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天然溴化:酶、底物和溴化机制

微生物前沿 2024年第2期13卷 100-118页

作者：胡文达郑哲麟何亚文上海交通大学生命科学技术学院微生物代谢国家重点实验室教育部代谢与发育科学国际合作联合实验室上海

溴在自然界主要以可溶或不可溶的溴化物形式存在,溴化物在农业、化工、医药等领域具有广泛的应用潜力。动植物和微生物也可以利用溴化酶合成天然有机溴化物。随着越来越多的溴化酶被发现,溴化现象被认为是生物合成与代谢途径中的修饰策... 详细信息

溴在自然界主要以可溶或不可溶的溴化物形式存在,溴化物在农业、化工、医药等领域具有广泛的应用潜力。动植物和微生物也可以利用溴化酶合成天然有机溴化物。随着越来越多的溴化酶被发现,溴化现象被认为是生物合成与代谢途径中的修饰策略之一。本文从以下五个方面综述了天然溴化研究领域的最新进展,包括:(1) 溴化物的分布;(2) 天然溴化物的生物学功能及其对生态环境的影响;(3) 天然溴化物的临床应用潜力;(4) 溴化酶的分类与作用机理;(5) 近期报道的溴化酶。最后,讨论了溴化酶研究领域未来急需解决的科学问题。

关键词：溴天然有机溴化物溴化酶溴过氧化酶黄素依赖型溴化酶

葛根芩连汤对2型糖尿病大鼠脂肪组织胆固醇及合成关键酶基因表达和甲基化水平影响的研究

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中华中医药学刊 2024年

作者：李紫薇刘欣宜杨灵坤张蒙雨李昊天陈嫦娥章常华彭淑红江西中医药大学江西省中医病因生物学重点实验室

目的探讨葛根芩连汤(GegenQinlianDecoction，GQD)对2型糖尿病（Type2diabetesmellitus，T2DM）大鼠腹股沟脂肪组织（inguinalwhiteadiposetissue，iWAT）及附睾脂肪组织(epididymalwhiteadiposetissue，eWAT)胆固醇水平的影响，并从胆固醇合成关键酶的DNA甲基化角度探讨可能的机制。方法实验分为5组：对照组(CON)、2型糖尿病组(T2DM)、二甲双胍组（MET）、GQD低、高剂量组（GQDL、GQDH)，灌胃给药14周。分光光度计法测定组织胆固醇水平，WB、QPCR和BSP分别用于测定基因蛋白表达、mRNA表达和甲基化水平。结果MET和GQDH均能显著逆转T2DM中iWAT和eWAT胆固醇水平的降低；GQDL能有效逆转eWAT胆固醇水平的降低；GQDL和GQDH能够有效升高iWAT和eWAT中胆固醇合成关键酶HMGCR蛋白表达水平，但未有效调节SQLE蛋白表达水平；给药组均未有效升高胆固醇合成关键酶基因mRNA水平；Hmgcr基因在iWAT和eWAT中的CAs、eWAT中的CG3甲基化与血清FBG、GSP或胰岛素有相关性，而模型组eWAT的CG3甲基化显著降低，MET组eWAT的CAs甲基化显著升高。结论GQD能有效逆转T2DM大鼠脂肪组织胆固醇水平，可能不是通过调节胆固醇合成来实现。但GQD可能通过对HMGCR的转录后调控促进甲羟戊酸途径的非甾醇分支代谢。脂肪组织Hmgcr基因的CAs和CG3位点低甲基化可能与糖尿病发生密切相关。

关键词：胆固醇合成 DNA甲基化 2型糖尿病脂肪组织

灰毡毛忍冬花器官发育相关LmSOC1基因克隆及表达分析

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中南林业科技大学学报 2024年第5期44卷 181-190页

