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简易超灵敏快速检测H1N1甲型流感病毒方法的研究

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分析化学 2022年第10期50卷 1482-1490页

作者：李招发曾静怡毛雨锐樊可心姜敏华侨大学生物医学学院华侨大学医学院

基于适配体和滚环扩增(RCA)技术，建立了一种快速、简易、超灵敏检测H1N1甲型流感病毒(IAV)的方法。采用磁珠-SELEX技术筛选，经克隆、测序、合并重复序列，筛选出10条H1N1 IAV候选适配体。通过斑点杂交法、酶联免疫吸附分析法(ELISA)... 详细信息

基于适配体和滚环扩增(RCA)技术，建立了一种快速、简易、超灵敏检测H1N1甲型流感病毒(IAV)的方法。采用磁珠-SELEX技术筛选，经克隆、测序、合并重复序列，筛选出10条H1N1 IAV候选适配体。通过斑点杂交法、酶联免疫吸附分析法(ELISA)对适配体的结合力、特异性和亲和力进行表征，获得了2条特异性好、亲和力高的线状适配体Apt2和Apt6,并将其环化，制备了环状适配体CApt2和CApt6。以磁性纳米微球表面修饰Apt2捕获富集样品中的H1N1 IAV, H1N1 IAV再结合CApt6,以CApt6作为模板进行RCA扩增，利用纳米金可视化法显示检测结果，对H1N1 IAV的检出限低至100.0 copies/μL。本研究为研发简易、超灵敏、快速检测病毒的方法提供了一种新思路。

关键词： H1N1甲型流感病毒适配体滚环扩增纳米金可视化检测

宿主miRNA参与甲型流感病毒复制调控研究进展

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病毒学报 2022年第2期38卷 494-504页

作者：郭寿清廖月姣乔自林王家敏李倬刘振斌西北民族大学生物医学研究中心甘肃省动物细胞技术创新中心兰州730030 西北民族大学生物医学研究中心生物工程与技术国家民委重点实验室兰州730030 西北民族大学生命科学与工程学院兰州730030

流行性感冒(简称“流感”)是由流感病毒引起的急性呼吸道传染疾病,据世界卫生组织统计,流感每年可导致300万~500万严重病例,其中29万~65万病例死亡,给社会带来沉重的经济负担,是一个世界性的公共卫生难题。研究发现宿主细胞中存在多条... 详细信息

流行性感冒(简称“流感”)是由流感病毒引起的急性呼吸道传染疾病,据世界卫生组织统计,流感每年可导致300万~500万严重病例,其中29万~65万病例死亡,给社会带来沉重的经济负担,是一个世界性的公共卫生难题。研究发现宿主细胞中存在多条信号通路参与对流感病毒感染的应答,越来越多的研究表明宿主miRNAs通过直接或间接的方式,在流感病毒感染、复制的不同阶段发挥着重要调控作用。本文综合分析了目前关于宿主细胞miRNA对流感病毒复制调控的研究进展,对不同的miRNA具体的调控机制进行系统地归类总结后发现:甲型流感病毒(Influenza A virus,IAV)的PB1、PB2、NA、NP、M1基因是宿主miRNA直接抑制病毒复制的主要靶基因,而在间接调控过程中宿主miRNA主要作用在RIG-I样受体信号通路,Jak-STAT信号通路和Toll样受体信号通路三条流感病毒应答信号途径中,以上发现将更有助于全面理解宿主miRNA对于流感病毒调控网络和宿主细胞与流感病毒的互作机制。

关键词：宿主miRNA 甲型流感病毒(IAV) PB1 RIG-1

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冠状病毒的研究进展

中国人兽共患病学报 2021年第1期37卷 22-38页

作者：李向茸李倩冯若飞西北民族大学生物医学研究中心生物工程与技术国家民委重点实验室兰州730030 西北民族大学生物医学研究中心甘肃省动物细胞技术创新中心兰州730030 西北民族大学生命科学与工程学院兰州730030

