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苦参通过抑制MAPK/NF-κB通路改善免疫平衡缓解特应性皮炎实验研究

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中国中西医结合杂志 2024年

作者：黄盼潘意王畅汪海珍胡凡湖南中医药大学第二附属医院肛肠科湖南中医药大学第二附属医院皮肤科

目的探讨苦参对特应性皮炎（AD）辅助型T细胞1/辅助型T细胞2(Th1/Th2)失衡的治疗作用及其内在分子机制。方法将24只雌性C57BL/6小鼠，按体重分层随机分为正常对照组、AD模型组和AD+苦参组，每组8只。采用2,4-二硝基氯苯/粉尘螨提取物... 详细信息

目的探讨苦参对特应性皮炎（AD）辅助型T细胞1/辅助型T细胞2(Th1/Th2)失衡的治疗作用及其内在分子机制。方法将24只雌性C57BL/6小鼠，按体重分层随机分为正常对照组、AD模型组和AD+苦参组，每组8只。采用2,4-二硝基氯苯/粉尘螨提取物（DNCB/DFE）诱导建立AD小鼠模型。将人表皮角质形成细胞（HaCaT）分成对照组、干扰素-γ(IFN-γ)/肿瘤坏死因子-α(TNF-α)组、IFN-γ/TNF-α+苦参组，共3组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应（q RT-PCR）检测IFN-γ、TNF-α、白细胞介素（IL）-2、胸腺激活调节趋化因子（TARC）、IL-4、IL-5、IL-6 mRNA表达，Western Blot检测小鼠组织和细胞中磷酸化有丝分裂原活化蛋白激酶（p-p38）、p38、磷酸化核因子κB p65亚单位（p-p65）、p65蛋白表达，ELISA检测IL-6、TARC释放水平以及流式Th1/Th2细胞比例。结果在细胞水平方面：与对照组比较，IFN-γ/TNF-α组IL-6、TARC mRNA及蛋白表达水平显著升高（P<0.01）,p-p38、p-p65蛋白表达均上调（P<0.01）；与IFN-γ/TNF-α组比较，IFN-γ/TNF-α+苦参组IL-6、TARC mRNA和蛋白表达水平均显著降低（P<0.01）,p-p38、p-p65蛋白表达显著下调（P<0.01）。在动物水平研究中：与正常对照组比较，AD模型组小鼠皮肤组织中p-p38、p-p65蛋白表达水平显著增加（P<0.01）；耳部皮肤组织炎症细胞浸润增多，角质化过度、肥大细胞浸润增加（P<0.01），且皮肤中Th2细胞含量增加（P<0.01）；小鼠皮肤中IFN-γ、TNF-α、TARC、IL-6、IL-4、IL-5表达增加（P<0.01）；与AD模型组比较，AD+苦参治疗组小鼠皮肤组织中p-p38、p-p65蛋白表达水平均减少（P<0.01）；表皮、真皮厚度和肥大细胞数均显著降低（P<0.05）;Th2细胞数量及组织中TARC、IL-6、IL-4、IL-5表达水平显著降低（P<0.01）。结论苦参可通过抑制MAPK/NF-κB信号通路改善Th1/Th2免疫平衡从而减轻AD的症状。

关键词：苦参特应性皮炎辅助型T细胞1/辅助型T细胞2失衡有丝分裂原活化蛋白激酶/核因子κB信号通路中药

黄芪甲苷通过上调miR-1226缓解ox-LDL诱导人脐静脉血管内皮细胞损伤

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中药材 2024年 2052-2057页

作者：刘文频熊向晖宾晓芳伍瑶高海波陈聪伶湖南中医药大学第二附属医院心血管内科湖南中医药大学湘杏学院

目的:探讨黄芪甲苷对人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)损伤的影响及分子机制。方法:体外培养HUVECs,100 mg/L氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)处理HUVECs,建立动脉粥样硬化(Atherosclerosis,As)细胞模型,将HUVECs分为空白对照组、模型组、黄芪甲... 详细信息