作者：龙丽君马英姿曾慧杰李昌珠张岗刘思思李依民湖南省林业科学院经济林研究所湖南长沙410004 中南林业科技大学生命科学与技术学院湖南长沙410004 陕西中医药大学陕西省中医药管理局“秦药”研发重点实验室陕西西安712046 陕西中医药大学省部共建特色秦药资源研究开发国家重点实验室(培育)陕西咸阳712083

【目的】克隆灰毡毛忍冬MADS-box家族基因SOC1(SUPPRESSOR OF OVEREXPRESSION OF CO1),对其进行生物信息学和表达模式分析,为探究灰毡毛忍冬花冠不开放机制奠定理论基础。【方法】基于花蕾型灰毡毛忍冬转录组数据,筛选到开花调控基因LmS... 详细信息

【目的】克隆灰毡毛忍冬MADS-box家族基因SOC1(SUPPRESSOR OF OVEREXPRESSION OF CO1),对其进行生物信息学和表达模式分析,为探究灰毡毛忍冬花冠不开放机制奠定理论基础。【方法】基于花蕾型灰毡毛忍冬转录组数据,筛选到开花调控基因LmSOC1的Unigene序列并克隆全长cDNA序列,通过生物信息学分析和实时荧光定量PCR技术分析编码蛋白特性和不同品种中LmSOC1基因的表达特异性,最后将LmSOC1基因插入到原核表达质粒载体pTOPO-D1中,并在表达宿主BL21(DE3)中进行蛋白表达。【结果】LmSOC1基因包含645bp的ORF区,LmSOC1蛋白不含信号肽、无跨膜区,为稳定的亲水性蛋白。系统进化树分析表明,LmSOC1蛋白与黄花蒿、榴莲、可可等的SOC1蛋白亲缘关系更近。实时荧光定量PCR分析表明,在2个花蕾型灰毡毛忍冬品种的花蕾和叶片中均检测到LmSOC1基因的表达,而叶片中表达量明显高于花蕾。同时,在早期花蕾中LmSOC1基因的表达量高于晚期花蕾,在‘金翠蕾’品种中这一表达差异极显著(P生物学功能奠定了基础。

关键词：灰毡毛忍冬 MADS-box LmSOC1 基因克隆表达分析原核表达

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小檗碱衍生物的合成及抗菌活性研究

中国海洋大学学报（自然科学版） 2024年第2期54卷 106-113页

作者：葛莲程珊吕钦万升标中国海洋大学医药学院海洋药物教育部重点实验室山东青岛266003 青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋药物与生物制品功能实验室山东青岛266237

小檗碱具有广谱抗菌活性,但抑菌效果不强。本文对小檗碱进行结构改造,获得了具有更高抗菌活性的小檗碱衍生物。将经典的FtsZ(Filamenting temperature-sensitive mutant Z)抑制剂PC190723衍生物的苯并噻唑类活性片段引入到小檗碱中,对... 详细信息

小檗碱具有广谱抗菌活性,但抑菌效果不强。本文对小檗碱进行结构改造,获得了具有更高抗菌活性的小檗碱衍生物。将经典的FtsZ(Filamenting temperature-sensitive mutant Z)抑制剂PC190723衍生物的苯并噻唑类活性片段引入到小檗碱中,对小檗碱进行结构改造并对其进行体外抗菌活性实验。合成出了10个小檗碱衍生物,其中有5个化合物对金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抗菌活性明显优于小檗碱。

关键词：小檗碱苯并噻唑 FtsZ抑制剂结构改造抗菌活性

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基于总量统计矩分析法与分子连接性指数探讨枳实、枳壳“同源异效”的物质基础

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中国实验方剂学杂志 2024年第3期30卷 161-168页

作者：袁筱吴月峰李世雄刘有志于芷芩贺福元周晋湖南中医药大学药学院中药成药性与制剂制备湖南省重点实验室中医药超分子机理与数理特征化实验室长沙410208

目的:基于总量统计矩分析法与分子连接性指数(MCI)探讨枳实与枳壳“同源异效”的物质基础。方法:查阅国内外相关文献和中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP),建立枳实、枳壳的化学成分数据库,建立其超高效液相色谱法(UPLC)指纹图谱,... 详细信息

