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微型染色体维持蛋白10在肝癌中的表达和预后价值及作用机制研究

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中华肝胆外科杂志 2024年第3期30卷 207-213页

作者：贾锋宇王亮锦州医科大学锦州121000 锦州医科大学附属第一医院普外科锦州121000

目的分析微小染色体维持蛋白10(MCM10)在肝癌中的表达和预后预测价值及作用机制。方法从癌症基因组图谱数据库获取肝细胞肝癌转录组数据和临床数据,应用秩和检验对肿瘤组织和癌旁组织的MCM10表达水平进行分析。Cox回归分析MCM10表达水... 详细信息

目的分析微小染色体维持蛋白10(MCM10)在肝癌中的表达和预后预测价值及作用机制。方法从癌症基因组图谱数据库获取肝细胞肝癌转录组数据和临床数据,应用秩和检验对肿瘤组织和癌旁组织的MCM10表达水平进行分析。Cox回归分析MCM10表达水平与肝细胞肝癌患者生存预后的关系。应用基因集富集分析(GSEA)对MCM10高、低表达组之间差异基因表达谱进行通路富集分析。应用细胞计数实验(CCK-8)测定MCM10基因敲低对肝癌细胞HepG2增殖能力的影响;采用蛋白免疫印迹法检测MCM10基因敲低后对细胞G1/S-特异性周期蛋白-D1(cyclin D1)表达的影响。结果肝细胞肝癌中MCM10表达值为0.709±0.595,癌旁组织中MCM10表达值为0.077±0.094,差异有统计学意义(P<0.0001)。Cox回归分析显示MCM10高表达是肝细胞肝癌总生存期(HR=1.32,95%CI:1.19~1.48)和疾病特异性生存期(HR=1.40,95%CI:1.22~1.61)的危险因素和预后预测指标。GSEA分析表明差异基因主要富集在细胞周期、P53信号通路和细胞周期G1-S期正向调控等通路。CCK-8结果显示MCM10敲低能够抑制HepG2细胞增殖;蛋白免疫印迹分析进一步证实敲低MCM10表达可抑制HepG2细胞cyclin D1的表达。结论MCM10高表达是肝细胞肝癌患者预后的风险因素,MCM10能够通过cyclin D1促进肝癌细胞增殖从而发挥促肝癌的作用。

关键词：癌,肝细胞微小染色体维持蛋白10 预后基因集富集分析细胞周期蛋白D1

过敏性鼻炎和哮喘患者外周血及致敏小鼠血液或肺组织B细胞中TLR9的表达研究

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西安交通大学学报(医学版) 2024年第2期45卷 250-257页

作者：田慧梅何韶衡张慧云锦州医科大学基础医学院免疫教研室锦州医科大学附属第一医院变态反应与临床免疫中心

目的探究过敏性鼻炎(allergy rhinitis, AR)、过敏性哮喘(allergy asthma, AA)、AR合并AA(AR combined with AA,ARA)患者外周血和致敏小鼠血液或肺组织B淋巴细胞(B细胞)中Toll样受体9(Toll-like receptor 9,TLR9)的表达及过敏原对其表达的影响。方法招募来自锦州医科大学附属第一医院门诊和发作急性期住院的100例志愿者，包括点刺实验阴性的19例健康对照(health control, HC)志愿者、点刺实验阳性的40例AR患者、26例AA患者、15例ARA患者。流式分析仪检测经屋尘螨过敏原提取物(home dust mite allergen extract, HDME)、大籽蒿过敏原提取物(Artemisia sieversiana wild allergen extract, ASWE)、梧桐过敏原提取物(Platanus pollen allergen extract, PPE)刺激前后患者外周血B细胞中TLR9的表达；并采用野生(WT)小鼠和FcεRI基因敲除(FcεRI-KO)小鼠建立AR和AA致敏模型，检测过敏原以及FcεRI对B细胞中TLR9表达的影响。结果 AR、AA、ARA患者外周血B细胞中TLR9的表达和平均荧光强度(mean fluorescence intensity, MFI)均较HC组有所增高；过敏原激发后，AR、AA患者血液B细胞中TLR9的表达和MFI升高(P<0.05)。WT小鼠和FcεRI-KO小鼠与NS对照组相比，过敏原激发后，AR、AA小鼠外周血B细胞TLR9+高表达，但差异无统计学意义，而几乎每组MFI均升高；与NS对照组相比，过敏原激发后FcεRI基因敲除的AA小鼠肺组织中TLR9+B细胞表达差异无统计学意义，但其MFI升高。FcεRI-KO小鼠与WT小鼠相比，过敏原激发后B细胞中TLR9+MFI较低。结论 B细胞中TLR9可能参与AR、AA的发生，检测B细胞中TLR9的表达可能成为诊断AR、AA的新方向。

