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基于PERK/eIF2α/ATF4/CHOP通路探讨健骨颗粒对UMR-106细胞内质网应激凋亡的影响

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康复学报 2024年第1期34卷 34-43页

作者：陈赛楠周芬黄云梅林燕萍福建中医药大学中西医结合研究院福建福州350122 福建省中西医结合老年性疾病重点实验室福建福州350122 福建省中医药科学院骨质疏松证候基因组学重点研究室福建福州350003 福建中医药大学杂志社福建福州350122

目的探讨健骨颗粒含药血清对UMR-106成骨样细胞内质网应激ERS凋亡的影响和作用机制。方法选用UMR-106成骨样细胞,采用0、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05μmol/L不同浓度的GSK2606414(PERK抑制剂)对细胞进行干预,采用CCK8法筛选GSK260641... 详细信息

目的探讨健骨颗粒含药血清对UMR-106成骨样细胞内质网应激ERS凋亡的影响和作用机制。方法选用UMR-106成骨样细胞,采用0、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05μmol/L不同浓度的GSK2606414(PERK抑制剂)对细胞进行干预,采用CCK8法筛选GSK2606414最佳干预浓度。将生长状态较好的UMR-106细胞随机分为阴性对照组(NC组)、模型组(H_(2)O_(2)组)、健骨颗粒组(H_(2)O_(2)+JG组)和阳性对照组(H_(2)O_(2)+GSK2606414组)4组。NC组和H_(2)O_(2)组采用10%生理盐水血清干预12 h,H_(2)O_(2)+JG组采用10%健骨颗粒含药血清干预12 h,H_(2)O_(2)+GSK2606414组采用0.03μmol/L的GSK2606414和10%生理盐水血清干预12 h,除NC组外,其余各组在不更换新培养基的情况下,再分别加入10μmol/L H_(2)O_(2)干预12 h。采用激光共聚焦显微镜观察细胞内NC组和H_(2)O_(2)组GRP78和Caspase-12荧光表达情况,DCFH-DA检测活性氧(ROS)含量,激光共聚焦显微镜观察细胞内钙离子实时动态变化判断ROS/ERS模型是否成立。再采用An⁃nexin V-FITC/PI检测4组细胞晚期凋亡率,qPCR和Western blot检测4组ERS相关标志指标GRP78、PERK、eIf2α、ATF4和CHOP mRNA转录水平和蛋白相对表达量。结果与0μmol/L组比较,0.03μmol/L的GSK2606414是干预UMR-106细胞12 h后对细胞活力没有影响的最大浓度,故使用该浓度作为后续H_(2)O_(2)+GSK2606414组的实验干预条件。与NC组相比,H_(2)O_(2)组ROS含量显著增高(P<0.01),GRP78和Caspase-12的蛋白荧光表达量明显增加,细胞内钙离子流动速度加快并持续增高,表明H_(2)O_(2)诱导UMR-106细胞ROS/ERS模型的成功建立。与NC组相比,H_(2)O_(2)组凋亡率显著增高(P<0.05),GRP78、PERK、eIf2α、ATF4、CHOP mRNA转录水平和蛋白相对表达量均显著增高(P<0.01)。与H_(2)O_(2)组相比,H_(2)O_(2)+JG组和H_(2)O_(2)+GSK2606414组ROS含量显著降低(P<0.01),凋亡率显著降低(P<0.05),GRP78、PERK、eIf2α、ATF4、CHOP mRNA转录水平(P<0.05)和蛋白相对表达量(P<0.01)均显著降低。结论健骨颗粒可通过PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路缓解内质网过度应激,降低成骨细胞凋亡率,发挥防治绝经后骨质疏松症的作用。

关键词：绝经后骨质疏松症内质网应激健骨颗粒 PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路成骨细胞凋亡

《古今录验》续命汤对急性脑梗死大鼠脑损伤及血管新生的影响

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中国中药杂志 2024年第8期49卷 2178-2187页

作者：罗政李定祥蔡昱哲刘艺璇阳晶晶吴琴张亚男陈静邓奕辉湖南中医药大学中西医结合学院湖南长沙410208 湖南中医药大学中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室湖南长沙410208 湖南中医药大学中医学院湖南长沙410208

