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人参-黄芪药对不同配比化学成分分析及抗氧化活性研究

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中国新药杂志 2024年第11期33卷 1164-1173页

作者：曹国世李波李佳尉忠贤赵彧陈越赵大庆张红印严铭铭长春中医药大学长春130117 长春中医药大学附属医院长春130021 吉林省中药保健食品科技创新中心长春130117

目的:比较不同配比人参-黄芪药对中指标性成分差异,探究其抗氧化活性。方法:制备人参、黄芪提取物及不同配伍比例(1∶1,1∶2,1∶4,m/m)的人参-黄芪药对提取物,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)和2,2'-... 详细信息

目的:比较不同配比人参-黄芪药对中指标性成分差异,探究其抗氧化活性。方法:制备人参、黄芪提取物及不同配伍比例(1∶1,1∶2,1∶4,m/m)的人参-黄芪药对提取物,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)和2,2'-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸+[2,2'-azinobis(3-ethylbenzothiazoline)-6-sulfonate+,ABTS+]和等化学法检测人参-黄芪药对清除自由基能力;建立H_(2)O_(2)诱导的HepG2细胞氧化损伤模型,通过荧光探针法与ELISA法分析人参-黄芪药对对HepG2细胞模型中氧化因子分泌水平的影响;建立D-半乳糖诱导小鼠衰老模型分析人参-黄芪药对不同配比的体内抗氧化活性;采用紫外分光光度法和HPLC-ELSD法,分析比较各提取物中活性成分(总酚酸、总皂苷、总多糖、总黄酮、总蛋白)及7种主要化学成分的含量差异。结果:人参-黄芪药对不同配比提取物,均显示出较好的抗氧化活性,人参-黄芪(1∶2)药对具有较强的清除自由基能力。体外细胞模型实验中,人参-黄芪药对给药后可显著提高细胞活力、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)含量,降低丙二醛(malondialdehyde,MDA)浓度,其中,人参-黄芪(1∶2)给药浓度为400μg·mL^(-1)时,细胞活力最高可达(92.88±2.81)%。体内实验表明,人参-黄芪(1∶2)可以增强模型小鼠血液和肝脏中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶含量,降低丙二醛浓度。人参-黄芪药对活性成分分析结果表明,人参-黄芪(1∶2)配比时总黄酮和总皂苷含量最高。结论:与单药材提取物相比,人参-黄芪药对不同配比提取物均具有良好的清除自由基能力及体内体外抗氧化作用,其中人参-黄芪(1∶2)药对的抗氧化活性最好。

关键词：人参黄芪药对化学成分抗氧化活性

基于网络药理学和实验验证的三黄膏治疗痔疮的作用机制研究

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中国现代应用药学 2024年第12期41卷 1591-1603页

作者：李文杰于倩郑怡杨亦柳张馨月李光哲严铭铭长春中医药大学长春130117 吉林省中药保健食品科技创新中心长春130117

目的基于网络药理学对三黄膏治疗痔疮的核心成分、靶点及信号通路进行预测,并借助分子对接和实验验证,对其作用机制进行初步探讨。方法经过文献研究和数据库筛选,得到三黄膏活性成分、靶点及痔疮相关靶点,通过Cytoscape软件构建关联... 详细信息

目的基于网络药理学对三黄膏治疗痔疮的核心成分、靶点及信号通路进行预测,并借助分子对接和实验验证,对其作用机制进行初步探讨。方法经过文献研究和数据库筛选,得到三黄膏活性成分、靶点及痔疮相关靶点,通过Cytoscape软件构建关联网络并筛选核心基因,然后对基因进行功能分析和通路富集分析。使用Autodock Vina进行分子对接验证,并通过酶联免疫吸附法(ELISA)和免疫组化验证三黄膏对核心靶点的调控作用。结果收集到三黄膏治疗痔疮活性成分77个及其潜在靶点61个,KEGG显示三黄膏可调控钙信号通路、神经活性配体-受体相互作用、cGMP-PKG信号通路等,影响CGRP、NK-1R、TRPV1、VEGF、IL-6和TNF-α 6个核心靶点,分子对接显示三黄膏与靶点蛋白间有较好的亲和性,动物实验验证了三黄膏可抑制IL-6、CGRP、P物质等的表达,促进VEGF的表达。结论三黄膏可能作用于CGRP、NK-1R等靶点,通过调控钙信号通路及PI3K-Akt等通路,发挥镇痛抗炎、活血化瘀作用来治疗痔疮。