冠状病毒是一类在自然界广泛存在的,可引起跨种间传播并对人兽健康构成严重威胁的传染病病原体。由于宿主谱广泛和选择压力大,冠状病毒会发生变异以逃避宿主免疫反应,从而变得更具致病性。在不到20年的时间里,冠状病毒已经导致了3次令... 详细信息

冠状病毒是一类在自然界广泛存在的,可引起跨种间传播并对人兽健康构成严重威胁的传染病病原体。由于宿主谱广泛和选择压力大,冠状病毒会发生变异以逃避宿主免疫反应,从而变得更具致病性。在不到20年的时间里,冠状病毒已经导致了3次令全球恐慌的重大疫情,包括目前的新冠疫情。基于此,有必要对冠状病毒进行重新审视。因此,本文从冠状病毒的分类、基因与蛋白结构、编码蛋白功能、复制周期与致病机制、免疫应答、检测与防治等方面对冠状病毒进行了全面系统的概括和分析,以期深入了解冠状病毒的特性,为预防和控制新发冠状病毒的发生和传播提供参考。

关键词：冠状病毒基因组结构致病机制细胞因子风暴

PEDV N蛋白的原核表达纯化及B细胞抗原表位预测分析

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浙江农业学报 2020年第5期32卷 762-769页

作者：郭富城金丽苏强粟雨芯李方琳陈士恩马晓霞西北民族大学生物医学研究中心甘肃兰州730030 西北民族大学生命科学与工程学院甘肃兰州730030

本研究旨在对猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)N基因进行克隆构建、表达与其B细胞抗原表位性质的预测。将PEDV的N基因进行PCR扩增,克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,经酶切验证获得阳性克隆,将阳性克隆在表达菌**... 详细信息

本研究旨在对猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)N基因进行克隆构建、表达与其B细胞抗原表位性质的预测。将PEDV的N基因进行PCR扩增,克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,经酶切验证获得阳性克隆,将阳性克隆在表达菌*** BL21(DE3)中表达。通过对表达条件及纯化条件的优化,获得高纯度表达蛋白。利用生物信息同源模型化软件Swiss-Pdb Viewer建立PEDV-N蛋白的3D结构,并根据生物信息学软件DNA-Star预测PEDV-N蛋白的二级结构、抗原性、亲水性和表面可及性分析,综合分析预测其B细胞抗原表位。经预测PEDV-N蛋白氨基酸序列中存在13个B细胞优势抗原表位区域。研究结果将进一步为PEDV-N蛋白体外表达产物的应用及研制基因工程疫苗提供理论基础。

关键词：猪流行性腹泻病毒 N蛋白纯化二级结构 B细胞抗原表位预测

辅助慢性阻塞性肺疾病患者家庭运动的手机应用程序可行性探索

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中国康复理论与实践 2016年第4期22卷 482-487页

作者：窦凤娇张博论余丽君北京协和医学院护理学院北京市100144 台湾阳明大学生物医学信息研究所台湾台北市11221

目的开发一款帮助稳定期慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者家庭运动的手机应用程序,并探讨该应用程序在COPD患者中的可行性。方法设计和开发一款辅助患者家庭运动的手机应用程序＂COPD＂雏形,包括如下6个功能模块：运动干预、排行榜、运动... 详细信息

目的开发一款帮助稳定期慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者家庭运动的手机应用程序,并探讨该应用程序在COPD患者中的可行性。方法设计和开发一款辅助患者家庭运动的手机应用程序＂COPD＂雏形,包括如下6个功能模块：运动干预、排行榜、运动提醒、统计、疾病知识和量表。2015年8~12月,便利抽取北京市某三甲医院呼吸科就诊的稳定期COPD患者15例,每例患者被提供一台装有手机应用程序＂COPD＂的红米2a手机,研究者指导患者学会并使用该应用程序在家庭环境中运动1个月。1个月后,采用应用程序评估表测评患者对该应用程序的满意度,研究者通过＂COPD＂反馈的数据分析患者的运动情况。结果14例（93.3%）患者表示该软件有助于在家庭环境进行运动,12例（80%）患者对该软件比较满意。也有一些患者表示学习并使用手机应用程序对年老者具有一定的挑战性,同时对该软件提出一些改善建议,如数据传输的稳定性和速度还有待提高,运动节拍的声音强度有待提高。患者近1个月每周平均运动（4.9±1.1）d,每天运动（44.6±8.4）min。结论 COPD患者对手机应用程序表现出较高满意度。

