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甘草的生物学活性及其在畜禽养殖中的应用研究进展

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动物营养学报 2023年第11期35卷 6955-6966页

作者：季小禹刘宁李元晓张才河南科技大学动物福利与健康养殖河南省国际联合实验室洛阳471023 河南省畜禽新发病检测与防控工程研究中心洛阳471023

甘草是一种常用的药用植物,含有多种生物活性成分,如类黄酮和三萜皂苷等,其具有抗氧化、抗炎、抗癌、抗病毒等生物学活性。将甘草应用到畜禽饲粮中可促进动物器官发育,刺激消化和食欲,进而促进其生长发育。此外,甘草还可以改善血清生化... 详细信息

甘草是一种常用的药用植物,含有多种生物活性成分,如类黄酮和三萜皂苷等,其具有抗氧化、抗炎、抗癌、抗病毒等生物学活性。将甘草应用到畜禽饲粮中可促进动物器官发育,刺激消化和食欲,进而促进其生长发育。此外,甘草还可以改善血清生化指标、胴体性状、畜产品品质、免疫功能和肠道健康等。本文综述了甘草的生物学活性和甘草制剂类型及应用,以期为有效利用甘草资源提供参考。

关键词：甘草生物活性制剂畜禽养殖

引起奶牛隐性乳房炎的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙雷氏菌的多重PCR检测

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黑龙江畜牧兽医 2019年第8期 90-92页

作者：邓凯伟马德青赵云焕信阳农林学院/河南省大别山区生态畜禽健康生产工程研究中心河南信阳464100

为了能同时检测奶牛隐性乳房炎中金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙雷氏菌三种病原菌,试验设计了3对不同的特异性引物,在金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙雷氏菌单重PCR的基础上进行多重PCR扩增。结果表明:扩增体系(50μL)为DNA Polymerase 1... 详细信息

为了能同时检测奶牛隐性乳房炎中金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙雷氏菌三种病原菌,试验设计了3对不同的特异性引物,在金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙雷氏菌单重PCR的基础上进行多重PCR扩增。结果表明:扩增体系(50μL)为DNA Polymerase 1μL,金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙雷氏菌上、下游引物各1μL,混匀后取混合物5μL,2×Multiplex Buffer 25μL,DNA模板各2μL, ddH_2O 13μL。扩增程序为95℃5 min;95℃30 s, 60℃90 s, 72℃1 min,35个循环;72℃10 min。设计的多重PCR方法可同时扩增出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙雷氏菌的目的基因片段。说明用设计的3对特异性引物进行的多重PCR扩增特异性强,可用于临床。

关键词：奶牛隐性乳房炎多重PCR 金黄色葡萄球菌大肠杆菌沙雷氏菌

小鼠大肠杆菌乳房炎模型对其卵母细胞发育影响的研究

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黑龙江畜牧兽医 2019年第9期 88-90,182页

作者：邓凯伟王珍珠赵云焕信阳农林学院河南省大别山区生态畜禽健康生产工程研究中心河南信阳464100

为了研究构建的小鼠大肠杆菌乳房炎模型对生殖机能的影响,试验用浓度为6×10~9个/mL的大肠杆菌按体重19.03 mL/kg注射泌乳母鼠,然后测量体温,检测血液中白细胞数量,PCR扩增泌乳母鼠乳腺中大肠杆菌目的基因片段,观察病理组织切片,采集泌... 详细信息