关键词： Toll样受体(TLR9) B淋巴细胞(B细胞) 过敏性鼻炎(AR) 过敏性哮喘(AA)

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核因子I-C调控人根尖牙乳头干细胞的分化

中国组织工程研究 2024年

作者：吴越朱永娜葛翔刘樊何泽禹刘茜蚌埠医科大学口腔医学院蚌埠医科大学第二附属医院口腔科

背景：体外过表达核因子I-C基因可促进人根尖牙乳头干细胞的分化，Wnt/β-catenin信号通路的激活也可促进人根尖牙乳头干细胞的分化，而且核因子I-C对间充质干细胞中Wnt/β-catenin通路具有调节作用。然而，核因子I-C能否通过激活人根... 详细信息

背景：体外过表达核因子I-C基因可促进人根尖牙乳头干细胞的分化，Wnt/β-catenin信号通路的激活也可促进人根尖牙乳头干细胞的分化，而且核因子I-C对间充质干细胞中Wnt/β-catenin通路具有调节作用。然而，核因子I-C能否通过激活人根尖牙乳头干细胞中Wnt/β-catenin通路进而影响细胞分化，目前尚未见报道。目的：探讨核因子I-C通过Wnt/β-Catenin信号通路调控人根尖牙乳头干细胞分化的作用。方法：玻片覆盖组织块法培养人根尖牙乳头干细胞，慢病毒转染过表达核因子I-C基因。(1)设置对照组、空载体组和过表达核因子I-C组，Western blot检测β-Catenin、LRP5和TCF7L2的表达。(2)设置对照组、空载体组、过表达核因子I-C组和过表达核因子I-C+DKK-1(Wnt通路抑制剂)组，细胞成骨诱导7 d后进行碱性磷酸酶染色及活性定量，细胞成骨诱导14 d后qPCR和Western blot检测Runt相关转录因子2、牙本质涎磷蛋白、骨钙素mRNA及蛋白的表达，茜素红染色观察矿化结节形成情况。结果与结论：(1)与对照组、空载体组相比，过表达核因子I-C组人根尖牙乳头干细胞中Wnt/β-Catenin通路相关蛋白β-Catenin、LRP5、TCF7L2表达显著升高(P<0.01)；(2)与对照组、空载体组相比，过表达核因子I-C组人根尖牙乳头干细胞中碱性磷酸酶活性显著升高(P<0.01),Runt相关转录因子2、牙本质涎磷蛋白、骨钙素mRNA及蛋白表达均显著升高(P <0.01)，矿化结节数量显著增加(P <0.01)；(3)与过表达核因子I-C组相比，过表达核因子I-C+DKK-1组人根尖牙乳头干细胞中碱性磷酸酶活性、Runt相关转录因子2、牙本质涎磷蛋白、骨钙素mRNA及蛋白表达显著下降(P <0.05)，矿化结节数量显著减少(P <0.05)。结果表明：核因子I-C能够激活人根尖牙乳头干细胞中Wnt/β-catenin信号通路，介导人根尖牙乳头干细胞的成骨/成牙分化。

