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序贯胚胎移植法应用于反复种植失败者的临床结局分析

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中华生殖与避孕杂志 2023年第9期43卷 913-918页

作者：张永美刘柳张松英浙江大学医学院附属邵逸夫医院生殖医学中心、浙江省生殖障碍诊治研究重点实验室杭州310000

目的评估序贯胚胎移植法对改善反复胚胎种植失败(recurrent implantation failure,RIF)患者冻融胚胎移植周期临床妊娠结局的作用。方法回顾性队列研究分析2019年1月至2021年9月期间在浙江大学医学院附属邵逸夫医院生殖医学中心行冻融胚... 详细信息

目的评估序贯胚胎移植法对改善反复胚胎种植失败(recurrent implantation failure,RIF)患者冻融胚胎移植周期临床妊娠结局的作用。方法回顾性队列研究分析2019年1月至2021年9月期间在浙江大学医学院附属邵逸夫医院生殖医学中心行冻融胚胎移植的患者,其中符合RIF诊断标准的患者共842例,按胚胎移植方案分为卵裂期胚胎移植组(n=316)、双囊胚移植组(n=212)、序贯胚胎移植组(n=236)和单囊胚移植组(n=78),比较四组的临床基础信息以及妊娠结局。结果卵裂期胚胎移植组临床妊娠率[39.6%(125/316)]显著低于双囊胚移植组[61.8%(131/212),P0.05);卵裂期胚胎移植组种植率[23.9%(151/632)]显著低于双囊胚移植组[43.4%(184/424),P<0.001]、序贯胚胎移植组[33.7%(159/472),P<0.001]和单囊胚移植组[35.9%(28/78),P<0.001];双囊胚移植组多胎率[39.7%(52/131)]显著高于卵裂期胚胎移植组[23.2%(29/125),P<0.001]、序贯胚胎移植组[26.4%(33/125),P<0.001]和单囊胚移植组[0%(0/33),P<0.001]。结论对于RIF患者,序贯胚胎移植较卵裂期胚胎移植及单囊胚移植可以提高临床妊娠率,较双囊胚移植可以降低多胎率。

关键词：反复种植失败序贯胚胎移植囊胚妊娠率

人乳头瘤病毒6b型E7蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

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病毒学报 2011年第5期27卷 416-420页

作者：汤怡周强王琦程浩浙江大学医学院附属邵逸夫医院皮肤科杭州310016 浙江大学医学院附属邵逸夫医院中心实验室杭州310016

进行人乳头瘤病毒6b型(Human papillomavirus type 6b,HPV6b)E7蛋白原核表达并制备其多克隆抗体。用已构建的pGEX-4T-2/HPV6bE7原核表达载体诱导表达大量可溶性融合蛋白GST-HPV6bE7,用Glutathione-Sepharose 4B亲和柱和凝血酶纯化获取HPV6b型E7蛋白。将纯化的E7蛋白免疫新西兰兔并纯化为多克隆抗体IgG。采用Western-Blot及免疫荧光法分析该抗体的效价及特异性。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析显示,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导3～6h后pGEX-4T-2/HPV6bE7表达载体在大肠杆菌中高水平表达可溶性融合蛋白。纯化的E7蛋白免疫新西兰兔后可获得兔多克隆抗体IgG。经Western-Blot及免疫荧光鉴定,兔抗IgG具有高效价性和抗HPV6bE7蛋白特异性。获取纯化的HPV6b型E7蛋白具有较好的免疫原性,其免疫兔产生的多克隆抗体IgG效价高,特异性好,有望进一步用于HPV6b型的生物学功能研究和免疫学效应研究。

关键词：人乳头瘤病毒 E7蛋白多克隆抗体

保留耻骨膀胱复合体对腹腔镜前列腺癌根治术后尿失禁恢复的影响

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中国微创外科杂志 2023年第10期23卷 741-745页

作者：朱再生周鹏飞施红旗应明亮薛亚东徐敏王跃平胡洋肖云渊胡胜晔浙江大学医学院附属金华医院泌尿外科金华321000 浙江大学医学院附属金华医院病理科金华321000 浙江大学医学院附属金华医院医学影像科金华321000 浙江大学医学院附属金华医院中心实验室金华321000

目的探讨保留耻骨膀胱复合体的前列腺癌根治术后尿失禁恢复情况。方法 2017年6月~2020年6月,将局限性前列腺癌行腹腔镜根治性前列腺切除(laparoscopic radical prostatectomy, LRP)的患者按住院号分为保留耻骨膀胱复合体的观察组(n=53... 详细信息

