检索结果-南通市图书馆

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

细菌DNA甲基化研究进展

生物化学与生物物理进展 2018年第10期45卷 1026-1038页

作者：张文婷姚玉峰上海交通大学医学院基础医学院免疫学与微生物学系上海200025

DNA甲基化修饰是细菌调控基因表达的一种重要方式,在很多生理过程中发挥非常关键的作用.本文系统介绍了细菌DNA甲基化修饰的起源、DNA甲基转移酶,分类总结了DNA甲基化调控基因表达的机制.同时对近年来细菌DNA甲基化的功能、DNA甲基化检... 详细信息

DNA甲基化修饰是细菌调控基因表达的一种重要方式,在很多生理过程中发挥非常关键的作用.本文系统介绍了细菌DNA甲基化修饰的起源、DNA甲基转移酶,分类总结了DNA甲基化调控基因表达的机制.同时对近年来细菌DNA甲基化的功能、DNA甲基化检测方法的进展进行了综合评述.这些研究对人类了解细菌DNA甲基化表观调控及控制细菌感染具有重要指导意义.

关键词：细菌 DNA甲基化表观遗传调控功能单分子实时测序技术

MSMEG_0372基因敲除、回补及过表达耻垢分枝杆菌的构建与鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

石河子大学学报（自然科学版） 2022年第5期40卷 620-626页

作者：刘仪牛宏红杨赛丽曹旭东袁俐石河子大学医学院病原生物学与免疫学教研室新疆石河子832000

目的为研究MSMEG_0372基因的功能,构建该基因敲除、回补及过表达耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,***)并鉴定。方法聚合酶链反应(PCR)扩增MSMEG_0372基因的左、右臂(即等位基因互换底物,allele exchange substrates,AES)。AES与p0004s经过酶切并连接,构建p0004s-AES质粒。p0004s-AES与phAE159经过酶切并连接,构建phAE159-AES噬菌粒。噬菌粒转化至***,30℃培养,扩增重组噬菌体。用重组噬菌体侵染***,37℃培养,发生基因同源重组,形成MSMEG_0372基因敲除菌株。筛选阳性菌落,PCR鉴定。PCR扩增MSMEG_0372基因,构建pMV361-MSMEG_0372质粒。将pMV361-MSMEG_0372质粒分别导入MSMEG_0372基因敲除菌株和野生型***,构建MSMEG_0372基因回补菌株和MSMEG_0372基因过表达菌株。筛选阳性菌落,PCR鉴定。结果PCR扩增出MSMEG_0372的左、右臂(AES),构建了p0004s-AES质粒和phAE159-AES噬菌粒,制备了高滴度的重组噬菌体并侵染***,从而成功构建了MSMEG_0372基因敲除菌株。构建了pMV361-MSMEG_0372质粒,成功构建了MSMEG_0372基因回补和过表达菌株。结论成功构建并鉴定了MSMEG_0372基因敲除、回补及过表达***,为进一步研究该基因的功能奠定了基础。

关键词：耻垢分枝杆菌 MSMEG_0372基因基因敲除基因回补基因过表达

肺腺癌浸润CD8^(+)T细胞表达CD39的机制

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国肿瘤生物治疗杂志 2023年第2期30卷 129-134页

作者：逯君霞赵彬侯隽王良海吴向未陈雪玲许军英石河子大学医学院病原生物学与免疫学教研室新疆石河子832000 石河子大学医学院第一附属医院肝胆外科新疆石河子832000

目的:探讨肿瘤浸润CD8^(+)T细胞表达CD39的可能机制。方法:通过TCGA数据库的肺腺癌(LUAD)组织及正常肺组织转录组数据分析CD39在LUAD组织和正常肺组织中的表达差异及其对患者预后的影响,分析CD39表达与T细胞浸润、激活的关系。用小鼠LUA... 详细信息

目的:探讨肿瘤浸润CD8^(+)T细胞表达CD39的可能机制。方法:通过TCGA数据库的肺腺癌(LUAD)组织及正常肺组织转录组数据分析CD39在LUAD组织和正常肺组织中的表达差异及其对患者预后的影响,分析CD39表达与T细胞浸润、激活的关系。用小鼠LUAD Lewis细胞建立小鼠皮下移植瘤模型,FCM检测淋巴结、脾脏以及移植瘤组织中CD8^(+)CD39^(+)T细胞。收集Lewis细胞培养上清液作为条件培养基(CCM),免疫磁珠法(MACS)分选CD8^(+)T细胞、CD11b^(+)细胞;在培养基中分别加入CCM、IL-6和采取非接触或接触培养方式进行培养,探索CD8^(+)T细胞表达CD39的可能机制。结果:CD39在LUAD组织中呈低表达(P子标志。