关键词：人根尖牙乳头干细胞核因子I-C Wnt 信号通路分化成骨 DKK-1 工程化干细胞

基于AKT/mTOR通路探讨齐墩果酸调控自噬对IL-1β诱导软骨细胞损伤的保护作用

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中药药理与临床 2024年第5期40卷 57-62页

作者：赵欣敏卢金莹王高赵艳杨菁高秀秋锦州医科大学附属第二医院锦州121001 锦州医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室锦州121001

目的:探讨齐墩果酸对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导软骨细胞损伤的保护作用及机制。方法:培养软骨细胞,利用甲苯胺蓝染色法及COLⅡ免疫荧光染色对软骨细胞进行纯度鉴定。将合格细胞随机分为空白对照组、模型对照组及齐墩果酸0.125、0.25、... 详细信息

目的:探讨齐墩果酸对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导软骨细胞损伤的保护作用及机制。方法:培养软骨细胞,利用甲苯胺蓝染色法及COLⅡ免疫荧光染色对软骨细胞进行纯度鉴定。将合格细胞随机分为空白对照组、模型对照组及齐墩果酸0.125、0.25、0.5μmol/L组。空白对照组用常规培养液培养;造模组用含10 ng/mL IL-1β常规培养液培养24 h建立损伤模型;齐墩果酸各浓度组以常规培养液预处理2 h后,再用IL-1β继续培养24 h。采用MTT法检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡及活性氧(ROS)含量;Western blot法检测细胞中MMP-13、COLⅡ、LC3Ⅱ/Ⅰ、P62、p-AKT、AKT、p-mTOR、mTOR和β-actin的蛋白表达;免疫荧光法检测LC3在软骨细胞中的表达;加入自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine,3-MA)探究自噬在其中作用。结果:与空白对照组相比,模型对照组细胞存活率降低至50.95%,凋亡率、ROS水平、MMP-13、P62的表达及p-AKT/AKT和p-mTOR/mTOR的比值均显著增加(P<0.01),COLⅡ的表达及LC3 II/I的比值均显著降低(P<0.01);与模型对照组相比,齐墩果酸0.125、0.25、0.5μmol/L组存活率显著升高,凋亡率显著降低,ROS水平、MMP-13、P62的表达及p-AKT/AKT和p-mTOR/mTOR的比值均显著降低,COLⅡ表达及LC3 II/I的比值均显著升高(P<0.01),免疫荧光可见LC3荧光强度随着齐墩果酸浓度增加逐渐增强;与齐墩果酸组相比,3-MA+齐墩果酸组细胞存活率降低至47.03%,COL II表达与LC3Ⅱ/Ⅰ的比值均降低,MMP-13、P62的表达均上调(P<0.01)。结论:齐墩果酸对IL-1β引起的软骨细胞损伤具有保护作用,其作用机制与抑制AKT/mTOR信号通路及改善自噬有关。

关键词：齐墩果酸软骨细胞白细胞介素-1β 自噬 AKT/mTOR信号通路

耐力运动对老龄慢性心力衰竭大鼠心功能和运动耐力改善的效果及机制

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中国康复医学杂志 2024年第10期39卷 1487-1490页

作者：李慧栾海燕李艳伟锦州医科大学附属第一医院老年医学科辽宁省锦州市121000 锦州医科大学附属第一医院中医科锦州医科大学附属第一医院慢病管理中心

目的:通过构建老龄心力衰竭大鼠模型,探索耐力运动对老龄慢性心力衰竭大鼠心功能改善情况及机制。方法:48只21月龄SPF级雄性Wistar大鼠,随机分为假手术对照组(Sham组)和假手术运动组(Sham+E组)、心衰对照组(HF组)和心衰运动组(HF+E组)。... 详细信息