关键词：三黄膏痔疮网络药理学分子对接实验验证

五味子四种组分蛋白结构、理化性质和功能特性比较

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食品与发酵工业 2024年第2期50卷 67-77页

作者：王海东张红印曹珺李光哲严铭铭赵大庆长春中医药大学吉林省人参科学研究院吉林长春130117 吉林省中药保健食品科技创新中心吉林长春130117

以北五味子脱脂粉为原料,通过奥斯本四步法提取清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白,分析比较4种组分蛋白的结构、理化性质和功能特性。结果表明,4种组分蛋白所含有的营养成分差异显著,其中谷蛋白的蛋白质含量最高而脂肪含量最低,同时蛋... 详细信息

以北五味子脱脂粉为原料,通过奥斯本四步法提取清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白,分析比较4种组分蛋白的结构、理化性质和功能特性。结果表明,4种组分蛋白所含有的营养成分差异显著,其中谷蛋白的蛋白质含量最高而脂肪含量最低,同时蛋白提取率最高;4种组分蛋白还原性电泳和非还原型电泳在10~180 kDa和3.3~33.0 kDa亚基条带分布存在差异,超低分子质量电泳发现醇溶蛋白分子质量分布于5 kDa;扫描电镜观察出4种组分蛋白不同的表面结构和聚集程度,谷蛋白最为松散;傅里叶变换红外光谱证实了不同组分蛋白二级结构的差异。此外,谷蛋白的热稳定性、溶解性、持水性、持油性、乳化性和乳化稳定性及起泡性和泡沫稳定性均为最优,揭示出4种组分蛋白组成和结构的不同,导致其表现出的理化性质和功能特性也存在差异。

关键词：五味子组分蛋白结构理化性质功能特性

南、北五味子蛋白抗氧化活性和对HepG2细胞氧化应激损伤的修复作用

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食品与发酵工业 2024年第7期50卷 51-60页

作者：周泓妍郑怡王海东曹珺张涵张红印李光哲严铭铭长春中医药大学药学院吉林长春130117 长春中医药大学东北亚中医药研究院吉林长春130117 吉林省中药保健食品科技创新中心吉林长春130117

采用碱提酸沉法提取南五味子蛋白(Schisandra sphenanthera protein,SSP)和北五味子蛋白(Schisandra chinensis protein,SCP),并测定其体外清除自由基能力、还原能力和对H_(2)O_(2)诱导的HepG2细胞氧化损伤的修复作用。采用CCK-8法检测细胞增殖率,荧光检测胞内活性氧水平,酶联免疫吸附法检测细胞氧化应激产物和抗氧化物酶系活性。结果表明,SSP清除自由基和还原能力均优于SCP,SSP与SCP都能对H_(2)O_(2)诱导HepG2造成的细胞生长抑制起到修复作用(P食品或保健食品工业中。

关键词：蛋白自由基清除氧化应激 HepG2细胞抗氧化

加味黄连膏差异标志物含量测定及其皮肤保护作用

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中国医院药学杂志 2024年第9期44卷 1023-1029页

作者：李佳肖凤琴庞会娜曹国世张红印严铭铭长春中医药大学吉林长春130117 吉林省中药保健食品科技创新中心吉林长春130117

目的:建立加味黄连膏HPLC指纹图谱,结合化学模式识别方法筛选差异标志物,进行定量检测,并研究其对皮肤的保护作用。方法:采用高效液相色谱法考察21批加味黄连膏的相似度并建立指纹图谱,结合化学模式识别,以变量重要性投影(VIP)值>1为标... 详细信息

目的:建立加味黄连膏HPLC指纹图谱,结合化学模式识别方法筛选差异标志物,进行定量检测,并研究其对皮肤的保护作用。方法:采用高效液相色谱法考察21批加味黄连膏的相似度并建立指纹图谱,结合化学模式识别,以变量重要性投影(VIP)值>1为标准筛选影响加味黄连膏质量的差异标志物,通过含量测定对其质量进行评价,并以加味黄连膏对B16F10细胞酪氨酸酶抑制活性及黑色素生成的抑制活性为指标评价其皮肤保护作用。结果:加味黄连膏的HPLC指纹图谱中21批样品(S1~S21)的相似度>0.950,共标定17个共有峰,并指认出8个峰,盐酸黄柏碱、芝麻酚、阿魏酸、盐酸黄连碱、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、姜黄素和芝麻素。OPLS-DA结果显示,3号峰(盐酸黄柏碱),5号峰(阿魏酸),15号峰(姜黄素),16号峰(芝麻素)为影响加味黄连膏质量的差异标志物,其含量分别为0.021 0~0.028 7、0.006 7~0.010 0、0.021 5~0.025 8、0.209 5~0.235 5 mg·g^(–1),且加味黄连膏对B16F10细胞酪氨酸酶抑制率为100.33%,黑色素抑制率为59.80%。结论:建立的指纹图谱及含量测定方法为加味黄连膏的质量评价提供了可靠的理论依据,为工业化生产提供了科学的质控依据;加味黄连膏具有一定的皮肤保护作用,可为其临床应用提供参考。