目的:基于总量统计矩分析法与分子连接性指数(MCI)探讨枳实与枳壳“同源异效”的物质基础。方法:查阅国内外相关文献和中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP),建立枳实、枳壳的化学成分数据库,建立其超高效液相色谱法(UPLC)指纹图谱,计算指纹图谱总量统计矩及其相似度参数;根据MCI将枳实、枳壳所有成分划分为不同的成分群;计算枳实、枳壳共有成分群0~8阶(^(0)χ~^(8)χ)MCI平均值。结果:枳实与枳壳的总量零阶矩(AUCT)分别为(10.57±2.45)×10^(6)、(5.09±0.89)×10^(6)μV·s,总量一阶矩(MCRT_(T))分别为(11.57±1.58)、(12.10±1.29)min,总量二阶矩(VCRTT)分别为(24.49±2.30)、(26.49±2.54)min^(2),表明枳实与枳壳定性、定量参数都存在明显差异;筛选出新橙皮苷、橙皮苷、芸香柚皮苷等相似度高的成分作为枳实、枳壳共有潜在药效成分;筛选出枳实中非共有成分alysifolinone、欧前胡素等,枳壳中非共有成分新北美圣草苷、异樱花苷等相似度高的作为枳实、枳壳各自潜在“异效”成分;将枳实与枳壳成分群划分为六类,枳实、枳壳成分群与总成分之间的相似度分别在0.872~0.979、0.918~0.997,枳实与枳壳的生物碱类成分^(0)χ~^(8)χMCI平均值分别为3.65、3.14,黄酮类成分^(0)χ~^(8)χMCI平均值均为8.47,挥发油类成分^(0)χ~^(8)χMCI平均值分别为2.71、3.48,表明枳实与枳壳化学成分(群)MCI存在一定差异。结论:枳实与枳壳化学成分(群)不仅是含量与种类的差异,其结构特点及构效关系也存在差异,可为深入阐释枳实、枳壳“同源异效”的科学内涵提供依据。

关键词：枳实枳壳同源异效分子连接性指数(MCI) 总量统计矩指纹图谱超高效液相色谱法(UPLC) 物质基础

低能离子注入诱变法选育新硫肽类抗生素166A高产菌株

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中国抗生素杂志 2024年第9期 995-1003页

作者：戴剑漉李艳青李欣蒋忠科赫卫清孙承航中国医学科学院&北京协和医学院医药生物技术研究所“天然药物活性物质与功能”国家重点实验室中国医学科学院&北京协和医学院医药生物技术研究所国家卫生健康委员会抗生素生物工程重点实验室中国医学科学院&北京协和医学院医药生物技术研究所微生物化学研究室和抗感染药物研究北京市重点实验室广东医科大学南方海洋科学与工程广东省实验室

目的为进一步提高产量，以小单孢菌Micromonospora ***166-MU1为出发菌株，采用低能离子注入技术，研究不同离子注入参数对菌株存活率、正负突变率的影响，通过突变株抑菌活性变势参数分析，初步探讨N+离子注入对166A生产菌所产生的诱... 详细信息

目的为进一步提高产量，以小单孢菌Micromonospora ***166-MU1为出发菌株，采用低能离子注入技术，研究不同离子注入参数对菌株存活率、正负突变率的影响，通过突变株抑菌活性变势参数分析，初步探讨N+离子注入对166A生产菌所产生的诱变效果，并结合卡那霉素抗性筛选及牛津杯固体发酵高通量筛选，获得高产菌株。方法利用低能N+离子注入技术对出发菌株TMD166-MU1的孢子进行辐照诱变，以卡那霉素耐受性为选择压力，不同诱变条件处理的菌悬液涂布在含有卡那霉素培养基平板上培养后获得单菌落，并以牛津杯固体发酵高通量筛选方法进行高产菌株初筛，之后对高产菌株进行摇瓶复筛，利用高效液相法检测突变株摇瓶发酵的化学效价。结果通过研究30和60 keV能量下不同注入剂量与小单孢菌正突变率的生物学效应关系，确定了在注入能量为30 keV、注入剂量4×1013ions/cm2、卡那霉素抗性筛选浓度为6 mg/L条件下，可获得最高达36.33%的正突变率。复筛效价是出发菌株1.5倍以上的有4株，其中突变株IK-3的166A产量是菌株TMD166-MU1的1.8倍。结论采用低能N+离子注入诱变方式，再结合抗生素抗性筛选及牛津杯固体发酵高通量筛选的集成方法能简单、高效地获得166A高产突变菌株。

