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滋水清肝饮对脂多糖诱导的抑郁小鼠的改善作用及对ERK/NF-κB通路的影响

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药物评价研究 2024年第5期47卷 1042-1050页

作者：韩朝军袁诗宇曹珊珊汪丹史磊磊刘继平史永恒陕西中医药大学药学院陕西咸阳712046 陕西中医药大学附属第二医院药剂科陕西咸阳712046 陕西省中医药管理局中药药效机制与物质基础重点研究室陕西咸阳712046

目的探讨滋水清肝饮在应用脂多糖(LPS)制备的小鼠抑郁模型中的抗抑郁作用和潜在机制。方法选取60只小鼠按随机数字表随机分为6组:对照组、模型组、盐酸氟西汀组(阳性药,10 mg·kg^(−1))和滋水清肝饮低、中、高剂量(8.835、17.670、35.34... 详细信息

目的探讨滋水清肝饮在应用脂多糖(LPS)制备的小鼠抑郁模型中的抗抑郁作用和潜在机制。方法选取60只小鼠按随机数字表随机分为6组:对照组、模型组、盐酸氟西汀组(阳性药,10 mg·kg^(−1))和滋水清肝饮低、中、高剂量(8.835、17.670、35.340 g·kg^(−1))组,给药14 d后,除对照组ip等量0.9%的氯化钠溶液外,其余各组均ip LPS(0.83 mg·kg^(−1)),LPS注射结束24 h后,称小鼠质量,并进行悬尾实验和强迫游泳实验;通过苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠海马形态学改变;免疫荧光染色检测海马小胶质细胞标志物离子化钙结合适配分子1(Iba-1)荧光强度;试剂盒法检测小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、5-羟色胺(5-HT)水平及小鼠海马吲哚胺2,3-双加氧酶1(IDO1)、犬尿氨酸(KYN)、5-HT水平;Western blotting法检测小鼠海马组织中p-核因子κB(NF-κB)、p-细胞外调节蛋白激酶(ERK)蛋白表达。结果与模型组相比,滋水清肝饮组小鼠体质量均有所回升(P机制可能与抑制ERK/NF-κB通路、降低IDO1水平、改善神经炎症有关。

关键词：滋水清肝饮抑郁症脂多糖吲哚胺2,3-双加氧酶1(IDO1) 5-羟色胺(5-HT) ERK/NF-κB信号通路

基于5-LOX/LTB4信号通路探讨PM对大鼠脑肾损伤的机制研究

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中药药理与临床 2024年

作者：赵安东孙欠欠张嘉豪呼田周雪薇刘继平王川王斌陕西中医药大学中医药脑健康产业陕西省高校工程研究中心陕西省中医药管理局中药药效机制与物质基础重点研究室

目的：“脑肾相关”理论认为，脑与肾生理相系，经络相通，阴阳互应，从“脑肾相关”理论出发，本研究旨在探讨气道吸入不同剂量PM2.5混悬液是否通过激活5-LOX/LTB4通路对大鼠脑、肾组织造成损伤，为中医脑肾相关理论生物学基础和中药... 详细信息

目的：“脑肾相关”理论认为，脑与肾生理相系，经络相通，阴阳互应，从“脑肾相关”理论出发，本研究旨在探讨气道吸入不同剂量PM2.5混悬液是否通过激活5-LOX/LTB4通路对大鼠脑、肾组织造成损伤，为中医脑肾相关理论生物学基础和中药相关研究提供参考。方法：SD大鼠随机分为正常对照组、PM2.57.5、15、30 mg/kg染毒组，每组6只。染毒组通过气管滴注相应剂量混悬液1 mL/kg，6天滴注1次，持续3个月，对照组滴注等量生理盐水，滴注期间每日记录大鼠生理状况。末次滴注完成后，禁食12 h，取材后，以肾脏组织病理切片、24 h尿量、尿常规及血清肾功能指标BUN、SCR反应肾脏功能损伤情况；以脑组织病理切片、脑血流量反应脑组织损伤情况；以血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10、TGF-β1表达水平及脑、肾组织5-LOX蛋白和LTB4表达情况反应PM2.5是否可引发全身炎症反应并激活5-LOX/LTB4信号通路对大鼠脑、肾组织造成炎性损伤。结果：滴注不同剂量PM2.5混悬液后，模型组大鼠毛色均出现暗淡发黄且饮食、体质量下降等情况；与正常对照组相比，各模型组大鼠脑、肾组织出现不同程度的水肿、炎性细胞浸润等情况；各模型组大鼠尿量、BUN、SCR均不同程度升高，其中PM2.515 、30 mg/kg组显著升高；各染毒组大鼠脑血流量显著下降；血清中IL-1β、IL-6、TNF-α表达显著升高(P机制可能是由于PM2.5进入机体激活5-LOX/LTB4信号通路表达，引起脑、肾的炎症反应，导致脑肾损伤。