关键词：中药软膏含量测定质量评价皮肤保护

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响应面法优化五味子蛋白肽的制备工艺及其体外抗氧化活性

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食品工业科技 2024年

作者：王海东张涵周泓妍史佳琳石雨欣衣春光张红印严铭铭长春中医药大学东北亚中医药研究院吉林省中药保健食品科技创新中心

目的：获取五味子蛋白肽的最适酶和最佳制备工艺并考察其体外抗氧化活性。方法：应用7种蛋白酶酶解，基于五味子蛋白不同酶解产物的水解度、自由基清除活性、多肽得率和含量结合SDS-PAGE中分子量多指标综合评价，筛选出最适蛋白酶。以D... 详细信息

目的：获取五味子蛋白肽的最适酶和最佳制备工艺并考察其体外抗氧化活性。方法：应用7种蛋白酶酶解，基于五味子蛋白不同酶解产物的水解度、自由基清除活性、多肽得率和含量结合SDS-PAGE中分子量多指标综合评价，筛选出最适蛋白酶。以DPPH由基清除率为考察指标，通过单因素试验结合响应面分析法确定最佳酶解工艺。以五味子蛋白为参照，分析比较五味子蛋白肽对O2-·、·OH、DPPH·、ABTS·的清除能力和Fe2+螯合能力及Fe3+还原能力。结果：制备五味子蛋白肽的最适酶为碱性蛋白酶，最佳酶解工艺参数为：底物浓度5%，酶底比1%，酶解时间3 h，酶解温度55 ℃，pH值为9.0，在此条件下获得的多肽含量为88.61%，水解度为24.21%，DPPH·清除率为86.96%。五味子蛋白肽的自由基清除能力和还原能力均优于五味子蛋白。结论：本研究确定了五味子蛋白肽的最适酶和最佳水解工艺，同时指出，五味子蛋白肽具有更加优良的体外抗氧化活性，可作为一种天然的抗氧化剂。

关键词：五味子酶解蛋白响应面分析抗氧化活性

葛根蛋白及其酶解物的体外抗氧化活性和功能特性

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食品研究与开发 2024年第1期45卷 51-59页

作者：江婷费博庞会娜张双董红影张红印严铭铭邵帅长春中医药大学吉林长春130117 吉林省中药保健食品科技创新中心吉林长春130117

以葛根为原料,采用碱提法提取葛根蛋白,对其进行酶解,研究不同蛋白酶(碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶)对葛根蛋白的酶解效果及其酶解物的抗氧化活性和功能特性,并与葛根蛋白进行对比。3种蛋白酶对葛根蛋白的酶解效果及其酶解物抗... 详细信息

以葛根为原料,采用碱提法提取葛根蛋白,对其进行酶解,研究不同蛋白酶(碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶)对葛根蛋白的酶解效果及其酶解物的抗氧化活性和功能特性,并与葛根蛋白进行对比。3种蛋白酶对葛根蛋白的酶解效果及其酶解物抗氧化特性研究结果表明,碱性蛋白酶酶解物水解度和蛋白回收率最佳,并具有良好的体外抗氧化活性。功能特性研究结果表明,与葛根蛋白相比,3种葛根蛋白酶解物的溶解性、持油性和起泡性均有不同程度提升,但持水性、起泡稳定性、乳化性及乳化稳定性均有所下降。其中碱性蛋白酶酶解物的功能特性最优,pH值为5时,溶解度达98.43%;温度为60℃时,持油性达4.23%;pH值为6时,起泡性达106%。结果表明,碱性蛋白酶酶解效率高,且适合用于提高葛根蛋白抗氧化活性及功能特性。

