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rnaa效应研究及应用进展

广东医学院学报 2013年第1期31卷 65-68页

作者：阿彩岭陈嵘祎广东医学院附属医院皮肤科广东湛江524001

rnaa(RNA activation)是指某些最新发现的反标准非编码RNA(ncRNA)在转录水平上激活目的基因表达的现象,这种发挥激活作用的小分子RNA又叫小激活RNA(saRNA),属小分子双链非编码RNA家族,其作用机制尚未完全明了,但其应用前景已引起人们的... 详细信息

rnaa(RNA activation)是指某些最新发现的反标准非编码RNA(ncRNA)在转录水平上激活目的基因表达的现象,这种发挥激活作用的小分子RNA又叫小激活RNA(saRNA),属小分子双链非编码RNA家族,其作用机制尚未完全明了,但其应用前景已引起人们的关注。该文就rnaa的效应及其应用进展进行了综述。

关键词： rnaa RNAi 肿瘤

dsRNA介导的PTEN基因表达上调及其与启动子区甲基化的关系

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中华实验外科杂志 2011年第7期28卷 1163-1165页

作者：李晓周足力杨帆王云姜冠潮王俊北京大学人民医院胸外科 100044

目的观察以启动子区非CpG岛序列为靶点的dsRNA促进PTEN基因的表达，并探讨rnaa现象对PTEN基因启动子区DNA甲基化的影响。方法将与PTEN基因启动子区非CpG岛DNA序列互补的双链RNA分子（dsPTEN）转染入A549和H292肺癌细胞中，采用real—tim... 详细信息

目的观察以启动子区非CpG岛序列为靶点的dsRNA促进PTEN基因的表达，并探讨rnaa现象对PTEN基因启动子区DNA甲基化的影响。方法将与PTEN基因启动子区非CpG岛DNA序列互补的双链RNA分子（dsPTEN）转染入A549和H292肺癌细胞中，采用real—time聚合酶链反应（PCR）检测PTEN的表达，筛选能够促进PTEN基因表达的有效dsRNA序列。通过甲基化特异性PCR（MSP）产物测序，检测dsRNA转染前后启动子区甲基化程度的变化。结果经多条dsRNA分别转染肺癌细胞，证实针对PTEN基因-57到-38的序列（dsPTEN2—2）转染H292肺癌细胞后出现PTEN基因表达的明显上调，上调最高达5．1倍（与对照dsRNA比较，P〈0．05），证实了rnaa现象的存在；使用5-Aza处理后的A549和H292细胞与空白组比较CpG点甲基化明显减少（5±3比10±4、6±3比9±3，P均〈0．05），而转染PTEN2—2dsRNA后的两个细胞株CpG点甲基化情况与未转染组比较无明显变化（94-2比104-4、9±3比9±3，P均〉0．05）。结论dsRNA可以促进PTEN基因表达的上调，rnaa现象并不改变PTEN基因启动子区甲基化程度。

关键词： dsRNA rnaa PTEN DNA甲基化

放化分离中子活化分析在测定生物样品中的应用

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核技术 1992年第2期15卷 113-116页

作者：王荫淞庄圭荪谈明光支敏成源棣中国科学院上海原子核研究所上海201800

本文描述了用放化分离中子活化分析法(rnaa)测定生物样品中的微量元素。rnaa法是一种精确可靠的分析方法,因为它采用放化分离除去了干扰放射性。为了保证分析质量,来自各国的研究小组测定了生物盲样中的微量元素As、Cd、Cu、Hg、Se和Zn... 详细信息

本文描述了用放化分离中子活化分析法(rnaa)测定生物样品中的微量元素。rnaa法是一种精确可靠的分析方法,因为它采用放化分离除去了干扰放射性。为了保证分析质量,来自各国的研究小组测定了生物盲样中的微量元素As、Cd、Cu、Hg、Se和Zn。结果表明在这个盲样分析中rnaa是最好的方法。

关键词： rnaa 生物样品微量元素

广东南雄盆地白垩系第三系(K/T)交界恐龙蛋壳的铱丰度异常

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中国科学（D辑） 1998年第5期28卷 425-430页

作者：赵资奎毛雪瑛柴之芳欧阳宏佘德伟中国科学院古脊椎动物与古人类研究所北京100044 中国科学院高能物理研究所北京100080

用放射化学中子活化分析 (rnaa)方法测定广东南雄盆地K/T界线剖面恐龙蛋壳的铱含量 ,发现在根据孢粉组合变化划分的K/T界线及其附近的 3个层位的蛋壳样品有铱含量异常 .在界线层底部的蛋壳样品 (CGD1 1 1 )中铱丰度最高 ,相当于背景值... 详细信息