关键词： PM 5-脂氧合酶白三烯B4 脑肾损伤炎性损伤

基于JAK2/ERK1/2/STAT3信号通路探讨滋水清肝饮对皮质酮代替饮水抑郁模型小鼠干预作用

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中药药理与临床 2024年

作者：张雨涵曹珊珊史磊磊张佳萍史永恒王斌韩朝军刘继平陕西省中医药管理局中药药效机制与物质基础重点研究室陕西中医药大学药学院陕西省食品药品安全监测重点实验室中医药脑健康产业陕西省高校工程研究中心

目的：通过酪氨酸激酶2（Januskinase 2，JAK2）/细胞外调节蛋白激酶1/2（Extracellular-regulated kinase 1/2，ERK1/2）/信号转导和转录激活因子3（Signal transducer and activator of transcription 3，STAT3）信号通路探究滋水清肝饮对皮质酮（Corticosterone，CORT）代替饮水小鼠抑郁模型的干预作用。方法：除正常对照外，用皮质酮代替饮水建立抑郁模型，造模21 d后根据糖水偏好结果随机分成5组，即模型对照、盐酸氟西汀0.01 g/kg组、滋水清肝饮8.84、17.67、35.34 g/kg组，盐酸氟西汀和滋水清肝饮各组分别灌胃给药14 d。每周给药结束后进行糖水偏好实验及行为学实验。通过苏木素-伊红（HE）染色观察小鼠海马形态学改变；免疫荧光染色检测小鼠海马小胶质细胞标志物离子钙结合衔接分子-1（Ionized calcium binding adapter molecule-1，Iba-1）荧光强度，并统计其数量；检测小鼠血清和海马中丙二醛（MDA）、5-羟色胺（5-HT）、去甲肾上腺素（NA）、CORT含量；实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测小鼠海马组织中肿瘤坏死因子-α（Tnfα）、白细胞介素1β（Il1β）mRNA的表达；蛋白质免疫印迹法（Westernblot）检测小鼠海马组织JAK2、p-JAK2、ERK1/2、p-ERK1/2、STAT3和p-STAT3蛋白的表达。结果：与正常对照组相比，模型对照组降低了小鼠糖水偏好率；延长小鼠不动时间，运动路程、运动时间和平均速度降低，在边缘区域停留时间增加；海马神经细胞变形，轮廓模糊；海马DG区Iba-1荧光强度增强，数量增加；血清和海马中的5-HT和NA含量降低，MDA和CORT含量升高；小鼠海马Tnfα、Il1β mRNA表达增加；p-JAK2和p-STAT3蛋白表达增加，p-ERK1/2蛋白表达降低（P机制可能与调控小鼠海马JAK2/ERK1/2/STAT3信号通路有关。

关键词：滋水清肝饮抑郁症皮质酮替代饮水抑郁模型酪氨酸激酶2/细胞外调节蛋白激酶1/2/信号转导和转录激活因子3信号通路

基于转录组测序探讨金天格胶囊调控滑膜间充质干细胞外泌体miRNA和关节软骨细胞mRNA治疗大鼠骨关节炎的作用机制

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中国现代应用药学 2024年第11期41卷 1464-1475页

作者：王智超张雪张小飞史亚军郭东艳栾飞翟秉涛邹俊波袁普卫陕西中医药大学药学院陕西省中药基础与新药研究重点实验室陕西咸阳712046 陕西中医药大学附属医院陕西咸阳712046 陕西中医药大学第一临床医学院陕西咸阳712046

目的对金天格胶囊治疗骨关节炎的药效进行确证,基于高通量测序技术探讨滑膜间充质干细胞外泌体(synovial mesenchymal stem cell exosomes,SMSC-Exos)与关节软骨细胞(articular chondrocytes,ACs)治疗骨关节炎的潜在作用机制。方法采用... 详细信息