关键词：抗氧化活性酶解物葛根蛋白功能特性蛋白酶

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五味子蛋白酶解前后抗氧化活性和功能特性

食品研究与开发 2024年第15期45卷 42-52页

作者：张涵黄意情王海东曹珺周泓妍张红印万志强严铭铭长春中医药大学吉林长春130117 吉林省中药保健食品科技创新中心吉林长春130117

以五味子蛋白为原料,评价中性蛋白酶和木瓜蛋白酶对五味子蛋白酶解前后的抗氧化活性和功能特性;根据两种蛋白酶最适酶解条件,对五味子蛋白酶解,通过扫描电子显微镜、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、游离巯基和二硫键含量测定分析... 详细信息

以五味子蛋白为原料,评价中性蛋白酶和木瓜蛋白酶对五味子蛋白酶解前后的抗氧化活性和功能特性;根据两种蛋白酶最适酶解条件,对五味子蛋白酶解,通过扫描电子显微镜、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、游离巯基和二硫键含量测定分析其结构,并测定其体外清除羟基自由基、DPPH自由基和ABTS~+自由基的能力,测定亚铁离子螯合能力和铁离子还原能力,并对不同酶解产物的持水性、持油性、乳化性和乳化稳定性、起泡性和泡沫稳定性等功能特性进行评价;结果显示,五味子蛋白经酶解后相对分子量显著下降,中性蛋白酶酶解产物分子量最低,中性蛋白酶酶解产物水解度最高,为26.45%,酶解效果优于木瓜蛋白酶。以五味子蛋白为参照,酶解可以提升其抗氧化能力,中性蛋白酶酶解产物抗氧化能力优于木瓜蛋白酶酶解产物,但木瓜蛋白酶酶解产物具有较好的还原能力。五味子蛋白经酶解后,溶解性、乳化性和乳化稳定性、起泡性和泡沫稳定性均提高,并且中性蛋白酶酶解产物功能特性优于木瓜蛋白酶酶解产物。扫描电子显微镜观察到五味子蛋白经两种不同蛋白酶酶解后,产生不同程度的碎片和条状结构,并且木瓜蛋白酶的酶解产物中存在部分较大的片状结构,中性蛋白酶酶解产物呈现出细小的无规则碎片结构,相对松散。同时与五味子蛋白相比,两种酶解产物游离巯基含量均增加,其中中性蛋白酶酶解产物二硫键含量最小。综上,酶解可以降低五味子蛋白分子量,提升五味子蛋白的抗氧化活性和功能特性。

关键词：五味子蛋白蛋白酶解产物中性蛋白酶木瓜蛋白酶抗氧化活性功能特性

不同生长时期酸枣果肉多糖相对分子质量分布和单糖组成及抗氧化活性研究

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食品工业科技 2024年第7期45卷 1-7页

作者：王磊李国龙唐志书宋忠兴袁书会刘红波史鑫波陈佳昕长春中医药大学药学院吉林长春130117 陕西中医药大学陕西中药资源产业化省部共建协同创新中心/秦药特色资源研究开发国家重点实验室(培育)陕西咸阳712083 中国中医科学院研究生院北京100700

为了探究不同生长时期酸枣果肉中多糖含量、相对分子质量、单糖组成及抗氧化活性变化规律,以野生型和种植型酸枣为研究对象,分别采用苯酚-硫酸比色法、高效凝胶色谱法、高效离子色谱法和DPPH自由基清除实验研究其不同生长时期的果肉多... 详细信息

为了探究不同生长时期酸枣果肉中多糖含量、相对分子质量、单糖组成及抗氧化活性变化规律,以野生型和种植型酸枣为研究对象,分别采用苯酚-硫酸比色法、高效凝胶色谱法、高效离子色谱法和DPPH自由基清除实验研究其不同生长时期的果肉多糖含量、相对分子质量、单糖组成和自由基清除能力。研究发现野生型和种植型的酸枣果肉中多糖含量均表现出先下降后上升的趋势;两种类型的酸枣果肉多糖的相对分子质量均随着酸枣的发育逐渐降低;两种类型酸枣果实发育前期果肉多糖中单糖鼠李糖含量最高可达46.14 mg/g,半乳糖次之可达33.10 mg/g;果实发育后期,两种类型的酸枣果肉多糖中单糖含量最高的为阿拉伯糖可达60.30 mg/g,半乳糖醛酸次之可达45.02 mg/g;两种类型酸枣果肉多糖的DPPH自由基清除能力变化趋势与其果肉中多糖含量变化趋势基本相同;种植型酸枣与野生型酸枣在多糖含量、多糖相对分子质量、单糖组成和自由基清除能力方面均表现为相同的趋势,且均属于还原糖积累类型果实。研究结果为酸枣果肉资源进一步开发与利用提供参考。

关键词：酸枣果肉多糖相对分子质量单糖组成抗氧化活性