为了研究构建的小鼠大肠杆菌乳房炎模型对生殖机能的影响,试验用浓度为6×10~9个/mL的大肠杆菌按体重19.03 mL/kg注射泌乳母鼠,然后测量体温,检测血液中白细胞数量,PCR扩增泌乳母鼠乳腺中大肠杆菌目的基因片段,观察病理组织切片,采集泌乳母鼠卵母细胞并进行体外培养。结果表明:人工成功诱导出泌乳母鼠大肠杆菌乳房炎模型;泌乳母鼠注射大肠杆菌菌液后其体温和血液中的白细胞数变化不明显(P>0.05);从泌乳母鼠乳腺组织中扩增出大肠杆菌目的基因片段;泌乳母鼠乳腺腺管及腺泡上皮细胞呈现不同程度的卡他性或化脓性乳腺炎病变;泌乳母鼠的卵母细胞发育到MⅡ期的成熟率显著降低(P<0.05)。说明人工诱导的泌乳母鼠大肠杆菌乳房炎模型对其卵子的发育能力具有一定的抑制作用。

关键词：乳房炎小鼠模型大肠杆菌卵母细胞成熟率

鸡源产气荚膜梭菌分离鉴定和药敏试验及枯草芽孢杆菌对其抑制作用

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动物医学进展 2025年第1期46卷 16-22页

作者：叶碧锦欧兰欣王定爱方肆云申翰钦严专强戚南山孙铭飞黄福强佛山科学技术学院广东佛山528225 广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省畜禽疫病防治研究重点实验室/农业农村部禽流感等家禽重大疾病防控重点实验室广东广州510640 温氏食品集团股份有限公司广东新兴527400

为探究产气荚膜梭菌在黄羽肉鸡重要养殖区域的流行及耐药情况,采集广东、广西等华南地区,安徽、江苏、福建等华东地区6个规模化肉鸡养殖场9份肠道病变样品进行分离鉴定和毒素分型检测、耐药性分析,琼脂扩散试验检测野外分离枯草芽孢杆菌... 详细信息

为探究产气荚膜梭菌在黄羽肉鸡重要养殖区域的流行及耐药情况,采集广东、广西等华南地区,安徽、江苏、福建等华东地区6个规模化肉鸡养殖场9份肠道病变样品进行分离鉴定和毒素分型检测、耐药性分析,琼脂扩散试验检测野外分离枯草芽孢杆菌BSGZ7对产气荚膜梭菌的抑菌效果。结果显示,从肠道样品中分离到7株A型和2株G型产气荚膜梭菌,9株分离菌和1株标准菌均对阿莫西林、青霉素、头孢噻肟、氨苄西林、头孢氨苄、氟苯尼考、头孢曲松具有较高的敏感性,对庆大霉素、卡那霉素、四环素、多西环素、链霉素、磺胺异恶唑、林可霉素、红霉素、多黏菌素B等抗菌药物普遍耐药,枯草芽孢杆菌BSGZ7发酵液均对10株菌有抑菌效果。结果表明枯草芽孢杆菌对产气荚膜梭菌具有一定抑菌作用,有望成为防控鸡坏死性肠炎的新型绿色安全的抗菌制剂,同时也为临床上鸡坏死性肠炎的防控和治疗提供了参考依据。

关键词：产气荚膜梭菌分离鉴定药敏试验枯草芽孢杆菌抑菌活性

奶牛隐性乳房炎肠球菌的分离、鉴定及药敏试验

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黑龙江畜牧兽医 2019年第12期 79-81,168页

作者：邓凯伟贾世云赵云焕信阳农林学院牧医工程学院/河南省大别山区生态畜禽健康生产工程研究中心

为了对奶牛隐性乳房炎的肠球菌进行分离、鉴定及其耐药情况分析,试验采用细菌富集、分离纯化、生化鉴定、PCR测定的方法对采集的8个奶牛场26份奶样进行肠球菌的检测,并对分离菌进行药敏试验。结果表明:肠球菌在哥伦比亚血琼脂培养基上... 详细信息