目的对金天格胶囊治疗骨关节炎的药效进行确证,基于高通量测序技术探讨滑膜间充质干细胞外泌体(synovial mesenchymal stem cell exosomes,SMSC-Exos)与关节软骨细胞(articular chondrocytes,ACs)治疗骨关节炎的潜在作用机制。方法采用Ⅱ型胶原酶诱导大鼠骨关节炎,通过一般行为学观察、双足平衡差异试验、机械足反射阈值、MicroCT观察与番红固绿染色进行药效验证。将SMSC、ACs在适宜浓度的含药血清中培养,对照组、模型组和金天格组ACs进行mRNA测序以及SMSC-Exos进行miRNA测序。筛选差异表达mRNA与差异表达miRNA,并进行靶基因预测。通过Venn图对SMSC与ACs的差异表达基因求交集得到共同差异表达基因,运用Cytoscape软件构建miRNA-m RNA调控网络。对共同差异表达基因进行表达趋势分析以及对差异表达基因mRNA与miRNA、Micro-CT药效指标与差异表达基因mRNA进行相关性分析。结果骨关节炎病理状态下,miRNA-23a-3p、miRNA-342-3p、miRNA-146b-5p、mi RNA-501-3p、miRNA-214-3p表达下调,miRNA-222-3p、miRNA-30e-3p、miRNA-676-3p、miRNA-192-5p表达上调(P药效指标、m RNA与miRNA之间存在一定的相关性。结论金天格胶囊治疗骨关节炎的药效作用明显,其作用机制可能与促进SMSC-Exos靶向ACs转运miRNA进而调控Serpinb10、Ntn1、Il1b、Tgm2、Megf10、Il11、Cd40、Slc15a3、Pou2f2等基因有关。

关键词：骨关节炎转录组测序金天格胶囊滑膜间充质干细胞外泌体关节软骨细胞

SARS-CoV-2刺突糖蛋白对神经细胞的损伤效应及机制

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中国药理学与毒理学杂志 2024年第5期38卷 375-383页

作者：王娇李佳佳肖文一韦冬晖蒋宁周文霞陕西中医药大学药学院陕西省中医药管理局中药药效机制与物质基础重点研究室中医药脑健康产业陕西省高校工程研究中心陕西咸阳712046 军事科学院军事医学研究院国家安全特需药品全国重点实验室北京100850

目的探讨严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)刺突糖蛋白(S蛋白)对人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)的损伤效应及其机制。方法用S蛋白0(细胞对照组),25,50,75和100 mg·L^(-1)处理SH-SY5Y 24 h,CCK-8法检测细胞活力;比色法检测乳酸脱氢... 详细信息

目的探讨严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)刺突糖蛋白(S蛋白)对人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)的损伤效应及其机制。方法用S蛋白0(细胞对照组),25,50,75和100 mg·L^(-1)处理SH-SY5Y 24 h,CCK-8法检测细胞活力;比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)释放率;EdU试剂盒检测细胞增殖;荧光素酶发光法检测细胞内ATP含量;JC-1荧光探针法检测细胞线粒体膜电位(MMP);Seahorse XF检测细胞糖酵解及线粒体氧化磷酸化水平。结果与细胞对照组相比,S蛋白25,50,75和100 mg·L^(-1)组细胞活力显著降低(P基础糖酵解水平和糖酵解能力的最大值显著升高(P基础糖酵解水平和糖酵解能力最大值呈负相关(r^(2)=0.5194,P=0.0285;r^(2)=0.6664,P=0.0073),与反映线粒体氧化磷酸化水平的ATP生成能力呈负相关(r^(2)=0.8204,P=0.0008)。结论S蛋白使SH-SY5Y细胞活力下降,抑制细胞增殖,其机制可能与干扰神经细胞内能量代谢密切相关。

关键词：严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2) 刺突糖蛋白人神经母细胞瘤细胞神经损伤糖酵解能量代谢

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栀子药理作用及临床应用的研究进展

辽宁中医药大学学报 2024年

作者：张嘉豪呼田周雪薇孙欠欠赵安东王川刘继平王斌中医药脑健康产业陕西省高校工程研究中心陕西省中医药管理局中药药效机制与物质基础重点研究室陕西中医药大学药学院

栀子为茜草科植物栀子Gardenia jasminoides的干燥成熟果实，性味苦，寒，归心、肺、三焦经，具有泻火除烦、清热利湿、凉血解毒的功效，外用可消肿止痛。栀子属于我国药食两用资源，应用历史悠久，在我国多地种植生产，品种多样，使用... 详细信息