目的探讨保留耻骨膀胱复合体的前列腺癌根治术后尿失禁恢复情况。方法 2017年6月~2020年6月,将局限性前列腺癌行腹腔镜根治性前列腺切除(laparoscopic radical prostatectomy, LRP)的患者按住院号分为保留耻骨膀胱复合体的观察组(n=53)和未保留的对照组(n=51)。2组年龄、体重指数、前列腺特异性抗原、穿刺活检Gleason评分、前列腺体积等差异无显著性(P>0.05)。均行保留神经的LRP。根据每天使用尿垫数量评估尿失禁恢复情况。尿失禁完全恢复定义:每天使用尿垫0个。拔除导尿管后至少随访12个月。结果拔除导尿管当天(24 h),1、3、6和12个月尿失禁完全恢复率观察组均明显高于对照组[39.6%(21/53) vs.17.6%(9/51),P=0.013;66.0%(35/53)vs.35.3%(18/51),P=0.002;84.9%(45/53)vs.56.9%(29/51),P=0.002;92.5%(49/53)vs.70.6%(36/51),P=0.004;98.1%(52/53)vs.84.3%(43/51),P=0.031]。结论在LRP手术时,保留耻骨膀胱复合体技术能早期快速改善术后尿失禁,并显著减少远期(术后12个月)尿失禁。

关键词：前列腺癌腹腔镜根治性前列腺切除术保留耻骨膀胱复合体尿失禁

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人巨细胞病毒博弈宿主免疫进展

病毒学报 2013年第1期29卷 85-91页

作者：郑琪陶然尚世强浙江大学医学院附属儿童医院中心实验室杭州310003

人巨细胞病毒(HCMV)感染在人群中极其普遍,病毒一旦侵入机体,将长期存在于体内,且具有潜伏-活化的生物学特性。在病毒与宿主共同进化的漫长过程中,病毒靶向性的产生了多种免疫逃避机制,通过编码病毒自身免疫调节分子,参与调控机体主要... 详细信息

人巨细胞病毒(HCMV)感染在人群中极其普遍,病毒一旦侵入机体,将长期存在于体内,且具有潜伏-活化的生物学特性。在病毒与宿主共同进化的漫长过程中,病毒靶向性的产生了多种免疫逃避机制,通过编码病毒自身免疫调节分子,参与调控机体主要组织相容性复合体、细胞免疫、体液免疫、细胞因子及趋化因子等方面的功能,以躲避宿主的免疫杀伤作用。HCMV的免疫调节基因被认为在病毒的致病机制中扮演重要角色。本文将对近年来有关HCMV的免疫调控机制研究作一综述,从病毒编码的免疫调节分子功能的角度并结合本实验室的相关研究成果,探讨病毒与宿主免疫的相互作用过程,从病毒干预宿主免疫关键分子作用的角度映射机体对抗病毒的免疫机理。

关键词：人巨细胞病毒免疫逃避趋化因子炎症反应

FAK抑制剂PF573228负调控CD15s抑制肝癌细胞侵袭的作用机制研究

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浙江医学 2021年第6期43卷 600-605,I0005页

作者：华宏军陈萍叶晓华丁进浙江大学医学院附属金华医院消化内科 321000 浙江大学医学院附属邵逸夫医院中心实验室

目的探讨黏着蛋白激酶(FAK)抑制剂PF573228对肝癌(HCC)细胞的抑制效果以及作用机制。方法采用CCK-8法及Transwell小室实验检测不同浓度PF573228(0、0.01、0.1、1、10μM)对HCC细胞系(HepG2和SMMC-7721)相对活力及侵袭能力的影响。对HCC... 详细信息

目的探讨黏着蛋白激酶(FAK)抑制剂PF573228对肝癌(HCC)细胞的抑制效果以及作用机制。方法采用CCK-8法及Transwell小室实验检测不同浓度PF573228(0、0.01、0.1、1、10μM)对HCC细胞系(HepG2和SMMC-7721)相对活力及侵袭能力的影响。对HCC细胞转染pcDNA-CD15s质粒进行过表达处理,分为pcDNA-CD15s组、PF573228组、PF573228+pcDNA-CD15s组,采用荧光定量PCR和Western blot法检测CD15s相对表达量及钙黏蛋白E(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、FAK、磷酸化FAK(FAK397)及CD15s蛋白表达水平。结果随着PF573228浓度增加,两种HCC细胞相对活力均逐渐降低,差异均有统计学意义(均P0.05);与PF573228组比较,PF573228+pcDNA-CD15s组E-cadherin蛋白表达水平有所降低,Vimentin蛋白表达水平有所增加(均P<0.05)。结论PF573228可抑制肝癌细胞增殖和侵袭,同时具有浓度依赖性,这种现象是通过负调控CD15s介导的。