旨在探讨《古今录验》续命汤对急性脑梗死大鼠脑缺血性损伤及血管新生的影响。以SD大鼠为研究对象,随机分为6组:假手术组,模型组,续命汤低、中、高剂量组,丁苯酞组。大鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型成... 详细信息

旨在探讨《古今录验》续命汤对急性脑梗死大鼠脑缺血性损伤及血管新生的影响。以SD大鼠为研究对象,随机分为6组:假手术组,模型组,续命汤低、中、高剂量组,丁苯酞组。大鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型成功建立后,各组大鼠每天分别灌胃给予蒸馏水,续命汤5.13、10.26、20.52 g·kg~(-1)药液、丁苯酞混悬液(0.06 g·kg~(-1))。连续干预7 d后,进行末次神经功能评分,处死所有大鼠,采集脑组织样本。通过神经功能评分和2,3,5-氯化三苯基四氮染色评估脑缺血损伤程度;苏木素-伊红染色观察脑组织病理学形态改变;透射电子显微镜观察缺血半暗区皮层脑组织神经元和微血管内皮细胞(endothelial cells,ECs)超微结构;免疫荧光检测缺血半暗区皮层脑组织血管性血友病因子(von Willebrand factor,vWF)和造血祖细胞抗原CD34(hematopoietic progenitor cell antigen CD34,CD34)的蛋白表达情况;实时荧光定量PCR和免疫印迹法检测缺血半暗区皮层脑组织Runt相关转录因子1(Runt-related transcription factor 1,RUNX1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、血管生成素-1(angiopoietin-1,Ang-1)、血管生成素-2(angiopoietin-2,Ang-2)、VEGF受体2(VEGF receptor 2,VEGFR2)mRNA和蛋白的表达情况。结果表明,与假手术组相比,模型组大鼠神经功能评分、脑梗死面积显著升高(P<0.01);缺血半暗区皮层脑组织病理学形态结构、神经元与微血管ECs超微结构受损;RUNX1、VEGF、Ang-1、Ang-2、VEGFR2 mRNA表达均显著升高(P<0.01);vWF、CD34、RUNX1、VEGF、Ang-1、Ang-2、VEGFR2蛋白表达均显著升高(P<0.05或P<0.01)。与模型组相比,续命汤高剂量组、丁苯酞组神经功能缺损评分和脑梗死面积显著降低(P<0.01);缺血半暗区皮层脑组织病理学形态结构、神经元与微血管ECs超微结构损伤情况得到改善;RUNX1、VEGF、Ang-1、Ang-2、VEGFR2 mRNA表达显著升高(P<0.01);vWF、CD34、RUNX1、VEGF、Ang-1、Ang-2、VEGFR2蛋白表达也显著升高(P<0.01)。上述结果表明,《古今录验》续命汤可以促进MCAO大鼠缺血半暗区皮层脑组织的血管新生,加快侧支循环的建立,以减轻神经功能障碍,可能与RUNX1/VEGF途径有关。

关键词：急性脑梗死《古今录验》续命汤血管新生 RUNX1 VEGF

基于网络药理学的多奈哌齐联合丁苯酞治疗阿尔茨海默病的机制研究

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海南医学 2024年第4期35卷 564-569页

作者：王慧娟叶端玲许云腾许文勇福建中医药大学附属厦门第三医院神经内科福建厦门361100 福建中医药大学中西医结合学院福建福州350122 福建中医药大学中西医结合研究院福建福州350122

目的研究多奈哌齐联合丁苯酞治疗阿尔茨海默病(AD)的疗效与潜在作用机制。方法采用网络药理学方法,利用疾病及药物数据库中获取AD和丁苯酞、多奈哌齐的作用靶点,将其导入到STRING11.0数据库中,得到潜在作用靶点的PPI网络图,并结合Cytosc... 详细信息