目的:探讨黄芪甲苷对人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)损伤的影响及分子机制。方法:体外培养HUVECs,100 mg/L氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)处理HUVECs,建立动脉粥样硬化(Atherosclerosis,As)细胞模型,将HUVECs分为空白对照组、模型组、黄芪甲苷低浓度组、黄芪甲苷中浓度组、黄芪甲苷高浓度组、miR-NC组、miR-1226组、高浓度黄芪甲苷+anti-miR-NC组、高浓度黄芪甲苷+anti-miR-1226组。流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA检测IL-6、IL-1β、TNF-α水平;Western Blot检测蛋白表达;RT-qPCR检测mi R-1226表达。结果:与空白对照组比较,模型组细胞凋亡率、Bax蛋白表达及IL-6、IL-1β、TNF-α分泌显著升高,Bcl-2蛋白及mi R-1226表达显著降低(P<0.05)。与模型组比较,黄芪甲苷各浓度组和mi R-1226组细胞凋亡率、Bax蛋白表达及IL-6、IL-1β、TNF-α分泌显著升高,Bcl-2蛋白表达显著降低,Bcl-2蛋白及mi R-1226表达显著升高(P<0.05),黄芪甲苷的作用呈浓度依赖性。下调mi R-1226可逆转黄芪甲苷的作用。结论:黄芪甲苷可能通过上调mi R-1226表达缓解ox-LOL诱导的HUVECs损伤。

关键词：黄芪甲苷 miR-1226 凋亡炎性细胞因子

基于“调枢通胃”理论针刺治疗血虚肠燥型脑卒中后便秘的临床疗效观察

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中华中医药杂志 2024年第6期39卷 3221-3226页

作者：韩文华展立芬江钰鄢天涯朱墨豪谌瑶付中应刘未艾刘恋湖南中医药大学第二附属医院长沙410005 湖南中医药大学长沙410208

目的:观察“调枢通胃”理论指导下的针刺疗法治疗血虚肠燥型脑卒中后便秘的临床疗效,并探讨可能的作用机制。方法:将60例血虚肠燥型脑卒中后便秘患者随机分为针刺组(30例)和药物组(30例),在内科基础治疗和对症处理的基础上,针刺组采用... 详细信息

目的:观察“调枢通胃”理论指导下的针刺疗法治疗血虚肠燥型脑卒中后便秘的临床疗效,并探讨可能的作用机制。方法:将60例血虚肠燥型脑卒中后便秘患者随机分为针刺组(30例)和药物组(30例),在内科基础治疗和对症处理的基础上,针刺组采用“调枢通胃”理论指导下的针刺疗法,穴取百会、内关、支沟、天枢、三阴交,留针30 min,得气后每隔10分钟行针1次,每日针刺1次,7 d为1个疗程,共3个疗程;药物组口服生血通便颗粒,每日1次,每次10 g,7 d为1个疗程,连续3个疗程。观察两组治疗前后的便秘临床症状积分以及血清胃动素(MTL)、P物质(SP)、生长抑素(SS)、血管活性肠肽(VIP)水平,并比较两组治疗临床疗效差异。结果:两组患者治疗后便秘积分及SS、VIP水平均较治疗前显著降低(P<0.05),MTL、SP水平均较治疗前显著升高(P<0.05)。针刺组患者治疗3周后便秘积分及SS、VIP水平均显著低于药物组(P<0.05),MTL、SP水平均显著高于药物组(P<0.05)。治疗1周后针刺组总有效率为63.33%(19/30),药物组为60.00%(18/30),差异无统计学意义;治疗3周后针刺组总有效率为83.33%(25/30),显著高于药物组73.33%(22/30)(P<0.05)。结论:基于“调枢通胃”理论的针刺疗法对血虚肠燥型脑卒中后便秘疗效显著,短期内疗效与口服生血通便颗粒相当,坚持治疗后疗效优于口服生血通便颗粒,其作用机制可能与调节MLT、SP、SS、VIP水平有关。

