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应用突变的断裂蛋白质内含子标记蛋白质N端

Protein N-Terminal Labeling Using a Mutant Split-intein

作     者:戴旭东 李佳 刘相钦 孟清 DAI Xu-Dong;Li Jia;LIU Xiang-Qin;MENG Qing

作者机构:东华大学生物科学与技术研究所上海201620 达尔豪斯大学生物化学与分子生物学系HalifaxNova Scotia B3H 4R2Canada 

出 版 物:《中国生物化学与分子生物学报》 (Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology)

年 卷 期:2014年第30卷第5期

页      面:508-515页

核心收录:

学科分类:0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 07[理学] 

基  金:加拿大国家科学与工程研究委员会基金 国家高技术研究发展计划(863计划,No.2006AA03Z451) 国家自然科学基金项目(No.31070698) 上海市基础研究重点项目(No.10JC1400300) 教育部博士点基金项目(No.20120075110007)资助~~ 

主  题:断裂蛋白质内含子 蛋白质剪接 N端标记 荧光基团 

摘      要:蛋白质的特异位点修饰可以帮助了解蛋白质的结构与功能.但是,现有的蛋白质特异位点标记方法种类有限,而且存在局限性,所以有必要开发新的蛋白质特异位点标记方法.以谷胱甘肽-S-转移酶(GST)为研究对象,借助蛋白质反式剪接技术,建立了利用新型断裂蛋白质内含子对蛋白质进行N端标记的新方法.在这个方法中,通过简单的重组表达、标记和纯化得到带有荧光基团的小肽,经过蛋白质反式剪接,荧光基团被标记到蛋白质的N端.初步研究结果显示,标记效率可达到12%.

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