目的研究多奈哌齐联合丁苯酞治疗阿尔茨海默病(AD)的疗效与潜在作用机制。方法采用网络药理学方法,利用疾病及药物数据库中获取AD和丁苯酞、多奈哌齐的作用靶点,将其导入到STRING11.0数据库中,得到潜在作用靶点的PPI网络图,并结合Cytoscape3.8.1软件和cytoHubba插件筛选排名前10的核心基因,进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析,以深入研究多奈哌齐联合丁苯酞在治疗AD中的潜在作用机制。结果共获得联合药物靶点249个;1236个疾病基因靶点,获得77个药物-疾病交集靶点,排名前10的Hub基因为IL1B、PTGS2、STAT3、EGFR、MMP9、CCL2、IGF1、GSK3B、JAK2、ICAM1。GO富集和KEGG富集分析发现,这些靶点主通过抗炎、抗氧化应激、调节受体活性,改善神经信号传递、调节酶活性、保护血脑屏障、逆转突触可塑性、抑制神经细胞凋亡等多种途径来达到协同多奈哌齐有效治疗AD。结论多奈哌齐联合丁苯酞有效治疗AD的主要机制包括协同作用以及通过更多作用靶点和信号通路来实现抗炎、抗氧化应激、改善血管储备功能、抑制细胞凋亡等多重机制。

关键词：阿尔茨海默病丁苯酞多奈哌齐网络药理学药物靶点疾病基因靶点潜在作用机制

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虫类药土鳖虫化学成分研究进展

中华中医药学刊 2024年

作者：倪林君刘晓凤胡筱林婉真许惠凤余丽双福建中医药大学药学院福建省中西医结合老年性疾病重点实验室

土鳖虫为鳖蠊科昆虫地鳖Eupolyphaga sinensis Walker或冀地鳖Steleophaga plancyi Boleny的雌虫干燥体。其药用历史悠久，临床使用经验丰富，目前土鳖虫及其相关制剂被用于跌打损伤、筋骨疼痛、风湿、中风、冠心病及原发性肝癌等多种... 详细信息

土鳖虫为鳖蠊科昆虫地鳖Eupolyphaga sinensis Walker或冀地鳖Steleophaga plancyi Boleny的雌虫干燥体。其药用历史悠久，临床使用经验丰富，目前土鳖虫及其相关制剂被用于跌打损伤、筋骨疼痛、风湿、中风、冠心病及原发性肝癌等多种疾病的治疗。已有研究从土鳖虫中分离鉴定出蛋白质、活性肽、脂类、多糖、生物碱及核苷类等多种化学成分。其中蛋白质和肽类是土鳖虫中含量最高的成分，有多个研究从土鳖虫中分离鉴定得到具有活性的蛋白和肽，它们分别具有溶血栓、抗肿瘤、调节血脂、抗氧化及抗菌等活性。土鳖虫中还含有丰富的脂质，含量仅次于蛋白质，有研究指出这些脂质成分可能具有治疗肿瘤的潜力。此外，土鳖虫的化学成分还有多糖、生物碱、核苷、维生素和微量元素等，这些成分具有抗氧化、抗肿瘤、抗炎、保护肾脏、保护血管内皮细胞及抗缺血缺氧等多种活性。本文对国内外相关文献进行查阅并整理归纳，按照化学成分类型将土鳖虫化学成分研究获得的成果作一综述，以期为土鳖虫的进一步研究及开发利用提供参考。

关键词：土鳖虫化学成分研究进展

合募配穴治疗危重症患者肠内营养喂养不耐受的疗效观察

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针刺研究 2024年第1期49卷 64-70页

作者：陈晓桐李璟王文佳吴梦蝶钱义明谢静侯瑜超李俊雄上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院上海200437

目的:观察合募配穴对危重症肠内营养喂养不耐受(ENFI)患者喂养达标率、腹内压、肠内营养耐受性评分、急性生理学和慢性健康状况评价Ⅱ(APACHE-Ⅱ)评分和胃肠功能损伤(AGI)等级的影响,评价合募配穴治疗ENFI的临床疗效。方法:将70例ENFI... 详细信息

