鹅星状病毒衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体的制备和鉴定

作     者：吕炫 张淼 胡增金 李佳明 张冲 朱英奇 魏娟文 吴琼 张瑞辰 夏伦志 王桂军 LYU Xuan;ZHANG Miao;HU Zeng-jin;LI Jia-ming;ZHANG Chong;ZHU Ying-qi;WEI Juan-wen;WU Qiong;ZHANG Rui-chen;XIA Lun-zhi;WANG Gui-jun

作者机构：安徽农业大学动物科技学院安徽合肥230036 兽医病理生物学与疫病防控安徽省重点实验室安徽合肥230036 安徽省农业科学院畜牧兽医研究所安徽合肥230036 

出 版 物：《江苏农业学报》 (Jiangsu Journal of Agricultural Sciences)

年 卷 期：2021年第37卷第2期

页      面：412-417页

核心收录：

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：科技部国家重点研发计划项目(2018YFD0500100、2016YFD0500805) 安徽省家禽产业技术体系项目(2019-2020) 

主　　题：鹅星状病毒 衣壳纤突蛋白VP27 多克隆抗体 

摘      要：采用RT-PCR扩增获得鹅星状病毒(Goose astrovirus)的衣壳纤突蛋白基因vp27,并将其克隆至pCold-SUMO原核表达载体。重组表达载体pCold-vp27经过测序和双酶切验证正确后,转化到感受态细胞Rosetta。挑取阳性克隆子,利用异丙基硫代半乳糖苷诱导表达鹅星状病毒衣壳纤突重组蛋白,使用镍柱纯化衣壳纤突蛋白VP27,将定量的重组蛋白免疫BALB/c小鼠。利用ELISA、Western blot和IFA鉴定鼠抗衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体。结果显示,鼠抗衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体的效价大于1∶64000,Western blot试验结果证明了鼠抗衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体的特异性,IFA试验结果证明鼠抗衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体能够识别天然的鹅星状病毒衣壳纤突蛋白VP27。