根皮素通过抑制FAK改善肾小管间质纤维化

作     者：程新瑶 曹文洁 钱永帅 刘丽 余惠凡 王晓菲 方梦淇 李飞 Cheng Xinyao;Cao Wenjie;Qian Yongshuai

作者机构：湖北医药学院药学院 武当特色中药研究湖北省重点实验室 湖北医药学院生物医药研究院十堰442000 

出 版 物：《华中科技大学学报（医学版）》 (Acta Medicinae Universitatis Scientiae et Technologiae Huazhong)

年 卷 期：2024年第53卷第2期

页      面：181-189页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

基　　金：湖北省卫生健康委青年人才项目(No.WJ2021Q010) 湖北省教育厅重点项目(No.D20192101) 湖北医药学院研究生科技创新项目(No.YC2023067) 湖北医药学院“十四五”湖北省高等学校优势特色学科群(生物与医药)资助项目(No.2022BMXKQT1) 湖北医药学院大学生创新创业训练计划(No.X202310929009,No.X202310929010) 

主　　题：根皮素 单侧输尿管梗阻 肾保护 肾间质纤维化 黏着斑激酶 

摘      要：目的探究根皮素能否通过抑制黏着斑激酶(FAK)改善肾小管间质纤维化。方法肾小管上皮细胞NRK-52E经TGF-β1(10 ng/mL)诱导建立肾纤维化细胞模型,并构建单侧输尿管梗阻(UUO)肾间质纤维化小鼠模型。通过免疫荧光及Western blot法检测细胞及小鼠肾脏组织中α-SMA、FN的蛋白表达水平,明确根皮素体内外抗肾纤维化作用;检测实验小鼠血清中肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平,分析根皮素的肾保护作用;以苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色观察根皮素对UUO小鼠肾脏病理学改变和胶原纤维沉积的影响;Western blot检测TGF-β1诱导的NRK-52E细胞和UUO小鼠肾组织中FAK、p-FAK的蛋白表达水平;通过分子对接预测根皮素与FAK蛋白的潜在结合模式和结合能力;使用FAK抑制剂PND-1186,探究根皮素改善肾间质纤维化的作用机制。结果根皮素可逆转TGF-β1所致的肾小管上皮细胞及UUO小鼠肾组织中α-SMA、FN的蛋白表达水平升高,且显著降低UUO小鼠血清中Cr、BUN水平,改善UUO小鼠肾小管扩张、炎性细胞浸润及间质胶原沉积;根皮素可以显著抑制UUO小鼠肾组织中FAK、p-FAK蛋白的表达水平,分子对接提示根皮素与FAK蛋白之间具有良好相互作用。根皮素与PND-1186均可改善TGF-β1诱导的NRK-52E细胞纤维化。结论根皮素通过抑制FAK信号通路在体内外发挥抗肾间质纤维化作用。