bFGF对3-硝基丙酸处理的小鼠受精卵体外发育能力的影响

作     者：田微 方妍雅 柳海星 李钟淑 TIAN Wei;FANG Yanya;LIU Haixing;LI Zhongshu

作者机构：延边大学农学院延吉133000 

出 版 物：《中国畜牧兽医》 (China Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2022年第49卷第2期

页      面：608-614页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 0905[农学-畜牧学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0836[工学-生物工程] 090501[农学-动物遗传育种与繁殖] 

基　　金：国家自然科学基金“氧化应激诱导的母型-合子型时期哺乳动物胚胎发育阻滞机理的研究”(32060756) 国家自然科学基金“哺乳动物体细胞克隆胚胎抗氧化机理的研究”(31360546) 延边州延边黄牛品种选育项目(413090128、413090132、413090127) 

主　　题：小鼠 胚胎发育 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) 3-硝基丙酸(3-NPA) 活性氧 

摘      要：【目的】研究在体外培养液中添加碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对3-硝基丙酸(3-NPA)处理的小鼠受精卵体外发育能力的影响,为提高氧化应激早期胚胎体外发育质量提供参考。【方法】在小鼠受精卵体外培养液中添加0、20、50、100和150 ng/mL bFGF,培养24、48和96 h,统计2-细胞率、4-细胞率和囊胚率,筛选最佳bFGF处理浓度。经腹腔注射12.5 mg/kg 3-NPA生产氧化应激体内受精卵,正常组小鼠腹腔注射等体积生理盐水,将获得的受精卵分为添加或不添加bFGF组,即3-NPA和3-NPA+bFGF组及对照组(C)和bFGF组,培养到囊胚后,用DCFH-DA检测胚胎内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,CMF2HC检测谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平,JC-1检测早期胚胎线粒体膜电位强度。【结果】0、20、50、100和150 ng/mL bFGF组2-细胞率均无显著差异(P0.05),100 ng/mL bFGF组囊胚率显著高于其他各组(P0.05),150 ng/mL bFGF组4-细胞率和囊胚率均显著低于其他各组(P0.05),因此后续试验选用100 ng/mL bFGF。3-NPA+bFGF组4-细胞率显著高于3-NPA组(P0.05),bFGF组囊胚率显著高于其他组(P0.05)。bFGF+3-NPA组囊胚率显著高于3-NPA组(P0.05);与对照组相比,3-NPA组ROS水平显著升高(P0.05),bFGF组ROS水平显著降低(P0.05);3-NPA组GSH和线粒体膜电位水平均显著降低(P0.05),bFGF组GSH和线粒体膜电位水平均显著增加(P0.05)。bFGF+3-NPA组ROS水平显著低于3-NPA组(P0.05),GSH和线粒体膜电位水平均显著高于3-NPA组(P0.05)。【结论】在体外培养液中添加100 ng/mL bFGF可减少3-NPA诱导的胚胎氧化应激、改善胚胎线粒体功能,从而提高小鼠受精卵体外发育的能力。