上调的miR-452-5p抑制RORα的表达并促进肝癌细胞的增殖和迁移

作     者：史政科 陈佩佩 张怡轩 魏杰 杜亚楠 柳晓泉 SHI Zhengke;CHEN Peipei;ZHANG Yixuan;WEI Jie;DU Yanan;LIU Xiaoquan

作者机构：中国药科大学药物代谢动力学研究中心南京211198 

出 版 物：《中国药科大学学报》 (Journal of China Pharmaceutical University)

年 卷 期：2022年第53卷第3期

页      面：323-332页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 1006[医学-中西医结合] 07[理学] 071007[理学-遗传学] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

主　　题：miR-452-5p 肝细胞癌 生物信息学 差异表达 总生存期 RORα 增殖 迁移 

摘      要：为了探究肝细胞癌中miR-452-5p对患者预后生存的影响及其对肝癌细胞增殖、迁移的作用。采用肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库中肝细胞肝癌数据集对miR-452-5p进行差异表达分析和Kaplan-Meier生存分析。采用TargetscanHuman和miRDB靶基因数据库对miR-452-5p靶基因进行预测;采用基因差异表达分析和加权基因共表达网络分析(WGCNA)的方法对数据集GSE14520进行分析计算。用Lipofectmine-2000将miR-452-5p模拟物、模拟物阴性对照和miR-452-5p抑制剂、抑制剂阴性对照分别转染到Huh7细胞中。分别采用RT-qPCR和Westernblot实验,检测4组细胞中RORα在mRNA和蛋白水平上的表达情况。采用CCK-8、Transwell实验,检测4组细胞的增殖活力以及迁移能力。双荧光素酶报告基因实验验证Huh7细胞中miR-452-5p与RORα的调控关系。经TCGA数据分析,miR-452-5p在肝癌组织中高表达且显著影响患者预后总生存期。通过miRNA靶基因预测、基因差异表达分析、WGCNA分析,筛选出关键基因RORα和LAMC1。通过Kaplan-Meier生存分析得知RORα的异常表达显著影响肝癌患者的预后总生存期。肝癌细胞中miR-452-5p的过表达,会降低RORα的mRNA和蛋白表达,同时增强肝癌细胞的增殖能力和迁移能力。双荧光素酶报告基因实验结果证实了miR-452-5p靶向RORα的3′UTR区。在肝细胞癌患者中高表达的miR-452-5p靶向抑制了RORα的表达,促进了肝癌细胞增殖和迁移,进而加剧了肝癌的进展和预后不良。