小鼠的衰弱表征并测定其虚弱指数;流式细胞术检测小鼠脾脏T和B淋巴细胞、效应性T细胞(TE)、记忆性T细胞(TM)、幼稚性T细胞(TN)、辅助性T细胞(Th)、细胞毒性T细胞(Tc)、Th1细胞、Th2细胞和调节性T细胞(Treg)比例;细胞增殖与活性检测(CCK-8)试剂盒检测小鼠淋巴细胞的增殖能力;苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠脾脏组织病理学变化;免疫组化法(IHC)检测细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2A(p16)和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(p21)的表达情况;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测衰老相关蛋白p16和p21的mRNA表达情况;Luminex检测小鼠外周血血清炎症因子:肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-1β、IL-2、IL-4、IL-10、IL-12 p70水平。结果:与自然衰老组比较,八子补肾组和雷帕霉素组小鼠的衰弱表征明显改善,虚弱指数评分明显降低(P0.05,P0.01);脾脏中T细胞、TN细胞、Tc细胞、Th2细胞和Treg细胞比例升高,TE细胞、TM细胞、Th细胞和Th1细胞比例下降(P0.05,P0.01);脾淋巴细胞增殖能力增强(P0.05,P0.01);脾脏红髓和白髓边缘区结构清晰,白髓面积增大,红髓面积相应减小;脾脏中衰老相关蛋白p16和p21蛋白表达量减少(P0.01);p16和p21的mRNA表达量降低(P0.01);血清中促炎细胞因子IL-1β、IL-2、IL-12 p70、IFN-γ和TNF-α水平降低,抗炎因子IL-4和IL-10水平升高(P0.05,P0.01)。结论:八子补肾胶囊具有调节自然衰老小鼠衰弱表征,调节机体免疫稳态及炎症水平,减少免疫细胞衰老的作用,起到了延缓衰老的作用功效。