关键词：新硫肽类抗生素166A 低能离子注入诱变抗生素抗性筛选高通量筛选高产菌株

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妇产科医生对复方短效口服避孕药的雌激素剂量和服药方案的认知调查研究

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中国妇幼健康研究 2024年第8期35卷 14-23页

作者：武冰雪张妍丁璟车焱国家卫生健康委员会计划生育药具重点实验室/上海生殖健康药具工程技术研究中心/上海市生物医药技术研究院上海200237 国家卫生健康委员会计划生育药具重点实验室/上海生殖健康药具工程技术研究中心/上海市生物医药技术研究院/复旦大学公共卫生学院上海200237

目的了解当前我国妇产科医生对不同种类复方短效口服避孕药(COC)服药方案及其雌激素剂量的认识和适应症应用情况,以期为临床个体化用药决策提供参考。方法2022年8月至12月在全国20个省、自治区、直辖市的155家医院邀请妇产科医生进行问... 详细信息

目的了解当前我国妇产科医生对不同种类复方短效口服避孕药(COC)服药方案及其雌激素剂量的认识和适应症应用情况,以期为临床个体化用药决策提供参考。方法2022年8月至12月在全国20个省、自治区、直辖市的155家医院邀请妇产科医生进行问卷调查,了解其对国内目前五种常用COC的雌激素剂量和服药方案的认知及适应症应用情况。采用卡方检验、Bonferroni法、Crame' s V系数、雷达图等方法对数据进行统计分析及归纳总结。结果向653名妇产科医生发放调查问卷,回收有效问卷650份,回收率99.54%。妇产科医生对国内目前五种常用COC的知晓率差别较大,其中以屈螺酮炔雌醇片(Ⅱ)(20μg/片,87.69%;24/4方案,84.77%)知晓率最高,去氧孕烯炔雌醇片(20μg/片,45.69%;21/7方案,83.54%)最低。对于治疗痤疮、经前焦虑障碍、易怒、抑郁、经前综合征、多毛症和多囊卵巢综合征,28.77%~31.69%的妇产科医生选择24/4方案,37.54%~47.85%的妇产科医生选择雌激素剂量20μg/片的COC;其中对改善易怒症状(χ^(2)=9.403,P=0.009)方面,硕士及以上妇产科医生选择选择24/4方案的比例高于本科及以下学历者,差异有统计学意义。在改善月经周期规律性、治疗月经过多、经期周期控制效果方面,49.38%~50.00%的妇产科医生选择两方案效果相似,44.46%~56.31%的妇产科医生选择两剂量效果相似;其中在改善月经周期规律性(χ^(2)=8.402,P=0.015)和治疗月经过多(χ^(2)=6.451,P=0.040)方面,选择两剂量相似的副主任医师及以上的比例高于主治医师及以下者,差异均有统计学意义。妇产科医生对不同雌激素剂量和服药方案的选择呈弱相关(0.2

关键词：复方短效口服避孕药雌激素孕激素服药方案妇产科医生

基于“辨状论质”理论研究黄柏饮片外观性状与内在质量相关性

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药学学报 2024年第7期59卷 2117-2125页

作者：陆美龙张倩谷丽华杨莉王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

黄柏传统评价以“肉厚色黄者”为佳,但该性状特征的科学内涵尚未被阐释。本研究基于“辨状论质”理论,首先采用游标卡尺和全自动测色色差仪对黄柏饮片厚度和粉末颜色进行量化,同时采用高效液相色谱(HPLC)法建立黄柏饮片特征图谱,共表征1... 详细信息

