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乳酸菌联合美妇康对Hela细胞HPV18 E6/E7基因表达及细胞活性的影响

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乳酸菌联合美妇康对Hela细胞HPV18 E6/E7基因表达及细胞活性的影响

作者：王萍遵义医科大学

学位级别：硕士

hESCs诱导“仿生羊膜”向ESLCs转化的实验研究

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hESCs诱导“仿生羊膜”向ESLCs转化的实验研究

作者：张水勤遵义医科大学

学位级别：硕士

目的:探索在Transwell共培养条件下,人子宫内膜间质细胞对种植在人脱细胞羊膜上的人羊膜间充质干细胞的定向诱导作用。方法:人羊膜组织分离获取人羊膜间充质干细胞（Human amniotic mesenchymal stem cells,h AMSCs）,行流式细胞学表型... 详细信息

目的:探索在Transwell共培养条件下,人子宫内膜间质细胞对种植在人脱细胞羊膜上的人羊膜间充质干细胞的定向诱导作用。方法:人羊膜组织分离获取人羊膜间充质干细胞（Human amniotic mesenchymal stem cells,h AMSCs）,行流式细胞学表型及免疫荧光对h AMSCs进行鉴定。酶脱细胞方法制备人脱细胞羊膜（Human acellular amniotic membrane,HAAM）;苏木精-伊红染色法（hematoxylin-eosin staining,HE）观察人羊膜组织及HAAM结构。将h AMSCs种植在HAAM上制备“仿生羊膜”生物模型。人子宫内膜组织分离获取人子宫内膜间质细胞（Human endometrial stromal cells,h ESCs）,免疫组化法鉴定波形蛋白（Vimentin）及角蛋白（Cytokeratin）的表达情况。A组:“仿生羊膜”与h ESCs通过Transwell分别共培养3天、8天。B组:“仿生羊膜”单独培养8天。C组:h ESCs单独培养8天。激光共聚焦观察Vimentin、Cytokeratin的表达情况;实时荧光定量PCR检测A、B、C组的Vimentin、CK18及CK19的m RNA的表达情况。P＜0.05表示差异具有统计学差异。结果:成功获取h AMSCs,流式细胞学表型鉴定高表达CD105（98.4%）、CD29（98.2%）、CD44（99.2%）,低表达CD34（15%）及HLA-DR（4.2%）。免疫荧光显示h AMSCs表达Vimentin,不表达Cytokeratin。HE染色及扫描电镜见HAAM上细胞脱落干净,只留下各类胶原纤维。“仿生羊膜”上,h AMSCs呈地毯式分布生长,发出细胞骨架与HAAM的各类粗细纤维紧密连接。分离获取h ESCs,免疫组化显示Vimentin表达阳性,Cytokeratin表达阴性。共培养后“仿生羊膜”上细胞密度未见明显增长,细胞形态由扁平的长梭形,转变纺锤体状,外形与h ESCs相似。共培养后“仿生羊膜”免疫荧光结果均表达Vimentin,不表达CK19。免疫荧光定量PCR显示:（1）共培养后“仿生羊膜”与B组比较:CK19、CK18及Vimentin差异均有统计学意义（P＜0.05）,经过共培养后,“仿生羊膜”上的h AMSCs没有向上皮方向转化,也未明显向子宫内膜间质样细胞（Endometrial stromal like cells,ESLCs）方向转化。（2）共培养3天与8天的“仿生羊膜”比较:Vimentin差异有统计学意义（P＜0.05）,结合（1）对比,说明被诱导3天和8天后的“仿生羊膜”上的h AMSCs保留间质细胞功能。（3）共培养后“仿生羊膜”与C组比较:CK19及CK18差异均有统计学意义（P＜0.05）,经过共培养后,“仿生羊膜”上的h AMSCs没有向上皮细胞方向转化;共培养3天后“仿生羊膜”与C组比较:Vimentin差异有统计学意义（P＜0.05）,“仿生羊膜”上的h AMSCs未明显向ESLCs方向转化;但共培养8天后“仿生羊膜”与C组比较:Vimentin差异没有统计学意义（P＞0.05）,说明经过共培养8天后,“仿生羊膜”上的h AMSCs成功向子宫内膜间质样细胞ESLCs转化。结论:1、hAMSCs可发出细胞骨架与HAAM发生连接,且这种连接不改变hAMSCs的干细胞特征,表明“仿生羊膜”的理念是可行的。2、在Transwell共培养特定条件下,h ESCs可诱导“仿生羊膜”上的h AMSCs定向转化为ESLCs,为“仿生羊膜”用于医源性宫腔不孕的后续研究提供了实验依据。

关键词：间充质干细胞子宫内膜间质细胞脱细胞羊膜诱导分化

乳酸菌发酵液联合瑞琳他抗对Hela细胞活性及HPV18病毒载量影响的实验研究

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乳酸菌发酵液联合瑞琳他抗对Hela细胞活性及HPV18病毒载量影响的...