目的:观察合募配穴对危重症肠内营养喂养不耐受(ENFI)患者喂养达标率、腹内压、肠内营养耐受性评分、急性生理学和慢性健康状况评价Ⅱ(APACHE-Ⅱ)评分和胃肠功能损伤(AGI)等级的影响,评价合募配穴治疗ENFI的临床疗效。方法:将70例ENFI患者随机分为对照组、治疗组各35例。对照组采用常规基础治疗联合肠内营养支持;治疗组在对照组治疗基础上取上脘、中脘、下脘、气海、关元及双侧内关、足三里、下巨虚、上巨虚、天枢、大横针刺,其中天枢、大横左右各为一组,分别接电针仪的一对电极,每次30 min,每日1次,连续7 d。观察两组患者治疗期间每日喂养达标人数,计算喂养达标率,记录治疗期间肠内营养耐受性评分、腹内压、APACHE-Ⅱ评分和AGI等级。结果:治疗后两组肠内喂养达标率较治疗前升高,且治疗组除第2天以外肠内喂养达标率均高于对照组(P<0.05);治疗后两组肠内营养耐受性评分、腹内压、APACHE-Ⅱ评分和AGI等级均较治疗前降低(P<0.05, P<0.01),且治疗组低于对照组(P<0.05)。结论:合募配穴可以通过增加ENFI患者肠内营养喂养量,改善ENFI情况,提高患者喂养水平,促进胃肠功能恢复,有利于患者预后。

关键词：合募配穴危重症患者肠内喂养不耐受胃肠功能

层次分析-熵权法结合Box-Behnken响应面法优化草珊瑚杀青工艺研究

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中国现代应用药学 2024年

作者：罗瑞涵潘馨黄慧敏王明新洪冬廖华军福建中医药大学药学院

目的应用Box-Behnken响应面法设计，结合层次分析-熵权法优化草珊瑚的杀青工艺。方法以新绿原酸、刺五加苷B1、异嗪皮啶、落新妇苷和迷迭香酸的含量及总黄酮、总酚酸得率为评价指标，采用AHP-熵权法确定各评价指标的综合权重系数进行... 详细信息

目的应用Box-Behnken响应面法设计，结合层次分析-熵权法优化草珊瑚的杀青工艺。方法以新绿原酸、刺五加苷B1、异嗪皮啶、落新妇苷和迷迭香酸的含量及总黄酮、总酚酸得率为评价指标，采用AHP-熵权法确定各评价指标的综合权重系数进行评价分析，优选杀青工艺；以杀青温度、杀青次数、杀青时间为关键工艺参数，采用单因素实验确定各因素水平；Box-Behnken响应面法设计构建三因素三水平试验设计方案，结合综合权重系数进行综合评价，并通过DPPH自由基清除实验对杀青草珊瑚抗氧化的能力进行评价，通过设计空间思想优化工艺水平。结果草珊瑚最佳的杀青方法是热风杀青，响应面优化得到最佳工艺条件为杀青温度60℃，杀青次数2次，杀青时间50 s。DPPH自由基清除实验结果表明，草珊瑚经过热风杀青后可以提升其体外抗氧化活性。建立设计空间为次数1～2次，温度60～62℃，时间55～65 s。结论优化的草珊瑚热风杀青工艺合理、稳定、可行，可为草珊瑚的初加工提供理论与实验依据。

关键词：草珊瑚杀青层次分析-熵权法 Box-Behnken响应面法 DPPH自由基清除实验

六味补气方对慢性阻塞性肺疾病细胞焦亡的干预作用及机制研究

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中国中西医结合杂志 2024年第5期44卷 583-591页

作者：吴柏合于芳春谢桂元赵晶燕方远方芳刘向国安徽中医药大学中西医结合学院合肥230012

目的研究六味补气方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)细胞焦亡的影响。方法按照随机数字表法将大鼠分为正常对照组、模型组、桂龙咳喘宁组和六味补气方低、中、高剂量组,每组10只。采用烟熏加脂多糖(LPS)气管滴入的方法建立COPD大鼠模型。药... 详细信息

目的研究六味补气方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)细胞焦亡的影响。方法按照随机数字表法将大鼠分为正常对照组、模型组、桂龙咳喘宁组和六味补气方低、中、高剂量组,每组10只。采用烟熏加脂多糖(LPS)气管滴入的方法建立COPD大鼠模型。药物干预后,检测大鼠肺功能;支气管肺组织形态学改变;同时检测肺组织NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)和Gasdermin D-N端(GSDMD-N)的改变;肺泡灌洗液(BALF)中炎症因子白介素18(IL-18)、白介素1β(IL-1β)水平;肺组织活性氧(ROS)水平;肺组织NLRP3、半胱天冬酶-1(Caspase-1)、Gasdermin D(GSDMD)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)蛋白表达以及mRNA水平。结果与正常对照组比较,模型组大鼠肺功能降低(P<0.01),肺组织损伤,细胞膜破裂,IL-18、IL-1β和ROS水平升高(P<0.01),肺组织NLRP3、Caspase-1、GSDMD、和ASC蛋白表达和mRNA水平显著升高(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,各用药组肺功能改善,肺组织损伤和细胞焦亡减轻,IL-18、IL-1β和ROS水平下降(P<0.01),肺组织NLRP3、Caspase-1、GSDMD和ASC蛋白表达和m RNA水平降低(P<0.01),其中以六味补气方高剂量组改变最为显著。结论六味补气方可降低COPD大鼠IL-18、IL-1β和ROS水平,减轻气道炎症和氧化应激,阻抑肺组织损伤和细胞的焦亡,增加肺功能,其机制可能是通过调控ROS/NLRP3/Caspase-1信号通路实现的。