用放射化学中子活化分析 (rnaa)方法测定广东南雄盆地K/T界线剖面恐龙蛋壳的铱含量 ,发现在根据孢粉组合变化划分的K/T界线及其附近的 3个层位的蛋壳样品有铱含量异常 .在界线层底部的蛋壳样品 (CGD1 1 1 )中铱丰度最高 ,相当于背景值的 8～ 1 0倍 .另外两个含有铱异常的样品 (CGD1 0 9和CGD1 1 9)分别采自界线层之下 2～ 5m间隔和界线层之上 31～ 33m间隔之中 .这一新发现能够把K/T交界Ir富集事件与恐龙灭绝直接联系起来 .结合过去在这一相同的地层间隔内已发现的蛋壳其它微量元素、氧同位素以及蛋壳结构的异常变化 ,提出 (ⅰ )恐龙蛋壳含有异常量的铱和其它微量元素是通过食物进入恐龙体内 ,然后经新陈代谢作用而沉积到它们所产的蛋壳中的 ;(ⅱ )南雄盆地K/T过渡期间发生以铱异常为标志的环境事件至少持续了 1 5 0ka .

关键词：恐龙蛋壳白垩系铱丰度 rnaa 第三系

人工合成小分子双链RNA通过激活p21基因的表达对膀胱癌细胞的抑制作用

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人工合成小分子双链RNA通过激活p21基因的表达对膀胱癌细胞的抑制...

作者：盖强强华中科技大学

学位级别：硕士

第一部分外源性和内源性小分子dsRNA对膀胱癌细胞中p21蛋白激活表达能力的比较目的:人工合成分别与miR-1236-3p、miR-370-5p所作用的p21基因启动子序列区域完全互补配对的8对小分子dsRNA:dsP21-242、dsP21-243、dsP21-244、dsP21-245和d... 详细信息

第一部分外源性和内源性小分子dsRNA对膀胱癌细胞中p21蛋白激活表达能力的比较目的:人工合成分别与miR-1236-3p、miR-370-5p所作用的p21基因启动子序列区域完全互补配对的8对小分子dsRNA:dsP21-242、dsP21-243、dsP21-244、dsP21-245和dsP21-552、dsP21-553、dsP21-554、dsP21-555,分别观察其与miR-1236-3p、miR-370-5p在上调人膀胱癌细胞系(T24和EJ)中抑癌基因p21/CIP1表达能力的不同。方法:8对dsRNA通过参照sa RNA的设计原则设计合成。分别转染dsControl(阴性对照)、miRNA(阳性对照)及对应的dsRNA至T24和EJ细胞,通过qPCR、RT-PCR和Western blot分别检测p21 mRNA和p21蛋白表达水平。结果:qPCR检测显示dsP21-245和dsP21-555均能明显促进两种细胞中p21mRNA水平的升高;与dsControl组相比,dsP21-245分别促进T24和EJ细胞中p21 mRNA的表达至2.32倍(P0.05);与dsControl组相比,dsP21-555均能明显促进T24和EJ细胞中p21 mRNA的高表达(P0.05)。通过RT-PCR得到了进一步验证。蛋白质印迹法提示,在T24和EJ细胞中,p21蛋白表达变化与p21 mRNA表达变化一致。与dsControl组相比,其余6对dsRNA均未能同时显著上调两种细胞系中p21/CIP基因的表达(P>0.05)。结论:外源性的dsP21-245和dsP21-555能显著促进膀胱癌细胞中p21/CIP1的高表达,且与相应的内源性miRNA激活p21/CIP1表达的能力无明显差异。第二部分外源性dsRNA通过激活p21蛋白的表达抑制膀胱癌细胞生长目的:通过转染外源性dsP21-555至膀胱癌细胞T24和EJ中,观察其能否抑制膀胱癌细胞的生长。方法:分别转染dsControl(阴性对照组)、miR-370-5p(阳性对照组)和dsP21-555(实验组)至膀胱癌细胞系T24和EJ。通过qPCR检测p21 mRNA和CDK4/6mRNA的表达变化。通过蛋白质印迹法检测p21蛋白和CDK4和CDK6蛋白的表达。通过流式细胞术检测三组中细胞周期分布。MTS法检测三组中细胞增殖能力。集落形成实验检测三组中单个细胞克隆增殖能力。结果:qPCR结果显示,与阴性对照组dsControl相比,dsP21-555分别促进T24和EJ细胞中p21 mRNA表达至2.46倍(P0.05);与阴性对照组dsControl相比,dsP21-555组T24和EJ细胞中CDK4mRNA的表达下调至0.57倍(P0.05)。蛋白质印迹法提示,p21和CDK4及CDK6蛋白表达变化与相应mRNA表达变化一致。FCM检测显示,与阴性对照组dsControl相比,转染miR-370-5p或dsP21-555后,处于G0/G1期的细胞比例明显上升,而处于S期和G2/M期的细胞比例下降,表明细胞周期被阻滞在G0/G1期。MTS法显示,与dsControl相比,转染miR-370-5p或dsP21-555后细胞增殖能力均明显减弱(P0.05)。细胞集落形成实验显示,阳对对照组miR-370-5p和实验组dsP21-555形成的集落数数量均较阴性对照组dsControl少。结论:外源性dsP21-555能激活p21蛋白的表达,具有对膀胱癌细胞生长的抑制作用。