作者：卢韦遵义医科大学

学位级别：硕士

乳酸菌发酵液联合瑞贝生对Hela细胞HPV18 E6/E7基因表达及细胞抑制作用的实验研究

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乳酸菌发酵液联合瑞贝生对Hela细胞HPV18 E6/E7基因表达及细胞抑...

作者：张娜遵义医科大学

学位级别：硕士

MAS-IUS优化品在模拟宫腔液中LNG释放规律及Cu2+浓度测定的实验研究

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MAS-IUS优化品在模拟宫腔液中LNG释放规律及Cu2+浓度测定的实验研...

作者：杨丽遵义医科大学

学位级别：硕士

目的:探索“记忆合金硅胶宫内缓释系统”（Memory Alloy Silicone Intrauterine System,MAS-IUS）优化品在模拟宫腔液中左炔诺孕酮（Levonorgestrel,LNG）的释放规律以及纳米铜的存在形式及铜离子浓度测定（37℃恒温环境中）,以期为MAS-... 详细信息

目的:探索“记忆合金硅胶宫内缓释系统”（Memory Alloy Silicone Intrauterine System,MAS-IUS）优化品在模拟宫腔液中左炔诺孕酮（Levonorgestrel,LNG）的释放规律以及纳米铜的存在形式及铜离子浓度测定（37℃恒温环境中）,以期为MAS-IUS持续改进及后续研究提供实验数据。方法:以纳米铜硅胶膜厚度为1 mm、膜中纳米铜浓度为3 g/L为制环参数,以增量法加入52 mg左炔诺孕酮标准品,按IUS标准生产工艺流程制备MAS-IUS优化品;将MAS-IUS优化品充分洗涤后分别放入15 m L聚丙烯管中,随机分为两组,每组5个样品,试验组加入7.5 m L模拟宫腔液（全面淹没MAS-IUS优化品）,对照组加入7.5 m L生理盐水,将样品置于37℃恒温水浴箱中,每24 h分别于各样品溶液取液1 m L,每次取液完后分别将剩余液体更换为7.5 m L新的模拟宫腔液或生理盐水,连续31天,定时用超高效液相-串联质谱系统测量两组样品溶液中LNG的释放量;以化学显色法测定铜离子反应,用紫外分光光度计测定模拟宫腔液中铜离子含量。结果:MAS-IUS优化品在模拟宫腔液及生理盐水中LNG释放量不同时间点均有显著差异（P＜0.001）,相邻时间点LNG释放量具有差异性（P＜0.05）;用分段线性回归法探究15天前及15天后LNG释放规律,结果显示:生理盐水组15天前LNG的释放量随时间延长显著下降（P＜0.01）,释放模型公式为:LR（?g/24h）=2.550-0.058×T;生理盐水组15天后LNG的释放量随时间延长无明显变化（P＞0.05）,LNG释放量基本恒定,平均释放量为1.900±0.110（?g/24 h）;模拟宫腔液组15天前LNG释放量随时间延长显著下降（P＜0.01）,释放模型公式为:LR（?g/24 h）=3.359-0.083×T;模拟宫腔液组15天后的释放量随时间延长无明显差异性（P＞0.05）,15天后LNG释放量基本保持恒定,基本符合零级释放规律,平均释放量为2.440±0.110（?g/24 h）。对两组LNG平均释放量进行差异性比较,具有显著性差异（P＜0.05）,且模拟宫腔液组LNG平均释放量（2.560?g/24 h）高于生理盐水组（1.990?g/24 h）。通过显色反应,证明模拟宫腔液中含铜离子,测得铜离子浓度为0.0176 g/L。结论:MAS-IUS优化品在模拟宫腔液中15天前LNG的释放量随时间延长逐渐下降,15天后LNG释放量基本恒定,平均释放量为2.440±0.110（?g/24 h）,符合零级释放规律;MAS-IUS优化品在模拟宫腔液中释放出铜离子,以铜离子形式存在,且铜离子浓度为0.0176 g/L。

关键词：宫内缓释系统宫内节育器左炔诺孕酮纳米铜释放规律

EMS在位、异位内膜及外周血中survivin的表达及意义

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EMS在位、异位内膜及外周血中survivin的表达及意义

作者：彭晶遵义医学院

学位级别：硕士

目的：研究凋亡抑制因子Survivin在子宫内膜异位症(endolnetriosis, EMS)在位、异位子宫内膜及血清中的表达水平,并与EMS患者外周血中CA-125含量比较,探讨Survivin在EMS发生、发展中的作用及其临床意义。方法：采用免疫组织化学方法(En... 详细信息