关键词：慢性阻塞性肺疾病炎症反应细胞焦亡活性氧/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3/半胱天冬酶-1信号通路中药复方

基于“肾主骨生髓通于脑”理论探析膝骨关节炎疼痛的神经调控

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风湿病与关节炎 2024年第1期13卷 47-49,53页

作者：茆敏朱在师易周萍钟佳洁李西海王丽丽福建中医药大学中西医结合研究院福建福州350122 福建中医药大学中西医结合学院福建福州350122 福建中医药大学福建省中西医结合老年性疾病重点实验室福建福州350122

膝骨关节炎是一种以关节软骨、软骨下骨、滑膜病变为表现的慢性、退行性关节疾病,疼痛是其首发症状及主要就诊原因。肾气不足,导致骨、髓、脑三者功能紊乱,可引发膝骨关节炎局部病变及中枢神经环路的病变。肝肾亏虚、筋骨失和,骨髓化生... 详细信息

膝骨关节炎是一种以关节软骨、软骨下骨、滑膜病变为表现的慢性、退行性关节疾病,疼痛是其首发症状及主要就诊原因。肾气不足,导致骨、髓、脑三者功能紊乱,可引发膝骨关节炎局部病变及中枢神经环路的病变。肝肾亏虚、筋骨失和,骨髓化生乏源、骨失所养,无力生髓养脑、神经环路功能紊乱,可引发疼痛。因此,文章在“肾主骨生髓通于脑”理论指导下,以肾-骨-脑轴为切入点,从膝骨关节炎疼痛的神经调控入手,探析膝骨关节炎疼痛的神经调控机制,旨在丰富“肾主骨生髓通于脑”理论的科学内涵,为膝骨关节炎疼痛的中西医结合临床治疗提供新策略。

关键词：膝骨关节炎肾主骨生髓通于脑疼痛软骨软骨下骨滑膜中枢神经系统

中药活性成分诱导的铁死亡在骨肉瘤中的研究进展

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赣南医学院学报 2024年第3期44卷 297-301页

作者：刘鑫黄艺云杨燕妮段辛威郑春松福建中医药大学中西医结合研究院福建中医药大学中西医结合学院福建省中西医结合老年性疾病重点实验室福建福州350122

骨肉瘤(Osteosarcoma,OS)是一种最常见的骨癌类型,具有高致残率和致死率的特点。因其发病机制复杂,OS的有效治疗一直是该领域内的难点。中药因其具有多重活性成分,在治疗OS方面展现出了独特优势。已有研究证实青蒿素类(双氢青蒿素、青蒿... 详细信息

骨肉瘤(Osteosarcoma,OS)是一种最常见的骨癌类型,具有高致残率和致死率的特点。因其发病机制复杂,OS的有效治疗一直是该领域内的难点。中药因其具有多重活性成分,在治疗OS方面展现出了独特优势。已有研究证实青蒿素类(双氢青蒿素、青蒿素)、类黄酮(补骨脂二氢黄酮)、姜黄素类(姜黄素、EF24)等中药活性成分能够通过铁死亡途径对骨肉瘤起治疗作用。铁死亡作为铁依赖的磷脂过氧化作用驱动的一种独特的细胞死亡方式,受到了多种细胞代谢途径的调控,与OS的发生、发展密切相关。本文归纳了铁死亡相关的理论和它在OS中的最新研究进展,围绕中药中不同活性成分在OS中调控铁死亡的分子机制进行了总结和讨论,以期为OS的预防和治疗提供参考。

关键词：骨肉瘤中药活性成分铁死亡

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