关键词：黏着蛋白激酶肝癌 CD15s 侵袭

磷脂酶C1基因rs2274223位点多态性与下咽癌临床病理特征及预后的相关性分析

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中国耳鼻咽喉头颈外科 2023年第11期30卷 732-734页

作者：戴信深杨音希潘恺凌章艳斐诸葛盼浙江大学医学院附属金华医院耳鼻咽喉头颈外科浙江金华321000 浙江大学医学院附属金华医院中心实验室浙江金华321000 浙江大学医学院附属金华医院病理科浙江金华321000

目的探讨磷脂酶C1(phospholipase C1,PLC1)基因rs2274223位点多态性与下咽癌临床病理特征及预后的相关性。方法收集2016年1月~2022年12月间浙江大学医学院附属金华医院耳鼻咽喉头颈外科收治的42例下咽癌患者,所有患者均行根治手术,记... 详细信息

目的探讨磷脂酶C1(phospholipase C1,PLC1)基因rs2274223位点多态性与下咽癌临床病理特征及预后的相关性。方法收集2016年1月~2022年12月间浙江大学医学院附属金华医院耳鼻咽喉头颈外科收治的42例下咽癌患者,所有患者均行根治手术,记录临床病理数据,并均取全血3 ml作DNA提取,Sanger法测序检测PLCE1基因rs2274223位点单核苷酸多态性,分析其与下咽癌临床病理特征及预后的相关性。结果 PLCE1基因rs2274223位点在42例下咽癌患者中有16例突变为AG,位点突变与肿瘤分化程度相关(χ^(2)=5.301,P=0.021),K-M生存分析提示rs2274223位点突变与未突变的下咽癌患者3年生存率分别为75.0%和83.1%,5年生存率分别为18.8%和31.2%,差异有统计学意义(χ^(2)=5.475,P=0.019)。结论PLCE1基因rs2274223位点突变与下咽癌低分化相关,该位点突变的下咽癌患者预后更差。

关键词：下咽肿瘤(Hypopharyngeal Neoplasms) 预后(Prognosis) 基因(Genes) 磷脂酶C1(phospholipase C1)

血液科病房碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌感染的调查与干预

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中华医院感染学杂志 2017年第16期27卷 3651-3654页

作者：同俏静赵晋陈冬容王海萍赵锋俞云松浙江大学医学院附属邵逸夫医院医院感染管理科浙江杭州310016 浙江大学医学院附属邵逸夫医院医院中心实验室浙江杭州310016 浙江大学医学院附属邵逸夫医院医院检验科浙江杭州310016 浙江大学医学院附属邵逸夫医院医院感染性疾病科浙江杭州310016

目的通过对血液科病房碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)致3例血流感染病例的调查及感控干预,为预防医院感染暴发流行提供参考依据。方法 2013年6月事件发生期间设定为A组107例,2013年7月-12月设置为B组629例,2014年设置为C组1 081例,2... 详细信息

目的通过对血液科病房碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)致3例血流感染病例的调查及感控干预,为预防医院感染暴发流行提供参考依据。方法 2013年6月事件发生期间设定为A组107例,2013年7月-12月设置为B组629例,2014年设置为C组1 081例,2015年设置为D组1 161例;对2013年6月3例CRKP致血流感染的患者进行临床及分子流行病学调查分析,并采取消毒隔离等干预措施,根据事件发生期、干预后分组并追踪30个月,运用χ~2检验分析不同组间感染发生率差异。结果 3例菌株属同一基因克隆,经启动消毒隔离等干预措施,观察干预后仅发生1例CRKP新病例,事件发生期、干预后CRKP感染率差异有统计学意义(P医院感染的发生。

