鹅星状病毒衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体的制备和鉴定
Preparation and identification of polyclonal antibody against the capsid spike protein VP27 of goose astrovirus作者机构:安徽农业大学动物科技学院安徽合肥230036 兽医病理生物学与疫病防控安徽省重点实验室安徽合肥230036 安徽省农业科学院畜牧兽医研究所安徽合肥230036
出 版 物:《江苏农业学报》 (Jiangsu Journal of Agricultural Sciences)
年 卷 期:2021年第37卷第2期
页 面:412-417页
核心收录:
学科分类:090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学]
基 金:科技部国家重点研发计划项目(2018YFD0500100、2016YFD0500805) 安徽省家禽产业技术体系项目(2019-2020)
主 题:鹅星状病毒 衣壳纤突蛋白VP27 多克隆抗体
摘 要:采用RT-PCR扩增获得鹅星状病毒(Goose astrovirus)的衣壳纤突蛋白基因vp27,并将其克隆至pCold-SUMO原核表达载体。重组表达载体pCold-vp27经过测序和双酶切验证正确后,转化到感受态细胞Rosetta。挑取阳性克隆子,利用异丙基硫代半乳糖苷诱导表达鹅星状病毒衣壳纤突重组蛋白,使用镍柱纯化衣壳纤突蛋白VP27,将定量的重组蛋白免疫BALB/c小鼠。利用ELISA、Western blot和IFA鉴定鼠抗衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体。结果显示,鼠抗衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体的效价大于1∶64000,Western blot试验结果证明了鼠抗衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体的特异性,IFA试验结果证明鼠抗衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体能够识别天然的鹅星状病毒衣壳纤突蛋白VP27。