关键词：调枢通胃血虚肠燥脑卒中便秘针刺生血通便颗粒

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中医药调控线粒体功能防治肝衰竭的研究进展

中国实验方剂学杂志 2024年第2期30卷 234-243页

作者：田晓玲张彧陈斌湖南中医药大学长沙410208 湖南中医药大学第一附属医院长沙410007

肝衰竭(LF)作为一种肝细胞严重损害及肝脏功能障碍的临床综合征,其高死亡率、高发病率与高医疗资源耗竭呈现出三重叠加,成为阻碍人类健康的重大疑难重症。深入研究其疾病发生的核心因素及补充治疗手段以提高LF生存率具有十分重大的意义... 详细信息

肝衰竭(LF)作为一种肝细胞严重损害及肝脏功能障碍的临床综合征,其高死亡率、高发病率与高医疗资源耗竭呈现出三重叠加,成为阻碍人类健康的重大疑难重症。深入研究其疾病发生的核心因素及补充治疗手段以提高LF生存率具有十分重大的意义。LF发病机制复杂,线粒体是肝细胞内较敏感的细胞器之一,作为细胞内能量代谢的中心环节,已有大量研究显示,在LF中,肝细胞内线粒体在结构和功能上发生了改变,线粒体结构和功能异常在LF疾病进程中发挥着重要作用。其中线粒体呼吸链障碍、线粒体DNA损伤、线粒体通透性转换孔开放、线粒体质量控制失衡及线粒体氧化应激等多种因素交织成网络,构成一个复杂而统一的整体,成为影响LF病程进展的关键节点。近年来,研究人员开始着力于研究能够通过调节肝脏线粒体功能,防治LF的药物。随着研究的深入,中医药在LF防治中不断有新的突破,诸多研究证实了中医药可通过保护线粒体功能来发挥防治LF的效用,其作用效果可概括为减轻肝细胞损伤、抑制肝细胞死亡及促进肝细胞再生3个方面,以有效代偿肝功能,促进肝实质质量与功能的恢复。该文对线粒体的结构与功能、LF与线粒体的关系及中医药领域干预线粒体功能防治LF的研究进行总结性梳理,以期为临床中医药治疗LF提供一定的思路及借鉴。

关键词：中医药肝衰竭线粒体作用机制

巨噬细胞激活与极化在心肌纤维化的作用及中医药干预

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中国实验方剂学杂志 2024年第9期30卷 272-282页

作者：姚昆鹏蔡虎志赵祥宫克田楚宁罗云涛彭丽琪欧广洋陈青扬陈新宇湖南中医药大学长沙410208 湖南中医药大学第一附属医院长沙410007

心肌纤维化(MF)是多种心脏疾病的常见病理表现,由于心肌细胞的不可再生性,MF的发生代表心肌出现不可逆性的损伤。以往的研究认为,成纤维细胞介导的胶原沉积是心肌纤维化的主要机制。最新的研究发现,心脏本身存在免疫调控机制,巨噬细胞激... 详细信息

心肌纤维化(MF)是多种心脏疾病的常见病理表现,由于心肌细胞的不可再生性,MF的发生代表心肌出现不可逆性的损伤。以往的研究认为,成纤维细胞介导的胶原沉积是心肌纤维化的主要机制。最新的研究发现,心脏本身存在免疫调控机制,巨噬细胞激活/极化在MF中占有重要地位。随着中医药研究的不断深入,学者们发现中药可通过调控肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)系统、调节炎症进程、修复细胞外基质、管理氧化应激、维护自噬平衡等方面干预MF,而这一过程与巨噬细胞的激活及M1/M2型极化密切相关。在整个MF过程中,巨噬细胞活化是有益的,但不可过度,否则将变为有害。在MF早期,适当的M1型巨噬细胞极化有利于激活免疫,清除有害物质;在MF中后期,适当的M2型巨噬细胞极化有利于重塑受损的心肌。若巨噬细胞活化过度/不足,或M1/M2型巨噬细胞极化的平衡被打破,则效应由挽救变为破坏。具有调控巨噬细胞活化/极化的中药多具有益气养阴,理气活血的功效,但也不乏清热燥湿解毒之品。因此,MF的发生可能为气阴不足、湿热蕴毒、气滞血瘀所致。通过总结巨噬细胞激活/极化在MF中涉及的生物学过程,阐述中医药从不同角度调控巨噬细胞激活及M1/M2型极化改善MF的研究进展,以期为中医药治疗MF提供借鉴。

