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基于Pd/g-C3N4类过氧化物纳米酶检测谷胱甘肽

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分析试验室 2024年第10期 1462-1467页

作者：王逸田柳婉婷曹诗莺马俊凯张爱女湖北医药学院药学院湖北医药学院武当特色中药研究湖北省重点实验室

通过化学还原法将钯纳米粒子（Pd）负载于二维材料g-C3N4表面，构建了一种新型复合纳米酶Pd/g-C3N4。基于其类过氧化物酶活性，在H2O2存在下能够高效催化氧化3,3',5,5'-四甲基联苯胺（TMB），得到的蓝色氧化态产物（oxTMB）在652 nm波... 详细信息

通过化学还原法将钯纳米粒子（Pd）负载于二维材料g-C3N4表面，构建了一种新型复合纳米酶Pd/g-C3N4。基于其类过氧化物酶活性，在H2O2存在下能够高效催化氧化3,3',5,5'-四甲基联苯胺（TMB），得到的蓝色氧化态产物（oxTMB）在652 nm波长处出现特征吸收峰。在该显色体系中加入谷胱甘肽（GSH）后，Pd/g-C3N4催化氧化TMB的反应受到抑制，652 nm处的吸光度减弱且其减弱程度与GSH浓度在一定范围内呈线性关系。基于该原理，构建了一种可通过比色和紫外可见吸收光谱检测GSH的传感平台。Pd/g-C3N4制备方法简便，有望用于分析传感领域。

关键词： Pd/g-C3N4 纳米酶催化谷胱甘肽比色分析

青风藤内生链霉菌SZC001生物合成潜力分析及抗肿瘤天然产物η-rhodomycinone的鉴定

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微生物学报 2024年

作者：秦雨晴田程杨浩蒲洪漆宇昕邹玮江丹丹黄雪霜孙润泽湖南医药学院中药合成生物学研究湖南省重点实验室

【目的】探究青风藤内生链霉菌SZC001的次级代谢产物生物合成潜力，挖掘未知的活性天然产物。【方法】表面消毒法分离SZC001并利用三代联合二代测序获得完整基因组，结合antiSMASH分析评估其天然产物合成潜力；使用4种培养基发酵初筛代... 详细信息

【目的】探究青风藤内生链霉菌SZC001的次级代谢产物生物合成潜力，挖掘未知的活性天然产物。【方法】表面消毒法分离SZC001并利用三代联合二代测序获得完整基因组，结合antiSMASH分析评估其天然产物合成潜力；使用4种培养基发酵初筛代谢谱，通过硅胶柱层析、高效液相制备、高分辨质谱以及核磁共振仪等对化合物进行分离鉴定；利用CCK-8法进行目标化合物的细胞毒活性测定。【结果】鉴定研究菌株为链霉菌SZC001，基因组总长度9 109 166 bp，G+C含量71.08%；antiSMASH显示该菌株共含有31个潜在的生物合成基因簇，有17个基因簇与已知基因簇的相似度小于40%；在4种培养基中可产生多个蒽环类天然产物，经分离鉴定得到含量最高的两个化合物1和2。1为已知化合物ε-rhodomycinone；2为一个新化合物η-rhodomycinone，相对已知化合物α2-rhodomycinone其在C-10位羟基衍生化并且骨架6位羟基变为11位。1与2对2种肿瘤细胞系均有较好的抑制活性，半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration， IC50)为1.6-4.6 μmol/L。【结论】SZC001是一株有挖掘活性天然产物潜力的菌株，从中获得的蒽醌类天然产物具有较好的抗肿瘤活性，后续值得进一步开发和利用。本研究增加了ε-rhodomycinone衍生物的种类，为青风藤内生菌资源的后续开发提供了基础。