目的:通过构建老龄心力衰竭大鼠模型,探索耐力运动对老龄慢性心力衰竭大鼠心功能改善情况及机制。方法:48只21月龄SPF级雄性Wistar大鼠,随机分为假手术对照组(Sham组)和假手术运动组(Sham+E组)、心衰对照组(HF组)和心衰运动组(HF+E组)。Sham组和HF组保持安静状态,Sham+E组和HF+E组进行8周有氧训练。然后检测各组运动耐力的变化、观察心脏功能和结构及心肌组织病理学变化、检测血液中氧化应激指标(NO、MDA、ROS、SOD)及炎性因子(IL-6、TNF-α)的含量。结果:与Sham组相比,Sham+E组运动耐力(力竭距离、力竭时间和最大跑速)明显升高(P<0.05),HF组显著性下降(P<0.01)。与HF组相比,HF+E组各运动耐力参数均显著性升高(P<0.01)。与Sham组相比,Sham+E组BNP和BW降低(P<0.01),LVEDd、LVEF、LVW、LVMI增加(P<0.01),而HF组BNP、LVAWDd、LVAWDs、LVPWDd、LVPWDs、LVW、LVMI增加(P<0.01),LVEDd、LVEF、BW降低(P<0.01)。与HF组相比,HF+E组BNP下降(P<0.01),LVEDd、LVEF、LVW、LVMI增加(P<0.01)。HE染色提示,HE+E组心肌组织损伤较HE组明显减轻。与Sham组相比,Sham+E组NO和SOD明显升高,MDA和ROS明显降低,HF组NO和SOD显著性降低,MDA和ROS显著性升高。与HF组相比,HF+E组NO和SOD显著性升高,MDA和ROS显著性下降。与Sham组相比,Sham+E组IL-6和TNF-α显著性下降,HF组显著性升高。与HF组相比,HF+E组IL-6和TNF-α显著性下降。结论:耐力运动通过抑制氧化应激及炎症反应,改善老龄心力衰竭大鼠心肌组织损伤、改善心肌重塑、提高心功能,从而提高运动耐力。

关键词：耐力运动老龄慢性心力衰竭大鼠心脏功能氧化应激炎症反应

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栖牙普雷沃菌的代糖产酸与致龋关系研究

实用口腔医学杂志 2024年

作者：司远孙雁斐宋雪娇万俊丽李敏杨芳青岛大学口腔医学院青岛大学青岛市市立医院山东第二医科大学口腔医学院大连医科大学口腔医学院

目的:探究栖牙普雷沃菌的代糖产酸与牙本质脱矿及龋病形成的潜在关系。方法:观察栖牙普雷沃菌的形态学特征;在无糖或有糖以及不同p H的培养条件下,紫外分光光度计和p H计检测栖牙普雷沃菌的生长特性,高效液相色谱法(HPLC)检测栖牙普雷... 详细信息

目的:探究栖牙普雷沃菌的代糖产酸与牙本质脱矿及龋病形成的潜在关系。方法:观察栖牙普雷沃菌的形态学特征;在无糖或有糖以及不同p H的培养条件下,紫外分光光度计和p H计检测栖牙普雷沃菌的生长特性,高效液相色谱法(HPLC)检测栖牙普雷沃菌上清液的有机酸含量;将牙本质切片分为对照组、磷酸组和栖牙普雷沃菌组,分别在相应分组培养基中培养1周和2周, SEM, VHM检测各组共培养牙本质的脱矿程度。结果:栖牙普雷沃菌能够发酵蔗糖、葡萄糖产酸,使其最终p H值低至4.7,琥珀酸和乙酸是其主要代谢产物。栖牙普雷沃菌具有一定的耐酸性。此外,栖牙普雷沃菌能够导致牙本质脱矿,与对照组相比,栖牙普雷沃菌组牙本质的维氏硬度值显著降低(P<0.05)。结论:栖牙普雷沃菌的致龋能力可能与其代糖产酸有关。

关键词：龋病栖牙普雷沃菌糖代谢产酸脱矿

老年机械通气患者膈肌浅快呼吸指数与肺部超声评分的相关性及其对撤机结局的预测价值

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中华危重病急救医学 2024年第2期36卷 152-155页