关键词：巨噬细胞心肌纤维化中医药心力衰竭

探讨子午流注与DNA甲基化节律在冠心病时空发生发展中的作用

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中华中医药杂志 2024年第7期39卷 3807-3811页

作者：周江敏朱洁陈杏于子璇张书萌陈伶利李杰湖南中医药大学长沙410208 湖南中医药大学第二附属医院长沙410005

子午流注理论以“天人相应”的整体观念为核心,强调因人而异、因时制宜,体现了古代原始的时间医学理念,其悠长的应用历史也充分体现其理论的合理性。DNA甲基化作为新兴的表观遗传学研究方向之一,在解释复杂的疾病病理机制方面具有独特... 详细信息

子午流注理论以“天人相应”的整体观念为核心,强调因人而异、因时制宜,体现了古代原始的时间医学理念,其悠长的应用历史也充分体现其理论的合理性。DNA甲基化作为新兴的表观遗传学研究方向之一,在解释复杂的疾病病理机制方面具有独特的优势,其节律特点也为子午流注的客观性提供了佐证。冠心病因逐年增长的发病率与病死率受到广泛关注,其复杂多样的病机是人们急需攻克的难关。文章以子午流注及DNA甲基化节律为切入点,从宏观及微观角度探讨冠心病时空发生发展中的节律性改变,寻找冠心病的时空发病机制,为未来精准治疗冠心病提供新的理论依据。

关键词：子午流注 DNA甲基化冠心病时间医学节律

丹参酮ⅡA通过TGF-β1/PI3K/Akt信号通路对子宫内膜间质细胞纤维化的影响

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中华中医药杂志 2024年第2期39卷 903-906页

作者：黄紫纯雷磊匡继林湖南中医药大学长沙410208 湖南中医药大学第二附属医院长沙410005

目的:探讨丹参酮ⅡA(TanⅡA)通过转化生长因子-β1/磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(TGF-β1/PI3K/Akt)通路对人子宫内膜间质细胞(HESCs)纤维化的影响。方法:取10 ng/mL TGF-β1诱导HESCs纤维化,将HESCs分为5组:正常对照组,模型组和TanⅡA... 详细信息

目的:探讨丹参酮ⅡA(TanⅡA)通过转化生长因子-β1/磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(TGF-β1/PI3K/Akt)通路对人子宫内膜间质细胞(HESCs)纤维化的影响。方法:取10 ng/mL TGF-β1诱导HESCs纤维化,将HESCs分为5组:正常对照组,模型组和TanⅡA低、中、高剂量组。CCK-8检测HESCs细胞毒性和增殖情况;免疫荧光检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白α1(Col1α1)荧光强度;Western Blot检测α-SMA、Col1α1、PI3K、Akt及p-Akt蛋白表达。结果:TanⅡA浓度在10~40μg/mL对HESCs无毒性。与正常对照组比较,模型组细胞增殖能力,α-SMA、Col1α1荧光强度,α-SMA、Col1α1、PI3K、p-Akt蛋白表达显著增多(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,TanⅡA高剂量组细胞增殖能力显著下降(P<0.05);各TanⅡA干预组α-SMA、Col1α1荧光强度,α-SMA、PI3K、p-Akt、Col1α1蛋白表达显著减少(P<0.01,P<0.05),各组Akt蛋白表达差异无统计学意义。结论:TanⅡA可通过抑制TGF-β1/PI3K/Akt信号通路有效抗子宫内膜纤维化。

关键词：宫腔粘连丹参酮ⅡA 转化生长因子-β1 磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B信号通路子宫内膜

从肝治心组方通过Nrf2/HO-1通路对缺氧/复氧损伤H9c2心肌细胞铁死亡的影响

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中药药理与临床 2024年第1期40卷 16-23页

作者：何飘朴美虹谢丽华曾阳王瑾茜汪辛强张程程胡国恒陈亚湖南中医药大学第一附属医院长沙410007 湖南中医药大学长沙410208

目的:基于核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶1(HO-1)信号通路探讨从肝治心组方对大鼠H9c2心肌细胞铁死亡的影响。方法:本研究采用H9c2心肌细胞缺氧/复氧(H/R)方法模拟心肌缺血再灌注损伤(MIRI)细胞模型,细胞分为:空白对照组、模型... 详细信息