为了对奶牛隐性乳房炎的肠球菌进行分离、鉴定及其耐药情况分析,试验采用细菌富集、分离纯化、生化鉴定、PCR测定的方法对采集的8个奶牛场26份奶样进行肠球菌的检测,并对分离菌进行药敏试验。结果表明:肠球菌在哥伦比亚血琼脂培养基上形成圆形隆起、光滑湿润、乳白色、透明水滴样的半圆形菌落,革兰氏染色为阳性,呈椭圆形双球、短链状或长链状连续排列;待检细菌的生化试验结果符合肠球菌的生化特性;PCR扩增的目的条带大小为1 681 bp,扩增序列在NCBI上通过BLAST进行同源性比对分析,确定为肠球菌;分离的肠球菌对万古霉素、诺氟沙星、左氧氟沙星、环丙沙星、呋喃妥因高度敏感,对红霉素中度敏感,对克林霉素、克拉霉素、米诺环素、复方新诺明低度敏感,对大观霉素、四环素、青霉素G、苯唑西林、多黏菌素B耐药。说明通过哥伦比亚血琼脂培养基和PCR技术可以分离与鉴定乳房炎奶样中的肠球菌,可交替使用上述敏感抗生素对由肠球菌引起的奶牛乳房炎进行防治。

关键词：奶牛乳房炎肠球菌 PCR 生化鉴定药敏试验

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一起猪流行性腹泻病例快速控制的病例报告

养猪 2023年第1期 76-79页

作者：高飞韩彬张才河南科技大学动物科技学院河南洛阳471023 河南省畜禽新发病检测与防控工程研究中心河南郑州450000 河南省新县畜牧产业发展中心河南新县465500

猪流行性腹泻病是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的以严重腹泻为特征的病毒性传染病,临床症状主要为:仔猪呕吐、腹泻、脱水、死亡率高(严重时,产房仔猪可达到100%死亡率),成年猪感染亦能引起腹泻,但死亡率较低。由于PEDV毒株易变异,疫苗... 详细信息

猪流行性腹泻病是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的以严重腹泻为特征的病毒性传染病,临床症状主要为:仔猪呕吐、腹泻、脱水、死亡率高(严重时,产房仔猪可达到100%死亡率),成年猪感染亦能引起腹泻,但死亡率较低。由于PEDV毒株易变异,疫苗免疫效果不佳,因此,该病在猪场时有发生,冬春寒冷季节更为严重。尤其是规模化猪场,一旦发病,损失巨大。本文对一起规模化猪场发生的猪流行性腹泻病毒病例进行了简要阐述,供大家参考借鉴。

关键词：猪流行性腹泻免疫防控

鳗弧菌(Vibrio anguillarum)核酸适配体的筛选及其结合蛋白的分离鉴定

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生物化学与生物物理进展 2022年第1期49卷 250-261页

作者：郑江刘慧敏黄力行林筱钧彭雪云江兴龙周建传汤学敏集美大学水产学院鳗鲡现代产业技术教育部工程研究中心福建省水产生物育种与健康养殖工程研究中心厦门361021 福建省特种水产配合饲料重点实验室福清350308

目的鳗弧菌(Vibrio anguillarum)是水产养殖中的重要条件致病菌,每年给水产养殖业造成巨大的经济损失,研究其致病机制、对其进行快速的检测鉴定是其病害防治的前提和基础。核酸适配体因其高亲和力、高特异性等多种优点,在微生物的靶标... 详细信息