作者：储蕴郭闯付海燕锦州医科大学附属第一医院耳鼻咽喉头颈外科辽宁锦州121001 锦州医科大学附属第一医院心胸外科辽宁锦州121001 锦州医科大学附属第一医院重症医学科辽宁锦州121001

目的探讨老年机械通气患者膈肌浅快呼吸指数(D-RSBI)与肺部超声评分(LUS)的相关性及其对撤机结局的预测价值。方法收集2021年1月至2022年6月在锦州医科大学附属第一医院重症监护病房(ICU)接受治疗的老年(年龄>60岁)有创正压通气(IPPV)... 详细信息

目的探讨老年机械通气患者膈肌浅快呼吸指数(D-RSBI)与肺部超声评分(LUS)的相关性及其对撤机结局的预测价值。方法收集2021年1月至2022年6月在锦州医科大学附属第一医院重症监护病房(ICU)接受治疗的老年(年龄>60岁)有创正压通气(IPPV)患者的临床资料进行回顾性研究。根据撤机结局将患者分为成功组和失败组,比较两组患者性别、年龄、急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ(APACHEⅡ)以及撤机拔管前D-RSBI和LUS等指标的差异;采用Pearson相关性分析D-RSBI与LUS评分的相关性;采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析D-RSBI和LUS评分对老年IPPV患者撤机结局的预测价值。结果共纳入398例老年IPPV患者,其中撤机成功300例,失败98例。失败组与成功组性别、年龄差异均无统计学意义〔男性:55.1%(54/98)比59.0%(177/300),年龄(岁):67.02±5.03比66.96±4.99,均P>0.05〕,失败组APACHEⅡ评分明显高于成功组(分:17.09±3.30比16.06±3.81,P二者均可以预测老年机械通气患者的撤机结局。

关键词：膈肌浅快呼吸指数肺部超声评分老年机械通气撤机

中华蜜蜂幼虫响应中蜂囊状幼虫病毒感染的MicroRNAs分析

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病毒学报 2024年

作者：李一肖宇婷马跃宇李明费东亮马鸣潇锦州医科大学畜牧兽医学院锦州医科大学实验动物中心

为了研究中蜂囊状幼虫病毒（Chinese sacbrood virus,CSBV）感染中华蜜蜂幼虫后体内MicroRNAs(miRNA)表达谱变化，探讨差异miRNAs(DEmiRNAs)在中蜂幼虫响应CSBV应答中的功能。本研究分别对感染CSBV24h和48h中蜂幼虫进行Illumina高通量... 详细信息

为了研究中蜂囊状幼虫病毒（Chinese sacbrood virus,CSBV）感染中华蜜蜂幼虫后体内MicroRNAs(miRNA)表达谱变化，探讨差异miRNAs(DEmiRNAs)在中蜂幼虫响应CSBV应答中的功能。本研究分别对感染CSBV24h和48h中蜂幼虫进行Illumina高通量测序，通过生物信息学软件分析DEmiRNAs及其靶基因，并进行GO功能注释和KEGG通路富集分析。通过RT-qPCR对测序结果进行验证。结果显示：对CSBV感染前后中蜂幼虫测序共筛选出140个已知miRNAs和预测到5个新miRNAs。其中，L24I组（CSBV感染24h幼虫）和L24H组（健康幼虫）对比发现18个DEmiRNAs，其中有12个表达上调，有6个表达下调；L48I组（CSBV感染48h幼虫）和L48H组（健康幼虫）筛选到47个DEmiRNAs，其中有30个表达上调，有17个表达下调。GO分析表明，部分DEmiRNAs及相关靶基因参与免疫系统过程和刺激反应等功能；KEGG通路分析显示，除涉及物质和能量代谢通路外，主要的免疫通路包括MAPK、溶酶体、Hippo、凋亡信号通路等。选取对蜜蜂调控具有重要作用和将要研究的8个miRNAs进行RT-qPCR验证结果表明，结果表明其表达水平与测序结果高度一致，表明测序准确可靠。通过本研究，不仅有助于我们深入认识CSBV感染中蜂幼虫过程中宿主miRNA变化情况，也为探究中华蜜蜂和CSBV相互作用时miRNA发挥的功能提供帮助。

