用聚合酶链式反应扩增抗冻肽基因并在双元表达载体中克隆
Amplification of an Antifreeze Peptide Gene by PCR and Its Cloning in the Binary Expression Vectors Erden Dalai作者机构：内蒙古大学生物学系
出 版 物：《内蒙古大学学报（自然科学版）》 (Journal of Inner Mongolia University：Natural Science Edition)
年 卷 期：1995年第26卷第4期
页 面：466-472页
学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种]
基 金：国家自然科学生物高技术资助
摘 要：抗冻肽基因导入植物的第一步合成了５＇－末端分别带有限制性酶ｘｂａＩ和ＫｐｎＩ识别位点的一对引物，以美洲拟鲽抗冻肽的ｃＤＮＡ克匪为模板，用锚定聚合酶链式反应扩增了抗冻肽基因，并克隆到细菌表达载体ｐＧＥＭ３２ｆ（—）和植物表达盒式载体ｐＧＡ６４３中，以限制性酶切分析和菌落杂交技术证明了转化子质粒ＤＮＡ中的含有抗冻肽基因，又用ＰＣＲ方法扩增了转化子的抗冻肽基因，从而证实了克隆成功．
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