关键词：慢性阻塞性肺疾病手机应用程序运动

跨膜蛋白39A基因SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立及评价

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浙江农业学报 2018年第11期30卷 1958-1964页

作者：李向茸王兴陇李倩马瑞仙张海霞李琼毅马忠仁冯若飞西北民族大学生物医学研究中心甘肃兰州730030 西北民族大学生命科学与工程学院甘肃兰州730030

为建立一种快速检测跨膜蛋白39A(TMEM39A)基因的方法,根据GenBank中登录的不同种属TMEM39A基因序列的保守区域,设计并合成1对荧光定量通用性引物,经过条件优化,建立了检测TMEM39A基因的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法。结果显示:标准... 详细信息

为建立一种快速检测跨膜蛋白39A(TMEM39A)基因的方法,根据GenBank中登录的不同种属TMEM39A基因序列的保守区域,设计并合成1对荧光定量通用性引物,经过条件优化,建立了检测TMEM39A基因的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法。结果显示:标准品模板在3. 937×10~8～3. 937×10~3拷贝·μL^(-1)范围内呈良好的线性关系,R^2可达0. 999;该方法特异性较好,检测灵敏度可达3. 937×10~2拷贝·μL^(-1);组内和组间变异系数均小于1%,具有较高的重复性和稳定性;利用该方法能够检测出不同细胞中的TMEM39A含量,具有种属通用性。该研究方法的建立为临床上提供了一种TMEM39A的快速检测和定量分析技术。

关键词：跨膜蛋白39A SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR 特异性灵敏性

低氧下牦牛、黑白花牛肾间质成纤维细胞PDK1、Smad2、Caspase3等因子表达差异研究

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核农学报 2023年第7期37卷 1335-1343页

作者：姚一凡张伊阳董仕慧李睿张兰周熳琳乔自林杨琨西北民族大学生物医学研究中心甘肃省动物细胞技术创新中心甘肃兰州730030 西北民族大学生物医学研究中心生物工程与技术国家民委重点实验室甘肃兰州730030 西北民族大学生命科学与工程学院甘肃兰州730030

为了比较低氧条件下不同海拔牛种肾间质成纤维细胞(RIFs)内PDK1、Smad2、Caspase3等因子的表达差异及细胞增殖差异,并进一步探究牦牛肾脏的高原低氧适应性特点,本研究采用牦牛和黑白花牛RIFs作为研究对象,低氧(1%O2)处理后,通过实时荧... 详细信息

为了比较低氧条件下不同海拔牛种肾间质成纤维细胞(RIFs)内PDK1、Smad2、Caspase3等因子的表达差异及细胞增殖差异,并进一步探究牦牛肾脏的高原低氧适应性特点,本研究采用牦牛和黑白花牛RIFs作为研究对象,低氧(1%O2)处理后,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(WB)法检测细胞内PDK1等因子表达差异。波形蛋白(Vimentin)免疫组化染色鉴定结果显示,两种牛的原代RIFs纯度较高,可用于后续试验。低氧处理后,两种牛的RIFs内PDK1、Smad2及Caspase3的mRNA和蛋白表达均存在不同程度上调,且种属间存在显著差异(P研究为比较不同海拔牛种肾脏的低氧适应性研究提供了基础数据,为探索牦牛肾脏高原低氧适应机制提供了一定的理论依据。

关键词：牦牛黑白花牛肾间质成纤维细胞低氧增殖

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陇西腊羊肉卤制过程中挥发性成分分析

中国食品卫生杂志 2022年第6期34卷 1193-1201页

作者：田越常铭元梁晓琳范丽萍刘红娜丁波西北民族大学生命科学与工程学院甘肃兰州730030 西北民族大学生物医学研究中心中国-马来西亚国家联合实验室甘肃兰州730030