关键词：青风藤内生链霉菌天然产物蒽环类化合物 η-rhodomycinone

以EGFR为靶标的非小细胞肺癌中药天然产物抑制剂的虚拟筛选

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中草药 2024年第21期 7230-7237页

作者：肖佳卓董斯睿许毛罗伦吴丰旭湖北医药学院药学院湖北医药学院武当特色中药研究湖北省重点实验室十堰市太和医院湖北医药学院附属医院抗衰老中心

目的从中药天然产物数据库中发现具有新颖骨架靶向表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）治疗非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）的天然产物分子。方法通过使用一致性虚拟筛选方法，从中药天然... 详细信息

目的从中药天然产物数据库中发现具有新颖骨架靶向表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）治疗非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）的天然产物分子。方法通过使用一致性虚拟筛选方法，从中药天然产物化合物库中筛选具有潜力的化合物分子，并进行酶活和细胞活性测试进行验证。结果从由527个小分子组成的中药天然产物化合物库中筛选出了4个在实验中对EGFR有抑制活性的化合物分子，其中化合物异槲皮苷（248）对野生型NSCLC细胞的抑制活性(IC50=0.016μmol/L)优于对照药剂吉非替尼(IC50=0.343μmol/L)，而化合物黄柏苷（376）不仅对野生型NSCLC细胞有抑制活性(IC50=18.725μmol/L)，并且对2种EGFR突变体细胞（L858R-T790M-C797S和del19-T790MC797S）有2倍左右的选择性，具有一定的抗耐药潜力。结论发现了4个对EGFR和NSCLC细胞有抑制活性的中药天然产物分子，为后续的结构改造和进一步得到更高效的EGFR小分子抑制剂提供参考，并为NSCLC药物的研发和临床研究奠定基础。

关键词：表皮生长因子中药天然产物虚拟筛选非小细胞肺癌异懈皮苷黄柏苷

基于CCL2/CCR2信号轴的肿瘤免疫治疗药物的研究进展

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中国药科大学学报 2024年第1期55卷 36-44页

作者：崔珍珍赵一凡孙玉孟佳怡康迪胡立宏南京中医药大学药学院江苏省中药功效物质重点实验室

趋化因子配体2(C-C motif chemokine ligand 2,CCL2)及其受体CCR2与肿瘤的发生、发展密切相关。CCL2/CCR2信号轴通过多种机制促进肿瘤进展，一方面CCL2与肿瘤细胞表面的CCR2结合促进肿瘤的生长/存活和转移；更为重要的是CCL2可以招募多... 详细信息

趋化因子配体2(C-C motif chemokine ligand 2,CCL2)及其受体CCR2与肿瘤的发生、发展密切相关。CCL2/CCR2信号轴通过多种机制促进肿瘤进展，一方面CCL2与肿瘤细胞表面的CCR2结合促进肿瘤的生长/存活和转移；更为重要的是CCL2可以招募多种免疫抑制细胞在肿瘤微环境中聚集，抑制免疫细胞的功能和活性，促进肿瘤进展。本文综述了CCL2/CCR2信号轴以及其在肿瘤及肿瘤微环境中的作用，并重点介绍了靶向CCL2/CCR2信号轴药物的临床研究进展，以期深入并全面了解CCL2/CCR2信号轴在肿瘤进展中的作用机制，开发更有效的肿瘤免疫治疗药物。

关键词： CCL2 CCR2 肿瘤免疫治疗肿瘤微环境免疫抑制细胞

基于网络药理学和组分结构理论探讨独一味抗炎有效成分的协同作用与配伍结构

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中国中药杂志 2024年第13期49卷 3505-3514页

作者：康点点张蓉蓉詹琥珀孙杰玉蒋桂华蒋运斌成都中医药大学药学院西南特色中药资源国家重点实验室四川成都611137 西南大学药学院·中医药学院重庆400715 成都中医药大学民族医药学院四川成都611137

基于网络药理学、组分结构理论剖析独一味抗炎有效成分(环烯醚萜苷类:山栀子苷甲酯、8-O-乙酰山栀子苷甲酯;黄酮苷类:木犀草苷;苯乙醇苷类:连翘酯苷B)的协同作用与配伍结构。网络药理学:利用CTD、SwissTargetPrediction、PharmMapper数... 详细信息