关键词： miR-1236-3p miR-370-5p dsRNA rnaa p21WAF1/CIP1 膀胱癌细胞 p21 RNA激活

saRNA调控NIS基因介导^(131)I对肝癌HepG2细胞体外抑制作用的实验研究

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标记免疫分析与临床 2015年第11期22卷 1138-1143页

作者：王国玉夏伟倪晶庄菊花同济大学医学院上海200092 上海市第七人民医院核医学科上海200137

目的探索通过小激活RNA(saRNA)调控钠碘转运体(NIS)基因特异性表达介导肝癌核素显像和治疗的可行性,为RNA激活(rnaa)技术介导核素基因治疗肿瘤的应用提供实验依据。方法 saRNA的设计合成:通过基因BLAST比对,设计与合成三条针对NIS基因的... 详细信息

目的探索通过小激活RNA(saRNA)调控钠碘转运体(NIS)基因特异性表达介导肝癌核素显像和治疗的可行性,为RNA激活(rnaa)技术介导核素基因治疗肿瘤的应用提供实验依据。方法 saRNA的设计合成:通过基因BLAST比对,设计与合成三条针对NIS基因的saRNA序列;细胞转染:以LipofectaminTM2000为saRNA载体,将saRNA转染到肝癌Hep G2细胞后72h,采用Western blotting分析NIS蛋白的表达水平,筛选出rnaa效率最高的saRNA,并进一步分析saRNA转染后不同时相NIS的表达水平,以及saRNA浓度-NIS表达水平的浓度-效应关系;体外核素摄取实验:体外培养条件下,评价转染肝癌Hep G2细胞对125I的摄取;细胞生长增殖抑制实验:体外培养条件下,评价131I对转染肝癌细胞的生长抑制率。结果 saRNA可上调NIS基因表达水平,其中saRNA482序列上调NIS表达水平最高;saRNA上调NIS的峰值出现在转染后72h,NIS维持高表达水平在10d以上;且NIS上调水平随saRNA浓度增高而增高。体外培养条件下,转染细胞与未转染细胞的摄碘水平差别明显,其中最高者摄碘较对照细胞高出64倍。体外培养条件下,相对未转染组肝癌细胞,131I对转染组Hep G2细胞的生长抑制率为60.7%。结论本研究设计合成的靶向NIS基因的saRNA可上调肝癌细胞NIS的表达水平,增强肝癌细胞摄取放射性碘的能力,研究还证实,通过rnaa调控NIS基因表达可介导131I治疗肝癌的潜力。

关键词：钠碘转运体肝癌 HepG2 rnaa 小激活RNA 131I

靶向性纳米载体及RNA激活系统在抗肿瘤运用中的研究进展

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广东医学院学报 2011年第1期29卷 77-79页

作者：陈嵘祎罗世英彭新生樊翌明广东医学院附属医院皮肤科广东湛江524001 广东医学院药学院广东湛江524023

靶向性纳米技术以及RNA激活技术是抗肿瘤研究热点,本文简要论述了纳米药物载体在抗肿瘤靶向性研究的进展,以及RNA激活技术的机制;并对靶向性纳米载体与RNA激活技术在抗肿瘤方面联合运用的可行性及应用前景进行了分析。

关键词：纳米载体 rnaa 肿瘤综述文献

小麦粉和人发一级国家标准物质中稀土含量定值研究

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小麦粉和人发一级国家标准物质中稀土含量定值研究