目的：研究凋亡抑制因子Survivin在子宫内膜异位症(endolnetriosis, EMS)在位、异位子宫内膜及血清中的表达水平,并与EMS患者外周血中CA-125含量比较,探讨Survivin在EMS发生、发展中的作用及其临床意义。方法：采用免疫组织化学方法(Envision二步法)及酶联免疫(ABC-ELISA)法测量Survivin在80例EMS患者血清、异位内膜及11例在位内膜中的表达水平;并与EMS患者血清中CA-125含量比较,分析二者在EMS患者血清中的表达情况。结果：1. Survivin主要在EMS异位及在位内膜细胞浆及细胞核中均呈阳性表达,在异位内膜组、在位内膜组中含量显著高于正常内膜组(P0.05)。 2.观察组中血清Survivin含量明显高于对照组(P<0.01),且Survivin随AFS临床分期增高而增高,各期间两两比较,差异有统计学意义(P<0.05);血清CA-125观察组高于对照组(P<0.05),尤以Ⅲ、Ⅳ期明显,差异有统计学意义(P<0.05)。 3.血清中Survivin含量与CA-125含量比较呈正相关(r=0.155,,=0.316,γ=0.074,r=0.111,P值均小于0.05)。结论：本研究中Survivin含量在EMS在位、异位内膜组织及外周血中呈高表达,证实survivin与内异症的发生、发展密切相关。提示可利用微创的方法检测EMS患者在位内膜或外周血清中survivin含量,以协助内异症的临床诊断和疗效监测。

关键词：子宫内膜异位症 survivin 在位内膜异位内膜外周血清

聚焦超声与哈西奈德乳膏治疗外阴上皮内非瘤样病变的疗效比较

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聚焦超声与哈西奈德乳膏治疗外阴上皮内非瘤样病变的疗效比较

作者：杨盛红遵义医学院

学位级别：硕士

目的：对比研究聚焦超声与哈西奈德乳膏治疗外阴上皮内非瘤样病变的临床效果,为聚焦超声多中心治疗该病提供临床资料。方法：我院119例临床诊断为外阴上皮内非瘤样病变者随机分为2组,聚焦超声组78例,药物治疗组41例。聚焦超声治疗功率... 详细信息

目的：对比研究聚焦超声与哈西奈德乳膏治疗外阴上皮内非瘤样病变的临床效果,为聚焦超声多中心治疗该病提供临床资料。方法：我院119例临床诊断为外阴上皮内非瘤样病变者随机分为2组,聚焦超声组78例,药物治疗组41例。聚焦超声治疗功率为3.0-4.0 W,采用连续直线扫描方式,治疗时间20-40 min/次,治疗1-2次。药物治疗组用哈西奈德乳膏外涂患处每日早晚各一次,连用3个月。分别比较聚焦超声及哈西奈德乳膏治疗3个月后的疗效。结果：聚焦超声组：临床治愈率23.08%,有效率69.23%,总有效率92.31%。不同病理类型及不同年龄组疗效比较,差异无显著性(P>0.05);不同病程治疗效果比较,差异有统计学意义(P<0.05)。药物治疗组：临床治愈率4.88%,有效率60.98%,总有效率65.85%。两组总有效率比较,聚焦超声治疗组高于药物治疗组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论：与哈西奈德乳膏治疗比较,聚焦超声对外阴上皮内非瘤样病变具有良好的治疗效果。

关键词：聚焦超声哈西奈德乳膏外阴上皮内非瘤样病变治疗效果

LPT联合聚焦超声“无创”诊断与治疗慢性宫颈炎的临床研究

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LPT联合聚焦超声“无创”诊断与治疗慢性宫颈炎的临床研究

作者：徐珂遵义医学院

学位级别：硕士

目的：探讨LPT联合聚焦超声“无创”诊断与治疗慢性宫颈炎的可行性。方法：按LPT处理程序获取宫颈脱落细胞涂片,按TBS细胞分级进行诊断,对改良TBS诊断为正常范围伴体征(WNLws)的病例进行聚焦超声治疗,记录治疗前后病人症状、体征的变化... 详细信息

目的：探讨LPT联合聚焦超声“无创”诊断与治疗慢性宫颈炎的可行性。方法：按LPT处理程序获取宫颈脱落细胞涂片,按TBS细胞分级进行诊断,对改良TBS诊断为正常范围伴体征(WNLws)的病例进行聚焦超声治疗,记录治疗前后病人症状、体征的变化情况及时间、术后并发症及持续时间,观察术后3月不同程度慢性宫颈炎的治疗效果。结果：经LPT检查诊断为WNLws的280例慢性宫颈炎患者接受FU单次治疗后的总临床疗效为98.21%(275/280),其中轻、中度糜烂有效率100%(33/33,132/132),重度糜烂有效率为95.65%(110/115)。结论：LPT联合聚焦超声治疗慢性宫颈炎临床疗效显著,副反应少,治愈后宫颈表层保持完好,尤其适用于未生育妇女宫颈糜烂的治疗,值得临床推广。

关键词：慢性宫颈炎聚焦超声 LPT