关键词：碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌血流感染医院获得性感染

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龋病儿童唾液菌群动态变化及功能分析

四川大学学报（医学版） 2022年第2期53卷 242-249页

作者：王媛张杰凌宗欣邓淑丽浙江大学医学院附属口腔医院·浙江大学口腔医学院·浙江省口腔疾病临床医学研究中心·浙江省口腔生物医学研究重点实验室·浙江大学癌症研究院杭州310016 传染病诊治国家重点实验室浙江大学医学院附属第一医院杭州310003

目的观察龋病和无龋儿童唾液菌群的动态变化,同时对二者口腔微生态在糖代谢及多种氨基酸合成转运过程中的功能差异进行分析。方法采用宏基因组学的方法分别对10例无龋儿童和10例龋病儿童唾液菌群进行组成及功能分析,6个月后,进一步利用P... 详细信息

目的观察龋病和无龋儿童唾液菌群的动态变化,同时对二者口腔微生态在糖代谢及多种氨基酸合成转运过程中的功能差异进行分析。方法采用宏基因组学的方法分别对10例无龋儿童和10例龋病儿童唾液菌群进行组成及功能分析,6个月后,进一步利用PacBio SMRT测序技术,分析两组儿童口腔菌群变化,探索疾病和健康状态下,口腔菌群变化规律,从组成到功能对儿童口腔微生态进行全面解读。结果随时间推移,两组儿童口腔微生态组成发生显著改变,在门水平上,菌群变化趋势一致,Firmicutes比例增加,而Actinobacteria和Bacteroidetes比例降低。在属水平上,两组儿童唾液菌群的变化出现差异,其中,Lactobacillus、Methylobacterium和Megasphaera在龋病组儿童中的丰度呈上升趋势,而在无龋组儿童中呈下降趋势。在种水平上,隶属于乳杆菌属的L.fermentum、L.gasseri、L.oris、S.downei等菌株在龋病儿童中呈上升趋势,但在无龋儿童中始终处于较低水平。S.gordonii以及S.mutans在龋病儿童中有一定程度下降,但在无龋儿童中始终处于低水平。S.mutans和C.gracilis等菌种与龋失补牙数(decayed,missing and filled teeth,dmft)呈正相关,而N.flavescens与dmft呈负相关。三羧酸循环关键节点相关基因,gltA、icd以及mqo,谷氨酸生成相关基因gudB以及精氨酸生成相关基因argAB/C/J在无龋儿童中丰度显著增加。同时,电子传递链中的NADH脱氢酶相关基因nuoB/C/D/E/H/I/J/K/L/M在无龋儿童中的丰度显著增加。结论儿童唾液菌群是动态变化的,其变化趋势与口腔健康状态有关,健康的口腔微生态中有更广泛的氧化磷酸化,谷氨酸以及精氨酸等氨基酸生成和转运也更为活跃。

关键词：龋病唾液菌群高通量测序氨基酸生成

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近红外二区活体荧光成像在肿瘤诊疗中的应用

高等学校化学学报 2022年第12期43卷 264-281页

作者：汪诗琪罗博文俞计成顾臻浙江大学药学院浙江省先进递药系统重点实验室杭州310058 浙江大学医学中心浙江省系统与精准医学实验室良渚实验室杭州311121 浙江大学医学院附属邵逸夫医院杭州310016 浙江大学金华研究院金华321299 浙江大学高分子科学与工程学系高分子合成与功能构造教育部重点实验室杭州310027

由于具备组织穿透深度深和时空分辨率高等优势,近年来近红外二区(Near-infrared-Ⅱ,NIR-Ⅱ,1000~1700 nm)荧光成像技术得到了快速发展,其在肿瘤临床诊断和治疗的潜力更是引发了广泛关注.本文首先阐释了NIR-Ⅱ窗口荧光成像的原理及其优势... 详细信息

由于具备组织穿透深度深和时空分辨率高等优势,近年来近红外二区(Near-infrared-Ⅱ,NIR-Ⅱ,1000~1700 nm)荧光成像技术得到了快速发展,其在肿瘤临床诊断和治疗的潜力更是引发了广泛关注.本文首先阐释了NIR-Ⅱ窗口荧光成像的原理及其优势,随后根据结构分类归纳总结了现有荧光团的特征,重点介绍了荧光探针在性能优化上的进展以及在肿瘤早期检测、术中导航和光疗中的应用,最后讨论了现有NIR-Ⅱ荧光探针的局限以及临床转化面临的挑战,并对未来的发展方向进行了展望.

关键词：近红外二区荧光成像活体成像药物递送肿瘤诊疗