基于网络药理学、组分结构理论剖析独一味抗炎有效成分(环烯醚萜苷类:山栀子苷甲酯、8-O-乙酰山栀子苷甲酯;黄酮苷类:木犀草苷;苯乙醇苷类:连翘酯苷B)的协同作用与配伍结构。网络药理学:利用CTD、SwissTargetPrediction、PharmMapper数据库收集并筛选了各有效成分抗炎靶点;通过CTD、GeneCards数据库获得炎症相关靶点;利用Venny 2.1、STRING和Cytoscape 3.9.1得到核心靶点;通过DAVID数据库对核心靶点进行GO功能注释及KEGG通路富集分析。组分结构:基于二甲苯致小鼠耳肿胀模型和均匀设计法,以炎症因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)为因变量,通过二次多项式逐步回归,探究独一味抗炎成分间的配伍关系,并进行体内药效实验验证。网络药理学研究表明,与单一组分相比,3类组分共同作用可通过更多生物过程、通路、靶点协同发挥抗炎作用。组分结构研究表明,环烯醚萜苷组分内(山栀子苷甲酯∶8-O-乙酰山栀子苷甲酯)最佳结构比例为1.21∶1;3类组分间(环烯醚萜苷∶苯乙醇苷∶黄酮苷类)最佳结构比例为4.8∶1.6∶1。综上,独一味各抗炎成分可协同增效,且成分间存在最优配伍比例关系,为独一味内在质量控制提供了新的实验依据。

关键词：独一味抗炎有效组分网络药理学均匀设计配伍比例

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根皮素通过抑制FAK改善肾小管间质纤维化

华中科技大学学报（医学版） 2024年第2期53卷 181-189页

作者：程新瑶曹文洁钱永帅刘丽余惠凡王晓菲方梦淇李飞湖北医药学院药学院武当特色中药研究湖北省重点实验室湖北医药学院生物医药研究院十堰442000

目的探究根皮素能否通过抑制黏着斑激酶(FAK)改善肾小管间质纤维化。方法肾小管上皮细胞NRK-52E经TGF-β1(10 ng/mL)诱导建立肾纤维化细胞模型,并构建单侧输尿管梗阻(UUO)肾间质纤维化小鼠模型。通过免疫荧光及Western blot法检测细胞... 详细信息

目的探究根皮素能否通过抑制黏着斑激酶(FAK)改善肾小管间质纤维化。方法肾小管上皮细胞NRK-52E经TGF-β1(10 ng/mL)诱导建立肾纤维化细胞模型,并构建单侧输尿管梗阻(UUO)肾间质纤维化小鼠模型。通过免疫荧光及Western blot法检测细胞及小鼠肾脏组织中α-SMA、FN的蛋白表达水平,明确根皮素体内外抗肾纤维化作用;检测实验小鼠血清中肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平,分析根皮素的肾保护作用;以苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色观察根皮素对UUO小鼠肾脏病理学改变和胶原纤维沉积的影响;Western blot检测TGF-β1诱导的NRK-52E细胞和UUO小鼠肾组织中FAK、p-FAK的蛋白表达水平;通过分子对接预测根皮素与FAK蛋白的潜在结合模式和结合能力;使用FAK抑制剂PND-1186,探究根皮素改善肾间质纤维化的作用机制。结果根皮素可逆转TGF-β1所致的肾小管上皮细胞及UUO小鼠肾组织中α-SMA、FN的蛋白表达水平升高,且显著降低UUO小鼠血清中Cr、BUN水平,改善UUO小鼠肾小管扩张、炎性细胞浸润及间质胶原沉积;根皮素可以显著抑制UUO小鼠肾组织中FAK、p-FAK蛋白的表达水平,分子对接提示根皮素与FAK蛋白之间具有良好相互作用。根皮素与PND-1186均可改善TGF-β1诱导的NRK-52E细胞纤维化。结论根皮素通过抑制FAK信号通路在体内外发挥抗肾间质纤维化作用。