目的鳗弧菌(Vibrio anguillarum)是水产养殖中的重要条件致病菌,每年给水产养殖业造成巨大的经济损失,研究其致病机制、对其进行快速的检测鉴定是其病害防治的前提和基础。核酸适配体因其高亲和力、高特异性等多种优点,在微生物的靶标分析、检测鉴定以及致病机制等多个领域都呈现出较好的应用潜力。因此,筛选鳗弧菌的核酸适配体,利用核酸适配体对鳗弧菌相关位点进行分析鉴定,不仅能为鳗弧菌的检测鉴定提供一个新的手段,对于探索鳗弧菌相关位点在其病害防治中的作用也具有重要意义。方法以鳗弧菌为靶目标,采用每轮测序的SELEX筛选方法,从高频序列中筛选鳗弧菌的核酸适配体;采用单链DNA浓度法测定核酸适配体的亲和力,研究核酸适配体对鳗弧菌的亲和特异性;采用Origin软件、选择反比例函数(Hyperbola函数)进行非线性拟合,获得核酸适配体的亲和常数(K_(d))和最大亲和力(A_(m));采用磁分离技术和聚丙烯酰胺凝胶电泳分离纯化出核酸适配体H5的结合蛋白,通过质谱对该蛋白质进行分析鉴定,并利用Prabi、Phyre2、Psortb 3.0等在线网站分析该结合蛋白的空间结构及其亚细胞位置。结果建立了以高频序列为基础的快速筛选核酸适配体的方法,采用该方法筛选出了一系列对鳗弧菌有较好亲和特异性的核酸适配体(H1、H5、H6、H12、H25、H26、H28、H33、H38和H42),测定了其中6个核酸适配体(H1、H5、H25、H26、H33、H38)的K_(d)和A_(m),相应的K_(d)值分别为(78.77±10.99)、(180.65±23.01)、(121.14±21.43)、(276.42±51.23)、(89.24±10.84)、(167.12±23.73)nmol/L,A_(m)值分别为(229.42±8.35)、(891.04±50.14)、(647.20±41.51)、(720.85±75.35)、(510.65±33.89)、(576.06±38.73)nmol/L。核酸适配体H5的结合蛋白为鳗弧菌中的丙酮酸脱氢酶E1组分,该蛋白质主要位于细胞质中,α螺旋和β折叠结构构成了其主要骨架,环状的无规卷曲结构则大多分布在该蛋白质的外部。并对结合蛋白与核酸适配体的互作区域进行了分析推测。结论以高频序列为基础,采用每轮测序的SELEX筛选方法具有较高的筛选效率;核酸适配体最终的表观亲和力是K_(d)和A_(m)共同作用的结果,A_(m)在核酸适配体的表观亲和力中也发挥着不可忽略的作用;核酸适配体H5可能是通过胞吞等方式进入鳗弧菌内部,与细胞质中的丙酮酸脱氢酶E1组分结合,说明核酸适配体是可以进入细菌内部与相应的靶标结合,这为鳗弧菌病害的防控及新型核酸适配体药物的开发提供了一个新的思路。

关键词：核酸适配体鳗弧菌高频序列亲和常数最大亲和力结合蛋白 SELEX 丙酮酸脱氢酶

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热毒宁注射液对多重耐药肺炎克雷伯菌的抗菌作用

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中国医院药学杂志 2024年第19期44卷 2243-2249页

作者：赵娅吴娅丽秦玺陈小菲王晴张明亮王晓艳李伟霞唐进法河南中医药大学第一附属医院药学部河南郑州450000 河南中医药大学药学院河南郑州450046 河南省中药临床应用、评价与转化工程研究中心河南省中药安全评价与风险防控工程研究中心河南郑州450000

目的:探讨热毒宁注射液(Reduning Injection,RDN)干预多重耐药肺炎克雷伯菌(multiple drug resistant Klebsiella pneumoniae,MDR-KP)的有效性。方法:收集临床分离的患者来源的KP,微量肉汤稀释法测临床常用KP防线药物美罗培南(meropenem,MEM)、替加环素(tigecycline,TIG)、多粘菌素B(colistin B,COL)的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC),筛选MDR-KP,测定RDN的MIC;24 h时间-生长曲线、半定量结晶紫法分别检测RDN对KP具体生长情况的影响及对生物膜的形成和破坏作用;建立MDR-KP小鼠脓毒症模型,采用RDN进行治疗干预,检测给药后血常规、肺组织和脾组织脏器载菌量的变化,HE染色分析肺组织和脾组织的病理改变,ELISA测血清炎症因子IL-6、TNF-α、IL-1β含量。结果:MEM、TIG、COL对所选KP的MIC分别为32、64、64μg·mL–1,提示该菌株为MDR-KP。RDN对该菌株的MIC为1.3 g·mL–1。RDN对MDR-KP生长及其生物膜的形成有显著抑制作用,但对已形成的生物膜的破坏作用不明显。RDN能够调节脓毒症小鼠的白细胞总数、中性粒细胞数和单核细胞数;减少肺、脾组织脏器载菌量;修复MDR-KP造成的肺、脾组织损伤;降低血清炎症因子IL-6、TNF-α的表达。结论:RDN可通过抑制MDR-KP生长和生物膜的形成,降低脓毒症小鼠体内炎症水平,在体内外对MDR-KP均有抑制作用,既定位了RDN的临床应用范围,又丰富了RDN清热解毒的科学内涵,该研究策略也可为其他临床抗MDR-KP治疗研究提供借鉴。