关键词：肺腺癌肿瘤浸润CD39 CD11b CD8^(+)T细胞

MSMEG3150调控耻垢分枝杆菌细胞壁的结构与生物膜的形成

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

石河子大学学报（自然科学版） 2022年第3期40卷 352-361页

作者：牛宏红刘仪杨赛丽曹旭东袁俐石河子大学医学院病原生物学与免疫学教研室新疆石河子832000

目的探讨耻垢分枝杆菌中MSMEG_3150蛋白的功能。方法构建耻垢分枝杆菌MSMEG_3150过表达株;采用CRISPRi技术构建耻垢分枝杆菌MSMEG_3150沉默株。使用MSMEG_3150过表达株、沉默株和野生型菌株进行实验研究。测定细菌生长曲线;刚果红实... 详细信息

目的探讨耻垢分枝杆菌中MSMEG_3150蛋白的功能。方法构建耻垢分枝杆菌MSMEG_3150过表达株;采用CRISPRi技术构建耻垢分枝杆菌MSMEG_3150沉默株。使用MSMEG_3150过表达株、沉默株和野生型菌株进行实验研究。测定细菌生长曲线;刚果红实验检测细菌表面疏水性。透射电镜、扫描电镜等观察菌体形态、结构。LC-MS测定脂肪酸含量。结晶紫染色定量生物膜形成。结果过表达MSMEG_3150导致菌体变长、细胞壁增厚,生长速度加快,脂质含量增多,增强细菌表面的疏水性,促进生物膜形成。结论 MSMEG_3150可能通过调控耻垢分枝杆菌细胞壁的脂质含量和表面疏水性从而影响细菌的生长特性及生物膜的形成。

关键词：结核分枝杆菌 FabG1 生物膜脂质合成表面疏水性

同方期刊数据库

淋球菌孔蛋白基因克隆及其在真核细胞中的表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华皮肤科杂志 2004年第10期37卷 614-615页

作者：季明春蒋桂花钱莉刘伟陈红菊扬州大学医学院微生物学和免疫学教研室 225001

在许多发展中国家,淋病仍然是一种常见性病,加强淋球菌疫苗研制等预防措施的研究显得非常迫切[1].由于淋球菌自然感染诱导非保护性免疫,早期全细菌疫苗实验的免疫效果不理想,促使人们用纯化淋球菌抗原作进一步研究.淋球菌孔蛋白(porin)... 详细信息

在许多发展中国家,淋病仍然是一种常见性病,加强淋球菌疫苗研制等预防措施的研究显得非常迫切[1].由于淋球菌自然感染诱导非保护性免疫,早期全细菌疫苗实验的免疫效果不理想,促使人们用纯化淋球菌抗原作进一步研究.淋球菌孔蛋白(porin)具有较强的免疫原性和相对缓慢的抗原变异性,是目前淋球菌疫苗研究的热点.我们克隆了淋球菌孔蛋白全长基因,并成功构建真核细胞表达载体。

关键词：淋球菌真核细胞表达载体克隆真核细胞蛋白基因常见多发纯化细菌疫苗研制

嗜热脂肪芽孢杆菌羧酸酯酶的异源表达及酶学性质研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生物化学与生物物理进展 2010年第9期37卷 967-974页

作者：孙锦霞刘钟滨同济大学医学院病原生物学与免疫学系病原生物学教研室上海200092

运用生物信息学技术从嗜热脂肪芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)CICC20156中克隆获得羧酸酯酶基因,构建黑曲霉和毕氏酵母表达质粒,将重组质粒分别转化毕氏酵母GS115和黑曲霉pyrG基因缺陷株***-PAGE和Westernblot检测显示:携带... 详细信息

运用生物信息学技术从嗜热脂肪芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)CICC20156中克隆获得羧酸酯酶基因,构建黑曲霉和毕氏酵母表达质粒,将重组质粒分别转化毕氏酵母GS115和黑曲霉pyrG基因缺陷株***-PAGE和Westernblot检测显示:携带His标记的外源蛋白在转化真菌宿主中均获得了高效分泌性表达,毕氏酵母和黑曲霉表达的外源蛋白分子质量均约为29ku,蛋白质浓度分别为30.7mg/L和15.3mg/L.生物学活性测定表明,毕氏酵母与黑曲霉表达的羧酸酯酶单位蛋白酶活分别为22671U/mg和21438U/mg.酶学性质研究显示,两种表达系统表达的重组羧酸酯酶的酶学特性基本一致,它们在40～70℃范围内均显示较好的酶活性,最适反应温度为60℃.70℃处理30min,毕氏酵母和黑曲霉表达重组羧酸酯酶残余酶活分别为76.7%和67.6%,显示出良好的热稳定性.在pH6.5～8.5的范围内显示较高酶活性,最适pH为8.0.上述研究首次实现了具有良好热稳定性的嗜热脂肪芽孢杆菌羧酸酯酶在黑曲霉和毕氏酵母中高效异源分泌性表达,其中毕氏酵母羧酸酯酶的产量要高于黑曲霉的酶产量,但考虑到重组黑曲霉表达外源性蛋白无需使用任何诱导剂,黑曲霉菌表达热稳定性羧酸酯酶可能具有更好的应用前景.