关键词：根皮素单侧输尿管梗阻肾保护肾间质纤维化黏着斑激酶

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基于miRNA测序探究重楼皂苷Ⅰ抗炎的关键因子

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中国医院药学杂志 2024年

作者：郑星宇黄慧敏李志浩黄慧琳武伦刘经健杨旺柯昌虎李鹏湖北医药学院药学院湖北医药学院附属国药东风总医院药学部武当特色中药研究湖北省重点实验室

目的：基于微小RNA（microRNA，miRNA）高通量测序技术，旨在探索重楼皂苷Ⅰ（polyphyllin Ⅰ，PPⅠ）对脂多糖（lipopolysaccharide， LPS）诱导的人髓系白血病单核细胞（THP-1）巨噬细胞炎症响应中关键miRNA的作用和调控机制。方法：... 详细信息

目的：基于微小RNA（microRNA，miRNA）高通量测序技术，旨在探索重楼皂苷Ⅰ（polyphyllin Ⅰ，PPⅠ）对脂多糖（lipopolysaccharide， LPS）诱导的人髓系白血病单核细胞（THP-1）巨噬细胞炎症响应中关键miRNA的作用和调控机制。方法：LPS刺激构建THP-1巨噬细胞炎症模型；CCK-8法检测PPⅠ对THP-1巨噬细胞活性的影响；ELISA试剂盒检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）的释放。对PPⅠ给药组和未给药模型组进行miRNA测序；实时荧光定量PCR（qRT-PCR）对6个差异miRNA进行验证；加权共基因表达网络分析确定最相关的共表达模块；LASSO回归分析进一步确定关键miRNAs；通过GO和KEGG分析差异miRNAs的功能和其潜在抗炎意义。结果：PPⅠ 1～8 μmol·L-1质量浓度范围内对THP-1巨噬细胞无毒性，2、4、6 μmol·L-1PPⅠ处理LPS诱导的THP-1细胞后，TNF-α、IL-6的分泌量显著下降。共鉴定出836个差异表达miRNAs，其中398个miRNA上调，438个miRNA下调；qRT-PCR结果显示，miR-11401、miR-372-3p、miR-4494、miR-8084、miR-445-3p、miR-6744-3p表达与miRNA测序结果一致。加权共基因表达网络分析共获得16个共表达模块，其中暗橘色共表达模块与PPⅠ干预治疗LPS诱导的巨噬细胞炎症呈显著负相关（r＝-0.99，P＜0.01）；通过LASSO回归分析筛选到4个miRNA（miR-6881-3p、miR-5583-3p、miR-570-3p和miR-4757-3p）。差异miRNA靶基因主要与炎症代谢通路相关。结论：重楼皂苷Ⅰ通过调节多种miRNA在治疗LPS诱导的THP-1巨噬细胞炎症中发挥作用。

关键词：重楼皂苷Ⅰ THP-1细胞 miRNA测序炎症

苦参总黄酮对醋酸铅诱导小鼠睾丸间质细胞氧化应激的改善作用及对Keap1/Nrf2信号通路的影响

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吉林大学学报（医学版） 2024年第2期50卷 320-325页

作者：刘玥欣来永巍王艳春徐博路倩安英任旷范红艳吉林医药学院药学院药理学教研室吉林吉林132013 吉林医药学院基础医学院机能实验室吉林吉林132013

目的:观察苦参总黄酮(SF)对醋酸铅(LA)诱导的小鼠睾丸间质细胞TM3氧化应激的改善作用及其对KELCH状ECH相关蛋白1(Keap1)/细胞中核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的影响,探讨SF改善由LA诱导的TM3细胞氧化应激的相关作用机制。方法:利用... 详细信息

