dsRNA介导的PTEN基因表达上调及其与启动子区甲基化的关系

作     者：李晓 周足力 杨帆 王云 姜冠潮 王俊 LI Xiao;ZHOU Zu-li;YANG Fan;WANG Yun;JIANG Guan-chao;WANG Jun

作者机构：北京大学人民医院胸外科100044 

出 版 物：《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期：2011年第28卷第7期

页      面：1163-1165页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30772535) 

主　　题：dsRNA RNAa PTEN DNA甲基化 

摘      要：目的观察以启动子区非CpG岛序列为靶点的dsRNA促进PTEN基因的表达，并探讨RNAa现象对PTEN基因启动子区DNA甲基化的影响。方法将与PTEN基因启动子区非CpG岛DNA序列互补的双链RNA分子（dsPTEN）转染入A549和H292肺癌细胞中，采用real—time聚合酶链反应（PCR）检测PTEN的表达，筛选能够促进PTEN基因表达的有效dsRNA序列。通过甲基化特异性PCR（MSP）产物测序，检测dsRNA转染前后启动子区甲基化程度的变化。结果经多条dsRNA分别转染肺癌细胞，证实针对PTEN基因-57到-38的序列（dsPTEN2—2）转染H292肺癌细胞后出现PTEN基因表达的明显上调，上调最高达5．1倍（与对照dsRNA比较，P〈0．05），证实了RNAa现象的存在；使用5-Aza处理后的A549和H292细胞与空白组比较CpG点甲基化明显减少（5±3比10±4、6±3比9±3，P均〈0．05），而转染PTEN2—2dsRNA后的两个细胞株CpG点甲基化情况与未转染组比较无明显变化（94-2比104-4、9±3比9±3，P均〉0．05）。结论dsRNA可以促进PTEN基因表达的上调，RNAa现象并不改变PTEN基因启动子区甲基化程度。