关键词：热毒宁注射液多重耐药肺炎克雷伯菌抗菌作用生物膜脓毒症

参附益心颗粒对心肌梗死后心力衰竭大鼠线粒体动力学的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第11期30卷 87-94页

作者：宋玉莹崔琳何玉凤祝慧颖刘卫红沈思河南中医药大学第一附属医院河南省中药安全评价与风险防控工程研究中心郑州450000 河南中医药大学郑州450046

目的:采用左冠状动脉前降支结扎术制备心肌梗死后心力衰竭大鼠模型,观察参附益心颗粒对心力衰竭大鼠线粒体动力学的影响。方法:50只SD雄性大鼠随机取10只为假手术组,其余为造模组,采用左冠状动脉前降支结扎术制备心肌梗死后心力衰竭大... 详细信息

目的:采用左冠状动脉前降支结扎术制备心肌梗死后心力衰竭大鼠模型,观察参附益心颗粒对心力衰竭大鼠线粒体动力学的影响。方法:50只SD雄性大鼠随机取10只为假手术组,其余为造模组,采用左冠状动脉前降支结扎术制备心肌梗死后心力衰竭大鼠模型。根据术后28 d左室射血分数(LVEF)将模型大鼠随机分为模型组、参附益心颗粒低、高剂量组(3.011、15.055 g·kg^(-1))、沙库巴曲缬沙坦钠组(20.83 mg·kg^(-1))。各给药组每日灌胃相应剂量药液,假手术组、模型组灌胃等体积生理盐水,1次/d,连续给药28 d,每组6只。超声检测心功能参数,称量大鼠心脏质量、体质量,计算心脏质量指数,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清脑钠肽(BNP)和可溶性生长刺激表达基因2蛋白(sST2)含量,苏木素-伊红(HE)染色观察心肌病理形态,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测线粒体融合蛋白1/2(Mfn1/2)、视神经萎缩蛋白1(Opa1)、动力相关蛋白1(Drp1)、分裂蛋白1(Fis1)mRNA及蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组的LVEF、Mfn1、Mfn2、Opal mRNA及蛋白水平降低,BNP、sST2、心脏质量指数、Drp1、Fis1 mRNA及蛋白水平增加(P<0.05);与模型组比较,参附益心颗粒高剂量组、沙库巴曲缬沙坦钠组LVEF、Mfn1、Mfn2、Opal mRNA及蛋白表达增高(P<0.05),BNP、sST2、心脏质量指数、Drp1、Fis1 mRNA及蛋白水平降低(P<0.05)。病理观察显示,与假手术组比较,模型组心肌细胞排列紊乱、炎性细胞浸润,心肌纤维化;与模型组比较,各给药组炎性细胞浸润、心肌或肌间质纤维化程度均有改善缓解。结论:参附益心颗粒能抗心力衰竭,降低心脏质量指数、减少BNP、sST2含量,改善心功能,其机制可能与调整线线粒体动力学相关。

关键词：参附益心颗粒心肌梗死心力衰竭线粒体动力学心功能参数融合蛋白聚合酶链式反应(PCR)