目的:观察苦参总黄酮(SF)对醋酸铅(LA)诱导的小鼠睾丸间质细胞TM3氧化应激的改善作用及其对KELCH状ECH相关蛋白1(Keap1)/细胞中核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的影响,探讨SF改善由LA诱导的TM3细胞氧化应激的相关作用机制。方法:利用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度(0、10、20、50和80µmol·L^(-1))LA和不同浓度(0、12.5、25.0、50.0和80.0 mg·L^(-1))SF分别干预24 h后的TM3细胞存活率;将TM3细胞随机分为空白对照组、LA组、LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组。除空白对照组外,其他各组均采用50µmol·L^(-1)LA诱导TM3细胞24 h建立TM3细胞氧化应激模型,其中LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组TM3细胞再分别给予12.5、25.0和50.0 mg·L^(-1)SF。利用MTT法检测TM3细胞存活率;WST-1法和硫代巴比妥酸(TBA)法检测TM3细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平;Western blotting法检测Nrf2、Keap1和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Caspase-9)蛋白表达水平。结果:MTT法检测,与0µmol·L^(-1)LA组比较,10、20、50和80µmol·L^(-1)LA组TM3细胞存活率明显降低(P<0.01);与0 mg·L^(-1)SF组比较,12.5、25.0、50.0和80.0 mg·L^(-1)SF组TM3细胞存活率明显降低(P<0.05或P<0.01);与LA组比较,LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组TM3细胞存活率明显升高(P<0.01);WST-1法和TBA法检测,与LA组比较,LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组TM3细胞中SOD活性明显升高(P<0.01),MDA水平明显降低(P<0.01);Western blotting法检测,与LA组比较,LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组TM3细胞中Nrf2蛋白表达水平明显升高(P<0.01),Keap1和Caspase-9蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论:SF对LA诱导TM3细胞氧化应激具有一定改善作用,并可降低TM3细胞中Keap1蛋白表达水平,升高TM3细胞中Nrf2蛋白表达水平。

关键词：苦参总黄酮醋酸铅睾丸间质细胞氧化应激 KELCH状ECH相关蛋白1 核因子E2相关因子2

美洲大蠊糖蛋白对2种益生菌生长及其代谢产物的影响

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食品工业科技 2024年第14期45卷 139-146页

作者：李开伶王宝宇李维俊张敬宇肖培云杨永寿云南省昆虫生物医药研发重点实验室云南大理671000 大理大学药学院云南大理671000

目的:本实验旨在探究美洲大蠊糖蛋白(PAG)对植物乳杆菌和青春双歧杆菌生长及其代谢产物的影响。方法:在含不同浓度PAG的培养基(MRS培养基中PAG浓度分别为0.5、1.0、2.0、4.0 mg/mL;TPY培养基PAG浓度分别为1.0、2.0、4.0、8.0 mg/mL)中... 详细信息

目的:本实验旨在探究美洲大蠊糖蛋白(PAG)对植物乳杆菌和青春双歧杆菌生长及其代谢产物的影响。方法:在含不同浓度PAG的培养基(MRS培养基中PAG浓度分别为0.5、1.0、2.0、4.0 mg/mL;TPY培养基PAG浓度分别为1.0、2.0、4.0、8.0 mg/mL)中培养有益菌,并以菊粉为阳性对照,测定菌液的OD600值、pH以及代谢产物乳酸、短链脂肪酸(SCFAs,即乙酸、丙酸和丁酸)的含量。结果:PAG添加量达1.0 mg/mL时,促植物乳杆菌生长达到最佳,而青春双歧杆菌生长达到最佳时PAG浓度为2.0 mg/mL。添加PAG;1.0 mg/mL)的植物乳杆菌菌液的OD600值、乳酸和SCFAs产量较同浓度菊粉升高,而pH显著(P<0.05)降低。添加PAG(2.0 mg/mL)的青春双歧杆菌菌液的OD600值、丙酸和丁酸产量较同浓度菊粉升高,乳酸产量12 h优于菊粉,乙酸产量24 h优于菊粉,而pH降低,提示PAG促青春双歧杆菌产乳酸和SCFAs的效果与菊粉不相同。结论:PAG能够促进植物乳杆菌和青春双歧杆菌的增殖和有机酸量的生成,效果优于菊粉。

关键词：美洲大蠊糖蛋白植物乳杆菌青春双歧杆菌代谢产物

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