栀子为茜草科植物栀子Gardenia jasminoides的干燥成熟果实，性味苦，寒，归心、肺、三焦经，具有泻火除烦、清热利湿、凉血解毒的功效，外用可消肿止痛。栀子属于我国药食两用资源，应用历史悠久，在我国多地种植生产，品种多样，使用范围广泛，药理作用显著，表现出很好的研究价值。国内外研究表明栀子具有解热，抗炎，降压调脂，降血糖等功效，且对肝脏，血管，神经等都具有保护作用。本文通过对栀子的相关文献进行总结归纳，从中药栀子的品种资源分布及其活性成分含量影响因素，药理作用与多种成分之间的联系，古代医学专著中相关古方在临床的应用等方面，阐明栀子优质资源分布、生物活性以及复方应用的研究，对栀子单药和复方配伍在未来更好的应用进行展望，以期为栀子后续相关研究和开发提供参考。

关键词：栀子种质资源药理作用古方临床应用

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栀子药理作用及临床应用研究进展

辽宁中医药大学学报 2024年第5期26卷 93-98页

作者：张嘉豪呼田周雪薇孙欠欠赵安东王川刘继平王斌陕西中医药大学陕西咸阳712046 陕西省中医药管理局中药药效机制与物质基础重点研究室陕西咸阳712046 中医药脑健康产业陕西省高校工程研究中心陕西咸阳712046

栀子为茜草科植物栀子Gardenia jasminoides Ellis的干燥成熟果实,味苦,性寒,归心、肺、三焦经,具有泻火除烦、清热利湿、凉血解毒的功效,外用可消肿止痛。栀子属于我国药食两用资源,应用历史悠久,在我国多地种植生产,品种多样,使用范... 详细信息

栀子为茜草科植物栀子Gardenia jasminoides Ellis的干燥成熟果实,味苦,性寒,归心、肺、三焦经,具有泻火除烦、清热利湿、凉血解毒的功效,外用可消肿止痛。栀子属于我国药食两用资源,应用历史悠久,在我国多地种植生产,品种多样,使用范围广泛,药理作用显著,表现出较高的研究价值。国内外研究表明栀子具有解热、抗炎、降压、调脂、降血糖等功效,且对肝脏、血管、神经等都具有保护作用。该文通过对栀子的相关文献进行总结归纳,从中药栀子的品种资源分布及其活性成分含量影响因素、药理作用与多种成分之间的联系、古代医学专著中相关古方在临床的应用等方面阐明栀子优质资源分布、生物活性以及复方应用的研究,对栀子单药和复方配伍在未来更好的应用进行展望,以期为栀子后续相关研究和开发提供参考。

关键词：栀子种质资源药理作用古方临床应用

基于5-LOX/LTB4信号通路探讨黄芩苷/栀子苷对PM_(2.5)暴露致血管内皮功能障碍的干预作用及其机制

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中南药学 2024年第2期22卷 307-314页

作者：孙欠欠张行行赵麓赵安东史永恒王川刘继平王斌陕西中医药大学药学院陕西咸阳712046 中医药脑健康产业陕西省高校工程研究中心陕西咸阳712046 陕西省中医药管理局中药药效机制与物质基础重点研究室陕西咸阳712046

目的基于5-LOX/LTB4信号通路探究黄芩苷/栀子苷(BC/GD)对PM_(2.5)诱导的血管内皮功能障碍的改善作用及其机制。方法利用离体肌张力描记技术测定BC/GD对不同状态下血管环张力的影响。将32只大鼠随机分为对照组、PM_(2.5)组、30 mg·kg^(-... 详细信息