关键词： CSBV 中华蜜蜂幼虫 MicroRNA 测序

以呼吸频率与膈肌增厚分数比值为导向的风险预测模型对AECOPD患者无创-有创机械通气治疗切换时机的预测价值

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中华危重病急救医学 2024年第5期36卷 503-507页

作者：李晓东李甜邸兴伟刘敬禹锦州医科大学附属第一医院重症医学科辽宁锦州121000 锦州医科大学附属第三医院呼吸与危重症医学科辽宁锦州121000

目的通过超声评估慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD)患者的膈肌运动指标,探讨以呼吸频率与膈肌增厚分数比值(RR/DTF)为导向的风险预测模型对AECOPD患者无创-有创机械通气治疗切换时机的预测价值。方法回顾性选择2022年1月至2023年7月入... 详细信息

目的通过超声评估慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD)患者的膈肌运动指标,探讨以呼吸频率与膈肌增厚分数比值(RR/DTF)为导向的风险预测模型对AECOPD患者无创-有创机械通气治疗切换时机的预测价值。方法回顾性选择2022年1月至2023年7月入住锦州医科大学附属第一医院重症医学科接受无创机械通气(NIV)治疗的64例AECOPD患者,根据24 h内NIV上机结局将患者分为NIV成功组和NIV失败组,比较两组患者接受NIV 2 h后RR/DTF、膈肌活动度(DE)、潮气量(VT)、呼吸频率(RR)、pH值、动脉血二氧化碳分压(PaCO_(2))以及是否存在排痰障碍等临床指标。将上述影响NIV失败的因素纳入二分类Logistic回归分析,建立风险预测模型;采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析该模型对AECOPD患者无创-有创机械通气治疗切换时机的预测价值。结果64例AECOPD患者中NIV成功43例,NIV失败21例;两组患者年龄、性别、体质量指数(BMI)、氧合指数(P/F)、吸烟史、急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ(APACHEⅡ)等基线资料比较差异均无统计学意义,具有可比性。与NIV成功组比较,NIV失败组RR/DTF、RR、PaCO_(2)、排痰障碍比例显著升高,VT、DE显著降低〔RR/DTF(%):1.00±0.18比0.89±0.22,RR(次/min):21.64±3.13比19.62±2.98,PaCO_(2)(mmHg,1 mmHg≈0.133 kPa):70.82±8.82比65.29±9.47,排痰障碍:57.1%比30.2%,VT(mL):308.09±14.89比324.48±23.82,DE(mm):19.91±2.94比22.05±3.30,均P二分类多因素Logistic回归分析显示,RR/DTF〔优势比(OR)=147.989,95%可信区间(95%CI)为3.321~595.412,P=0.010〕、RR(OR=1.296,95%CI为1.006~1.670,P=0.045)、VT(OR=0.966,95%CI为0.935~0.999,P=0.044)、PaCO_(2)(OR=1.086,95%CI为1.006~1.173,P=0.035)、排痰障碍(OR=4.533,95%CI为1.025~20.049,P=0.046)为AECOPD患者NIV失败的独立危险因素。ROC曲线分析显示,以上述影响因素构建的风险预测模型预测AECOPD患者无创-有创机械通气治疗切换时机的曲线下面积(AUC)为0.713,95%CI为0.587~0.839(P=0.005);敏感度为72.73%,特异度为88.10%,约登指数为0.394,最佳截断值为0.87。结论以RR/DTF为导向的风险预测模型对AECOPD患者无创-有创机械通气治疗切换时机具有良好的预测价值。

关键词：慢性阻塞性肺疾病膈肌超声无创机械通气风险预测