关键词：羧酸酯酶嗜热脂肪芽孢杆菌黑曲霉毕氏酵母异源表达酶学性质

耐药淋球菌差异DNA消减文库的构建及初步筛选

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华皮肤科杂志 2003年第5期36卷 264-266页

作者：季明春严华陈红菊申厚凤扬州大学医学院微生物学及免疫学教研室225001

目的克隆和研究耐药性淋球菌相关基因.方法从耐药淋球菌株RSM292C4和淋球菌标准参考菌株WHO-A细胞中提取DNA,经Rsa Ⅰ酶切后,应用抑制性消减杂交技术构建耐药性淋球菌差异DNA消减文库并进行初步筛选.结果耐药淋球菌差异DNA消减文库经扩... 详细信息

目的克隆和研究耐药性淋球菌相关基因.方法从耐药淋球菌株RSM292C4和淋球菌标准参考菌株WHO-A细胞中提取DNA,经Rsa Ⅰ酶切后,应用抑制性消减杂交技术构建耐药性淋球菌差异DNA消减文库并进行初步筛选.结果耐药淋球菌差异DNA消减文库经扩增获得约2 500个白色克隆,随机挑取96个白色克隆,进行PCR扩增鉴定,发现克隆中插有100～600 bp大小的片段.分别以RsaI酶切样本和参照DNA为探针,与随机挑取的96个白色菌落质粒作点杂交,有5个克隆仅能与样本DNA探针杂交,而不能与参照DNA探针杂交,表明它们为RSM292C4基因组DNA所特有,可能代表某些淋球菌新基因.对这5个克隆插入的DNA片段进行测序,经送基因库和淋球菌基因组部分测序基因库检索分析,发现5个片段均为未知新序列.结论淋球菌耐药菌株DNA消减文库的构建为进一步筛选、克隆淋球菌耐药的新基因奠定了基础.

关键词：耐药淋球菌抑制性消减杂交基因文库药物耐受 DNA序列分析

人巨细胞病毒pp150抗原区的原核表达及初步应用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

病毒学报 2004年第2期20卷 169-171页

作者：李国才严华季明春申厚凤陈红菊焦红梅万兵扬州大学医学院微生物学免疫学教研室扬州225001

To make up an engineered *** strain for expression of antigenic determinants of pp150 of human cytomegalovirus,the gene encoding the 420-752 amino acid peptides of pp150 was amplified from human cytomegalovirus AD169 by RT-PCR and cloned into Nde I/BamHⅠ sites in *** recombinant plasmid was transformed into *** BL21(DE3)and a foreign protein about 35 kD were detected by SDS-PAGE and Western blotting *** antiserum prepared by using prokaryotic expressed product as antigen turned to be against pp150 specifically and had low neutralization effect to HCMV.

关键词：人巨细胞病毒 pp150 抗原原核表达疫苗 HCMV

抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌天然药物研究进展

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中草药 2016年第20期47卷 3742-3748页

作者：王鑫刘奇大理大学基础医学院医学微生物学及免疫学教研室云南大理671000

以抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)天然药物为对象,检索了近年来对其天然药物研究的相关文献,并进行归纳整理。来源于植物、动物、微生物的能有效抗MRSA的化合物,包括植物中的黄酮类、... 详细信息

以抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)天然药物为对象,检索了近年来对其天然药物研究的相关文献,并进行归纳整理。来源于植物、动物、微生物的能有效抗MRSA的化合物,包括植物中的黄酮类、萜类、蒽醌类等,动物中的抗菌肽及毒素,以及部分微生物的代谢产物等。部分化合物可作为未来抗MRSA的候选药物。目前抗MRSA的天然药物研究已经成为该领域的研究热点之一,但是多数研究仅停留在对活性药物的筛选上,缺少对候选药物的毒理、药理等深入研究。

关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌天然药物动物植物微生物