目的:基于核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶1(HO-1)信号通路探讨从肝治心组方对大鼠H9c2心肌细胞铁死亡的影响。方法:本研究采用H9c2心肌细胞缺氧/复氧(H/R)方法模拟心肌缺血再灌注损伤(MIRI)细胞模型,细胞分为:空白对照组、模型对照组、15%正常对照血清组、26.6 g/kg从肝治心组方含药血清15%组、NK25220μmol/L组、ML3855μmol/L组、26.6 g/kg从肝治心组方含药血清15%+ML3855μmol/L组,通过CCK-8法检测细胞活力;DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)水平;TMRE荧光探针检测细胞线粒体膜电位水平;FerroOrange荧光探针检测细胞内Fe^(2+)水平;RT-qPCR、Werstern blot法检测核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶1(Ho1)、膜铁转运辅助蛋白(Heph)、二价金属离子转运体(Dmt1)、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(Acsl4)mRNA和蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组线粒体膜电位水平降低,ROS及Fe^(2+)水平升高,Nrf2、Ho1、Heph mRNA及蛋白表达下调,Dmt1、Acsl4 mRNA及蛋白表达上调(P<0.05或P<0.01);与模型对照组比较,从肝治心组方含药血清组和NK252组线粒体膜电位水平升高,ROS及Fe^(2+)水平降低,Nrf2、Ho1、Heph mRNA及蛋白表达上调,Dmt1、Acsl4 mRNA及蛋白表达下调(P<0.05或P<0.01);与ML3855μmol/L组比较,从肝治心组方+ML3855μmol/L组线粒体膜电位水平升高,ROS及Fe^(2+)水平降低,Nrf2、Ho1、Heph mRNA及蛋白表达上调,Dmt1、Acsl4 mRNA及蛋白表达下调(P<0.05或P<0.01)。结论:从肝治心组方可能通过调控Nrf2/HO-1信号通路,减轻缺氧/复氧损伤的H9c2心肌细胞铁死亡。

关键词：从肝治心组方铁死亡心肌缺血再灌注损伤缺氧/复氧核因子E2相关因子2/血红素氧合酶1

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线粒体衍生肽MOTS-c调节骨稳态机制及运动适应性研究

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中国骨质疏松杂志 2024年第10期 1499-1505页

作者：孙钰刘恩旭段嘉豪李兆勇杨雷杨少锋湖南中医药大学湖南中医药大学第一附属医院

骨稳态包括成骨细胞与破骨细胞介导的骨形成与骨吸收，骨组织的完整性依赖二者间的动态平衡。MOTS-c作为一种新型线粒体衍生肽(mitochondria-derived peptides, MDPs)是“线粒体-细胞”间信息交流的重要媒介，在维持机体能量转换和代谢... 详细信息

骨稳态包括成骨细胞与破骨细胞介导的骨形成与骨吸收，骨组织的完整性依赖二者间的动态平衡。MOTS-c作为一种新型线粒体衍生肽(mitochondria-derived peptides, MDPs)是“线粒体-细胞”间信息交流的重要媒介，在维持机体能量转换和代谢稳态等方面发挥关键作用。研究表明，MOTS-c能调控成骨与破骨细胞活性，从而调节骨代谢平衡。而运动作为外源性刺激，在“细胞-环境”范畴内，通过影响MOTS-c表达参与多种疾病的发展。这表明运动能成为宏观与微观刺激的桥梁，在疾病演变过程中发挥关键作用。然而，罕有文献对MOTS-c调控骨稳态机制进行系统性回顾与总结。此外，运动对骨组织MOTS-c表达调控的详细机制尚不清晰。基于此，本文全面综述了MOTS-c的分布及功能，总结了其影响骨稳态的详细机制，同时对MOTS-c、运动及骨稳态3者间的潜在关联进行了探索性研究，为代谢性骨病的防治提供了新视角。

关键词： MOTS-c 骨稳态运动线粒体