黄柏传统评价以“肉厚色黄者”为佳,但该性状特征的科学内涵尚未被阐释。本研究基于“辨状论质”理论,首先采用游标卡尺和全自动测色色差仪对黄柏饮片厚度和粉末颜色进行量化,同时采用高效液相色谱(HPLC)法建立黄柏饮片特征图谱,共表征12个特征峰,将外观性状指标与水分、醇溶性浸出物以及特征成分进行Pearson相关性分析、主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)和方差分析(ANOVA),探讨黄柏饮片外观性状(包括厚度和粉末三色空间值L^(*)亮度、a^(*)红绿、b^(*)黄蓝)与内在成分及相对含量之间的相关性。结果表明黄柏的外观性状特征(厚度和颜色)与黄柏中的化学成分(生物碱和酚酸)的含量呈显著相关性。基于分析结果,对5种代表性成分进行含量测定,5种成分含量总和在厚度≥4 mm(13.15%±2.25%)和鲜黄色样品(12.14%±2.00%)中的含量显著高于厚度<4 mm(10.89%±1.41%)和暗黄色黄柏样品(10.32%±2.41%),将外观性状与成分含量建立“性状-质量-含量”对应关系。研究结果证实黄柏饮片厚度和颜色2个主要外观性状指标可作为判断其品质的依据,一定程度上诠释了黄柏传统评价“肉厚色黄者为佳”的科学内涵,同时为黄柏饮片商品等级标准的建立积累了数据和基础。

关键词：黄柏外观性状异喹啉生物碱阿魏酰奎宁酸含量测定相关分析

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基于环境DNA技术的黑潮-亲潮交汇区夏季鱼类物种多样性分析

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上海海洋大学学报 2024年第4期33卷 911-926页

作者：梁绪虹王丛丛刘洋俞晔伟宋成辉上海海洋大学海洋生物资源与管理学院上海201306 大洋渔业资源可持续开发教育部重点实验室上海201306 国家远洋渔业工程技术研究中心上海201306 农业农村部大洋渔业可持续利用重点实验室上海201306 临港新片区海洋生物医药科技创新型平台上海201306

西北太平洋黑潮-亲潮交汇区是世界上最高产的渔区之一,鱼类资源众多。为了解交汇区鱼类群落的生物多样性,保护和合理开发利用该海域的渔业资源,利用环境DNA(Environmental DNA,eDNA)技术对夏季西北太平洋黑潮与亲潮交汇区进行鱼类多样... 详细信息

西北太平洋黑潮-亲潮交汇区是世界上最高产的渔区之一,鱼类资源众多。为了解交汇区鱼类群落的生物多样性,保护和合理开发利用该海域的渔业资源,利用环境DNA(Environmental DNA,eDNA)技术对夏季西北太平洋黑潮与亲潮交汇区进行鱼类多样性分析,通过22个站点水样的采集、DNA提取及测序,共检测出22目30科44属51种海水鱼类,其中灯笼鱼科种类最多,共17种,占鱼类物种总数的33.33%。此外,相对丰度较高的物种为宽尾臂灯鱼、西钻光鱼、日本背灯鱼、远东拟沙丁鱼、斑点多纪鲀、瓦氏角灯鱼、斑头六线鱼、日本鲭、日本海、黑潮眶灯鱼。站点间Alpha多样性差异较大,总体上呈现高纬度断面生物多样性低,低纬度断面生物多样性高的特点。冗余分析表明,影响交汇区鱼类群落结构的主要环境因子为溶解氧。研究证明了eDNA技术用于监测西北太平洋黑潮-亲潮交汇区鱼类多样性及其空间分布的可行性。

关键词：环境DNA 黑潮-亲潮交汇区鱼类生物多样性