绞股蓝皂苷A调控lncRNA TTTY15/miR-335-5p通路对骨关节炎软骨细胞损伤的影响及机制

作     者：牛帅帅 孙卓伟 王承群 NIU Shuaishuai;SUN Zhuowei;WANG Chengqun

作者机构：济宁医学院附属医院骨关节科山东省济宁市272000 山东省桓台县人民医院骨二科 

出 版 物：《河北医药》 (Hebei Medical Journal)

年 卷 期：2022年第44卷第7期

页      面：981-985页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

主　　题：绞股蓝皂苷A lncRNA TTTY15 miR-335-5p 骨关节炎 软骨细胞 增殖 凋亡 

摘      要：目的探讨绞股蓝皂苷A(GpA)对骨关节炎软骨细胞损伤的影响及其对lncRNA TTTY15/miR-335-5p通路的调控作用。方法采用白介素-1β(IL-1β)诱导软骨细胞建立骨关节炎软骨细胞损伤模型,用不同剂量的GpA处理细胞,pcDNA、pcDNA-TTTY15分别转染入软骨细胞后用GpA与IL-1β共同处理细胞;qRT-PCR法检测TTTY15、miR-335-5p的表达量;ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)的水平;用试剂盒检测SOD、MDA的水平;CCK-8实验、流式细胞术分别检测细胞增殖与凋亡;双荧光素酶报告基因实验检测TTTY15与miR-335-5p的靶向关系;Western blot法检测Bcl-2、Bax蛋白表达量。结果IL-1β诱导的软骨细胞中TNF-α、IL-6、MDA的水平升高(P0.05),凋亡率与Bax蛋白水平升高(P0.05),TTTY15的表达水平升高(P0.05),而SOD的活性与细胞存活率降低(P0.05),Bcl-2蛋白水平降低(P0.05),miR-335-5p的表达水平降低(P0.05);随着GpA浓度的升高IL-1β诱导的软骨细胞中TNF-α、IL-6、MDA的水平降低(P0.05),凋亡率与Bax蛋白水平降低(P0.05),TTTY15的表达水平降低(P0.05),而SOD的活性与细胞存活率升高(P0.05),Bcl-2蛋白水平升高(P0.05),miR-335-5p的表达水平升高(P0.05),且呈剂量依赖性;TTTY15可靶向调控miR-335-5p;TTTY15过表达可通过降低miR-335-5p的表达而逆转GpA对IL-1β诱导的软骨细胞炎性因子、氧化应激、细胞存活率及凋亡的作用。结论绞股蓝皂苷A可通过调控TTTY15/miR-335-5p通路而抑制炎性反应、氧化应激、凋亡及促进细胞增殖进而减轻IL-1β诱导的软骨细胞损伤。