目的基于5-LOX/LTB4信号通路探究黄芩苷/栀子苷(BC/GD)对PM_(2.5)诱导的血管内皮功能障碍的改善作用及其机制。方法利用离体肌张力描记技术测定BC/GD对不同状态下血管环张力的影响。将32只大鼠随机分为对照组、PM_(2.5)组、30 mg·kg^(-1)BC/GD组和60 mg·kg^(-1)BC/GD组,利用气管滴注法构建PM_(2.5)暴露模型,持续2个月,造模1个月后灌胃给予对应药物,持续1个月,末次给药后,HE染色观察肠系膜动脉血管内皮状态;化学发光法检测肠系膜动脉活性氧(ROS)水平;硝酸还原酶法检测一氧化氮(NO)水平;ELISA法检测血清炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、转化生长因子β1(TGF-β1)、白三烯B4(LTB4)水平;Western blot法检测5-脂氧酶(5-LOX)、内皮细胞一氧化氮合酶(eNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达。结果BC/GD对基础状态的肠系膜动脉血管环张力无明显影响,但能明显舒张由5-HT预收缩的血管环;一氧化氮合酶抑制剂L-NAME、环氧合酶抑制剂INDO或L-NAME+INDO均能明显抑制BC/GD的血管舒张作用,但L-NAME的抑制作用更明显;50、100 mg·mL^(-1)PM_(2.5)能降低血管环对乙酰胆碱(ACh)的舒张血管效应,而BC/GD能明显改善PM_(2.5)诱导的舒张效应减弱。与对照组相比,PM_(2.5)组大鼠肠系膜动脉内皮完整性严重受损、内皮皱缩,大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、LTB4水平显著升高、TGF-β1水平显著降低,肠系膜动脉组织中5-LOX、iNOS蛋白表达明显增加,eNOS蛋白表达降低,ROS水平升高,NO水平降低。与PM_(2.5)组相比,BC/GD能改善内皮损伤程度和完整性,可显著降低血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、LTB4水平,升高TGF-β1水平;明显降低肠系膜动脉5-LOX、iNOS表达,升高eNOS蛋白表达;降低ROS水平,升高NO水平。结论BC/GD可通过抑制5-LOX/LTB4信号通路表达,从而降低ROS水平,抑制炎性损伤,上调eNOS表达,下调iNOS表达,升高血管中NO水平,改善PM_(2.5)诱导的血管内皮功能障碍。

关键词： PM_(2.5) 黄芩苷栀子苷内皮功能障碍 5-LOX/LTB4信号通路

基于网络药理学和UPLC指纹图谱的紫苏质量标志物（Q-Marker）预测

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天然产物研究与开发 2024年

作者：张良琦陈凡张子桉林云周春娇汤卓翰江星明肖美凤湖南中医药大学药学院中药成药性与制剂制备湖南省重点实验室中药药性与药效国家中医药管理局重点实验室

基于UPLC指纹图谱和网络药理学法分析并筛选紫苏潜在质量标志物（Q-Marker）。首先建立15批紫苏叶及14批紫苏梗的指纹图谱，并对不同来源、批次的紫苏叶和紫苏梗中的成分及含量进行比较，标定紫苏不同部位的共有峰和非共有峰；采用网络... 详细信息

基于UPLC指纹图谱和网络药理学法分析并筛选紫苏潜在质量标志物（Q-Marker）。首先建立15批紫苏叶及14批紫苏梗的指纹图谱，并对不同来源、批次的紫苏叶和紫苏梗中的成分及含量进行比较，标定紫苏不同部位的共有峰和非共有峰；采用网络药理学法构建紫苏“成分-靶点”网络图，并构建靶点蛋白互作网络图，预测紫苏Q-Marker。本研究建立的紫苏不同部位的指纹图谱，共检测到了5种成分，其中迷迭香酸、咖啡酸、木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷、木犀草素-7-O-二葡萄糖醛酸苷为叶和梗的共有成分，芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷为紫苏叶特有成分。筛选得到包括MAPK1、PIK3CA等在内的14个核心靶点，对以上靶点进行GO和KEGG功能分析可知涉及肿瘤坏死因子、新型冠状病毒、脂质和动脉粥样硬化等通路，最后构建“成分-靶点-通路”网络图，选取排名前4的靶蛋白与4个成分进行分子对接验证，结果显示成分与蛋白之间具有十分良好的结合性能。本实验基于UPLC法建立紫苏不同部位多成分含量测定方法，此方法操作简单、准确度高，可作为紫苏质量检测的参考方法；同时结合网络药理学和分子对接技术预测迷迭香酸、咖啡酸、木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷、木犀草素-7-O-二葡萄糖醛酸苷为紫苏不同部位的潜在质量标志物，以此来评价紫苏“多成分-多靶点-多通路”的协同作用，为紫苏的质量控制提供了理论依据，同时也为后续的紫苏药效物质基础和作用机制提供坚实的基础。

关键词：紫苏指纹图谱质量标志物网络药理学化学成分