目的研究陇西腊羊肉在原料期、腌制期、卤煮期和高温灭菌期4个阶段挥发性风味物质的变化。方法以陇西腊羊肉为研究对象,通过电子鼻和固相微萃取-气相色谱-质谱(SPME-GC-MS)联用技术,用相对气味活度值(ROAV)进行表征。结果陇西腊羊肉... 详细信息

目的研究陇西腊羊肉在原料期、腌制期、卤煮期和高温灭菌期4个阶段挥发性风味物质的变化。方法以陇西腊羊肉为研究对象,通过电子鼻和固相微萃取-气相色谱-质谱(SPME-GC-MS)联用技术,用相对气味活度值(ROAV)进行表征。结果陇西腊羊肉在不同加工阶段中共检出74种挥发性风味物质,各阶段种类数分别为34、26、37、38种,峰面积占比先增大后减小。腌制期和卤煮期是影响腊羊肉风味的重要加工阶段。ROAV分析得出23种关键性风味物质,其中醛类对腊羊肉风味形成的贡献最大,烃类和醇类次之。1-辛烯-3-醇、己醛、壬醛为腊羊肉的特征性风味物质。总体来看,陇西腊羊肉加工过程中的挥发性风味物质在腌制期和卤煮期变化明显,且醛类、烃类、醇类是主要挥发物种类。结论陇西腊羊肉在加工过程中的挥发性风味物质的变化,可促进陇西腊羊肉在现代化工业中关于风味控制技术的研发,加快其品质改良与工业进程。

关键词：陇西腊羊肉挥发性风味物质电子鼻固相微萃取-气相色谱-质谱

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人脑形态网络及其在脑发育研究中的应用

科学通报 2023年第1期68卷 72-86页

作者：赵若可赵智勇王金辉吴丹浙江大学生物医学工程与仪器科学学院杭州310027 华南师范大学脑科学与康复医学研究院广州510631

人脑是一个极其复杂的系统,数以万亿的神经元通过突触构成了庞大的连接网络,如何系统而全面地刻画大脑内部的组织模式一直是神经科学家致力解决的热点问题.随着非侵入神经成像技术的兴起,基于磁共振成像的脑网络研究为揭示人脑的复杂结... 详细信息

人脑是一个极其复杂的系统,数以万亿的神经元通过突触构成了庞大的连接网络,如何系统而全面地刻画大脑内部的组织模式一直是神经科学家致力解决的热点问题.随着非侵入神经成像技术的兴起,基于磁共振成像的脑网络研究为揭示人脑的复杂结构提供了新的契机.其中,脑形态网络因其图像易获得、质量稳定和分析方法简单等优势引发了研究者的广泛关注.传统的脑形态网络是利用一组受试者的某种形态学指标构建的被试间协方差网络,只能反映大脑形态的群组特征.个体水平脑形态网络则针对个体大脑刻画脑区间的形态相似性,保留了个体的形态信息.多指标甚至多模态数据的应用,进一步整合多种互补的结构信息,能够综合表征皮层形态的拓扑连接模式.近年来,脑形态网络在探究人类大脑发育进程方面体现了重要价值.研究发现,胎儿时期形态网络从高度模块化的原始状态开始逐渐整合,至出生时已形成小世界拓扑,出生后至童年早期网络变得分离,童年晚期至青春期又逐渐整合,初级网络率先达到成熟而高级网络长期持续发育.这些结论为理解大脑认知功能的形成和发育障碍的起源提供了重要的理论支撑.本文介绍了两种脑形态网络的构建方法和图论模型的基本概念,回顾了脑形态网络在胎儿、婴儿、儿童以及青少年大脑发育中的研究,总结了脑形态网络的发育规律,最后指出了该技术目前存在的问题与面临的挑战.

关键词：磁共振成像脑形态网络拓扑组织脑发育分离与整合